Посудомоечная машина IKEA ЭЛЬПСАМ — «Посудомоечная машина Икея Эльпсам — две поломки, и в итоге…»
Приветствую всех в этом отзыве!
Сегодня хочу рассказать о посудомоечной машине Эльпсам от IKEA. Это была первая моя посудомойка, хотя сначала я противилась почему-то данной технике на кухне — мне казалось что это жутко неэкономно по электроэнергии и воде, дорого в обиходе и перебъет все тарелки.
К счастью, звезды так удачно сошлись, что меня смогли убедить в нужности посудомойки на кухне, и как только я воспользовалась этой техникой в первый раз, начала ее заботливо гладить по крышке и шутливо называть «моя ж ты маленькая» )))
~~~~~~~~~~~~~~~ Эльпсам ~~~~~~~~~~~~~
Размер в собранном виде
Ширина: 44.6 см
Глубина: 55.5 см
Высота: 81.8 см
Длина провода: 150 см
Вес: 31.89 кг
Основные характеристики
- Бесплатно 5 лет гарантии. Подробнее об условиях гарантии – в гарантийной брошюре.
- Вы можете вымыть до 9 комплектов посуды одновременно, использовав всего 13 литров воды, что позволяет экономить воду и электроэнергию.
- 5 программ; выбирайте программы в зависимости от блюда и ваших потребностей.
- Верхняя корзина регулируется по высоте, обеспечивая место для тарелок и бокалов разного размера.
- С функцией прекращения подачи воды при обнаружении протечки.
- Класс энергопотребления: А – по шкале от А+++ (наиболее эффективный) до D (наименее эффективный).
- Приблизительный ежегодный расход электроэнергии и воды (280 циклов): 250 кВт*ч/3640 литров.
- Расход энергии: 0,878 кВт*ч/стандартный цикл, программа «эко».
- Объем: столовый набор на 9 персон.
- Класс сушки: А.
Уровень шума (IEC): 50 дБ (A). - Это встраиваемая модель.
- Класс мойки: А.
- Тестовая программа: Эко, 50°C.
- Расход воды: 13 л/стандартный цикл, функция «эко».
- Эко-мытье, 50°C.
- Программа ополаскивания.
- Нормальное мытье, 65°C.
- Интенсивное мытье, 70°C.
- Быстрый цикл мытье: 60°C, 30 мин.
- 2 складные полки для чашек и 2 складные подставки для тарелок прилагаются.
- Напряжение: 220-240 В.
- Электрический индикатор соли. Размягчается известь, содержащаяся в воде, обеспечивает качественное мытье и предотвращает появление известкового налета в посудомоечной машине.
- Для дверцы 45 см.
~~~~~~~~~~~~ Посудомоечная машина Эльпсам ~~~~~~~~~~~~
По тем временам она стоила в районе 12-14тыс.
~ У нее есть несколько температурных режимов, можно споласкивать посуду, и, не смотря на компактность, она довольно таки вместительная.
~ Работала посудомоечная машина довольно-таки тихо.
~ Тарелки и посуду ни разу не испортила, разве что пару пластиковых бутыльков от косметических масел — они немного деформировались от температуры воды, но это не критично от слова совсем. С многоразовыми пластиковыми контейнерами все нормально.
~ Как и во всех посудомойках, есть два варианта мытья посуды: с солью или прессоваными средствами. Я выбрала второй вариант.
~ Лотки для посуды с ограничителем — то есть, не вылетают из пазов, но в то же время, если нужно — их легко можно вытащить. Таким образом можно мыть что-то более габаритное, но я все размещала и так.
Верхний лоток регулируется по высоте: нужно его выдвинуть и приподнять/опустить.
~ Промывала посуду машинка средне и хорошо, качество сильно зависело от средства для мытья посуды.
Варианты загрузки корзин
~~~~~~~~~~~~~ Внезапно ~~~~~~~~~~~~~~~
Все бы ничего, как спустя года 2.5-3 посудомойка вдруг сломалась.
Вообще же, гарантия или 3 или 5 лет. Мы отвезли им машинку, и ждали ее обратно больше месяца. Разумеется, все в оговоренные законом сроки, претензий нет, но факт тот, что сделали не завтра и не за неделю.
Как вы понимаете, техника встраиваемая, и все это время под столешницей зияла дыра, но и это не самое печальное. Думаю, владельцы посудомоек поймут каково это остаться без чудесной машинки на такой срок.
Если же у вас пока не было посудомоечной машинки — представьте, что у вас больше месяца нет под рукой плиты или стиральной машинки. Как-то грустненько сразу.
После того, как машинку нам вернули, мы даже устроили чаепитие, позвали соседей, запустили салют, устроили праздник на весь квартал, и с еще большим трепетом начали мыть посуду в прекрасной машинке ♡
Варианты загрузки корзин
~~~~~~~~~~~~~~ Внезапно-2 ~~~~~~~~~~~~~~
К сожалению, спустя несколько месяцев машинка сломалась опять, только уже что-то другое. Мастер приехал тот же самый, ))), поэтому мне не особо хотелось с ним разговаривать и я особо не вникала в тонкости, оставив его опять же в мужской компании. Хотя сидела переживала за машинку и ждала, что может ее дома починят.
Но все произошло по той же схеме, что и прежде.
Спустя положенный срок мы позвонили в сервис и узнали, что нужная деталь будет идти еще столько же, если не больше.
Терпения после двух долгих поломок не осталось, поэтому решили заменить машинку или забрать деньги.
И тут такая история: из-за кризиса посудомойки стали стоить в два раза больше, и как вариант можно было бы поменять на такую же модель в Икеа, чтобы не терять в деньгах(хотя она тоже подорожала, но по гарантии можно поменять бесплатно на ту же модель). Напомню, что все это гарантийная история.
Но оказалось, что то ли такая же машинка стала немножко другой по функциям, то ли артикул у нее стал немножко другой, и потому заменить оказалось нереально, разве что с доплатой в 2 раза.
И вот взять таким образом то же самое, чтобы опять потом ломалось?.. Как-то не рискнули, поэтому история с Икеа закончилась тем, что мы забрали деньги.
Кстати, со всеми этими ремонтами обратили внимание, что посудомойка произведена по заказу Икеа фирмой Электролюкс.
Варианты загрузки корзин
~~~~~~~~~~~~~~ ИТОГ ~~~~~~~~~~~~~~
Посудомойка Эльпсам мне очень нравилась, тем более это у меня первая такая техника, это как «до и после» ))), и мне не хватает некоторых ее особенностей в новой посудомойке. Но сами понимаете, она ломалась 2 раза, и второй раз с концами, так что ставить ей больше 3х звезд не получится.
~~~~~
Отзывы на средства для посудомоечной машины:
✔Таблетки Top House 6 в 1
✔Таблетки Snowter 5 в 1
✔Средство CleanOK 5в1
✔Средство для посудомоечной машины Finish Quantum Gel
✔Таблетки Finish
~~~~
Стиральный порошок без фосфатов
~~~~~~~
Отзывы на покупки из IKEA:
Кресло-стул IKEA Малькольм
Силиконовая кисть для выпечки IKEA Губброра
Силиконовая лопатка скребок IKEA Губброра
Терка с контейнером IKEA VARDEFULL 365+
Пароварка IKEA Стабиль
Сушилка для кухонных принадлежностей
Радостная ломтерезка IKEA Спритта
Вот и все что я хотела рассказать в этом отзыве, если у вас есть какие-либо вопросы, можете задать их в комментариях
Подписывайтесь на мои отзывы, и вы всегда будете в курсе того, какой лак самый лучший, чем идеально снять косметику, и какая тушь самая водостойкая.
До встречи : )
Встраиваемая посудомоечная машина Эльпсам — отзывы
Те, кто хотя бы иногда посещают магазины ИКЕА, хорошо знают фирменную посудомоечную машину Эльпсам. Уже очень многие приобрели ее для своей кухни, потому что и качество неплохое, и цена приемлемая. Тем не менее, мы не станем слепо подражать группе пользователей, которые по какой-то причине покупают ту или иную технику. Сначала следует узнать их мнение, взвесить факты, а уж потом принять решение.
Положительные
Сергей, г. Сергиев Посад
Был наслышан, что посудомойки Эльпсам изготавливаются под контролем двух ведущих фирм по производству кухонной техники Whirlpool и Electrolux. Я подумал, что такие хорошие, зарекомендовавшие себя с положительной стороны компании, просто не могут сделать плохую технику и купил. Видимо не зря.
- Меня поразила длительность гарантии. Производитель берет на себя обязательства по гарантийному ремонту в течение 5 лет;
- Качество мойки отличное, отмывает без труда даже пригоревший жир.
- Дверца открывается плавно и ее можно зафиксировать в приоткрытом положении.
- Корзины хорошо продуманы. В верхней корзине есть держатели для тарелок и бокалов, которые при необходимости можно убрать.
Корзины легко перемещаются по вертикали, кроме того они без усилия выезжают вперед для дозагрузки.
- Встроен диффузионный барьер, который хорошо защищает от влаги.
- По окончании программы, срабатывает звуковой сигнал.
Меня машинка приятно удивила своим качеством. Допускаю, что со временем производитель начнет борзеть, но пока что все отлично. Рекомендую!
Александр, г. Челябинск
Недавно покупал кухонную мебель в известном гипермаркете и мне продавец посоветовал в придачу взять посудомойку Эльпсам. Пришлось немного доплатить, но в целом машинка обошлась дешево. Устанавливается машинка очень просто, я все своими руками сделал, а моет так вообще отлично. Для засохшей посуды включаю предварительное ополаскивание на 14 минут, а затем интенсивный режим. У грязи нет шансов. Пять баллов!
Дарья, г. Пермь
Очень шумно работает машинка, но это единственный ее недостаток, в остальном все хорошо. Эльпсам машинка непривередливая, потребляет любые средства для мытья. Посуда отмывается хорошо, даже на предметах из тонкого стекла не видно ни малейшего развода. Пользуюсь с удовольствием уже 6 месяцев.
Валентина, г. Смоленск
Из-за этой проклятой кухни приходилось маникюр каждые три дня переделывать. Я и так ненавижу в салоне красоты часами торчать и кучу денег выкидывать, а тут еще эта посуда. Выручила посудомоечная машина. Она небольшая, шириной всего 45 см, но она способна вместить в себя много всяких предметов. Сейчас я приспособилась мыть в ней не только посуду, но и стеклянные сувениры, а также плафоны люстр, получается отлично. Если у вас еще нет посудомойки, обязательно обзаведитесь, это же ведь просто другой уровень бытия!
Оксана, г. Санкт-Петербург
Очень хорошая машинка, хотя марка у нее очень странная. На вид она ничем не отличается от других встраиваемых посудомоек, но сделана как-то добротно и работает нормально. В ней есть все необходимые функции и программы. Я уже почти все изучила и поняла, что в выборе не ошиблась.
Галина, г. Краснодар
Все началось с того, что я, заглянув в гости к подруге, увидела у нее посудомоечную машину Эльпсам. Точнее, я сначала не поняла, что это за машина, а когда узнала о ней поподробнее, особенно цену, решилась сама на покупку. Техника действительно обалденная, все хорошо отмывает, но надо еще покупать хороший порошок или таблетки. Есть опыт использования посудомоечной машины Канди CDP 4609, но, к сожалению неудачный. Эльпсам намного лучше, надеюсь, она не сломается как Канди.
Юрий, г. Пенза
Уже год пользуюсь посудомойкой Эльпсам. Перемываю каждый день с десяток тарелок, несколько кружек, пригоршню столовых приборов и, конечно, кастрюли со сковородками. Когда гости приходят, то грязной посуды просто завались, техника никогда без работы не остается. Главное она все это выдерживает и не портится, а это не может не радовать.
Отрицательные
Елена, г. Тольятти
Машинка Эльпсам работает уже второй год, но моет очень плохо. Два раза сдавала ее в гарантийный ремонт, но мастера так и не смогли выяснить причину проблемы. Они признают, что машинка не выполняет свою прямую функцию, но почему так происходит, сказать не могут. Кругом некомпетентные специалисты.
Владимир, г. Омск
Она меня чуть током не убила. Хорошо я успел руку отдернуть вовремя. Мастера, которые устанавливали машинку, при монтаже и переноске повредили проводку. Когда по телефону позвонил в мастерскую, мне посоветовали место повреждения провода изолентой замотать. Тут мои нервы не выдержали, и я потребовал гарантийной замены сетевого провода. Все сделали в итоге, но без охоты. Подумываю накатать жалобу на находчивого мастера, который такие бесплатные советы раздает.
Руслан, г. Москва
Эта машинка привлекла меня низкой стоимостью и тем, что о ней было немало хороших отзывов на моем любимом форуме. Послушал людей и приобрел. Спустя месяц меня на форуме забанили из-за гневных речей в адрес тех, кто расхваливал эту машинку. Сейчас я успокоился, но людям больше не верю, все надо проверять самому, так надежнее.
Встраиваемая посудомоечная машина А ЭЛЬПСАМ, серый (45 см)
Размеры товараШирина: 44.6 см
Глубина: 55.5 см
Высота: 81.8 см
Длина провода: 150 см
Вес: 31.89 кг
Требуется самостоятельная сборка, или вы можете заказать эту услугу в нашем магазине
Сопроводительные документы. (Скачать файл)
Справочник по эксплуатации изделия. Вы можете загрузить только последние версии документов. Это означает, что между этой версией файла и печатной версией могут быть различия.
Основные черты
Производитель изделие ЭЛЬПСАМ, из категории Встраиваемая посудомоечная машина А подчеркивает следующие особенности:
- — Бесплатно 5 лет гарантии. Подробнее об условиях гарантии – в гарантийной брошюре.
- — Вы можете вымыть до 9 комплектов посуды одновременно, использовав всего 13 литров воды, что позволяет экономить воду и электроэнергию.
- — 5 программ; выбирайте программы в зависимости от блюда и ваших потребностей.
- — Верхняя корзина регулируется по высоте, обеспечивая место для тарелок и бокалов разного размера.
- — С функцией прекращения подачи воды при обнаружении протечки.
- — Съемные корзины для столовых приборов и подставки для бокалов позволяют регулировать внутреннее пространство посудомоечной машины.
При полном или частичном расхождении с заявленными особенностями, товар подлежит гарантийному возврату.
Гарантия на изделие действует ТОЛЬКО при надлежайшем использовании.
Разработка
Под надзором IKEA of Sweden
Размеры и вес упаковки
- Артикульный номер
- 903.000.18
- Кол-во упаковок
- 1
- Ширина
- 68 см
- Высота
- 49 см
- Длина
- 87 см
- Вес
- 33.00 кг
Экологическая информация
*Считаем необходимым обратить Ваше внимание, что не все изделия фирмы ИКЕА подлежит вторичной обработке в Беларуси.
Столешница, дверца, цоколь и ручки продаются отдельно.. Наличите дополнительных приспособлений уточнайте у оператора online магазина ИКЕА Беларусь.
Полезная информация
Класс энергопотребления: А – по шкале от А+++ (наиболее эффективный) до D (наименее эффективный).
Приблизительный ежегодный расход электроэнергии и воды (280 циклов): 250 кВт*ч/3640 литров.
Расход энергии: 0,878 кВт*ч/стандартный цикл, программа «эко».
Объем: столовый набор на 9 персон.
Класс сушки: А.
Уровень шума (IEC): 50 дБ (A).
Это встраиваемая модель.
Класс мойки: А.
Тестовая программа: Эко, 50°C.
Расход воды: 13 л/стандартный цикл, функция «эко».
Эко-мытье, 50°C.
Программа ополаскивания.
Нормальное мытье, 65°C.
Интенсивное мытье, 70°C.
Быстрый цикл мытье: 60°C, 30 мин.
2 складные полки для чашек и 2 складные подставки для тарелок прилагаются.
Напряжение: 220-240 В.
Столешница, дверца, цоколь и ручки продаются отдельно.
Электрический индикатор соли. Размягчается известь, содержащаяся в воде, обеспечивает качественное мытье и предотвращает появление известкового налета в посудомоечной машине.
Для дверцы 45 см.
Диффузионный барьер для защиты от влаги прилагается.
Указанные характеристики могут незначительно отличатся от заявленных. Максимально точную информацию вы можете получить у операторов интернет магазина IKEA Минск.
Руководство по уходу
При не соблюдении правил эксплуатации, гарантия на товар НЕ распространяется.
Техническая информация
Марка | ИКЕА |
Расход энергии в кВт*ч в год из расчета 280 циклов мойки с использованием наполнения холодной водой и энергосберегающих режимов. Фактический расход энергии будет зависеть от условий эксплуатации устройства. | 250кВт*ч/в год |
Потребляемая мощность в режиме Left-on | 0,5Ватт |
Потребляемая мощность в выключенном состоянии | 0,5Ватт |
Расход воды в литрах в год из расчета 280 циклов стандартной мойки. Фактический расход воды будет зависеть от условий эксплуатации устройства | 3640 |
Класс сушки по шкале от G (наименее эффективный) до A (наиболее эффективный) | А |
Уровень шума (дБ(А) на 1 пВт) | 50дБ |
Товар произведен на территории стран СНГ и ЕС под наблюдением компании Inter IKEA Systems B.V.
Модель ЭЛЬПСАМ Вы можете заказать в любом из приглянувшихся вариантов цветов. Приобрести ЭЛЬПСАМ из магазина IKEA, Вы можете без предоплаты. Нужно только заполнить Ваши контактные данные. Консультант обязательно перезвонит Вам.
Доставка товара из магазина ИКЕЯ в Минск, Гродно, Витебск, Могилев, Брест, Гомель и другим 152 населенным пунктам Беларуси в течении 7-10 дней. Оплата производится по факту получения покупки
Встраиваемая посудомоечная машина Эльпсам: инструкция и отзывы
Современные хозяйки с удовольствием используют на кухне различную бытовую технику. Одним из электронных кухонных приспособлений, является посудомоечная машина. Это компактный агрегат, позволяющий мыть тарелки, кастрюли, столовые приборы и прочую кухонную утварь. Благодаря использованию посудомоек, хозяйки экономят личное время и получают чистую посуду без приложения особых усилий.
Посудомоечная машина Эльпсам
Агрегат Эльпсам от ИКЕА
Если кухня небольшая, рекомендуется приобрести посудомоечную машину Эльпсам в Икеа. Это компактный, экономичный агрегат, отлично справляющийся со своими функциями. Отзывы хозяек отмечают, что машина, является незаменимой помощницей, как в повседневной жизни, так и в период уборки и мойки посуды после торжеств.
Агрегат Эльпсам от ИКЕА
В инструкции производитель отмечает следующие характеристики агрегата:
- Встраиваемая посудомоечная машина Эльпсам 45 см А+ относится к технике, экономно расходующей электроэнергию.
- Одновременно в бак машины можно загрузить 9 комплектов грязной посуды.
- В памяти устройства заложено 5 программ для мойки посуды с различной степенью загрязненности.
- При необходимости верхнюю корзину можно отрегулировать по высоте.
- В случае появления протечки воды агрегат автоматически отключается.
- Встраиваемая модель легко впишется в кухонный гарнитур.
- Расход воды за один рабочий цикл – 13 литров.
- Габариты устройства, следующие: ширина 45 см, высота – 82 см, глубина – 56 см. Вес машины – 32 кг.
Компактная посудомойка
Отзывы хозяек
Безусловно важно знать, что говорит производитель посудомоечной машины Эльпсам о своей технике. Но многие покупатели предпочитают знать, что думают пользователи о данном агрегате.
Посудомоечная машина
Отзывы хозяек, успешно использующих машину на своих кухнях, выделяют следующие преимущества агрегата:
- Наличие нескольких режимов температур.
- Практическая бесшумность устройства.
- Отличный результат.
- При необходимости в бак посудомойки Эльпсам, можно загрузить габаритные кухонные принадлежности.
- Наличие гарантийного обслуживания от производителя.
Параметры машины
Инструкция к посудомоечной машине Эльпсам акцентирует внимание на том, что в случае поломки насоса или если машина не включается, сервисные центры компании быстро окажут скорую техническую поддержку.
В среднем ремонт посудомойки занимает от двух до четырех недель. На протяжении этого времени специалисты проведут детальную диагностику устройства, выявят почему устройство не включается и имеются ли другие, серьезные поломки.
В заключении
Необходимо отметить, что пользователи довольны качеством работы посудомойки Эльпсам. Благодаря компактности и функциональности это устройство станет отличным приобретением для любой семьи.
Компания Икеа позаботилась о мельчайших деталях в строении агрегата. При необходимости в бак посудомойки можно загрузить не только тарелки и чашки, но и более габаритные предметы кухонной утвари.
HJÄLPSAM ЭЛЬПСАМ Встраиваемая посудомоечная машина А, серый 45 см
Обзор
Бесплатно 5 лет гарантии. Подробнее об условиях гарантии – в гарантийной брошюре. При мытье посуды в посудомоечной машине расход воды и электроэнергии в три раза меньше, чем при мытье вручную. И вы получаете сияющую чистотой посуду, не тратя времени и сил! После завершения программы дверца автоматически открывается и остается приоткрытой, обеспечивая быстрое высыхание посуды. Электрический индикатор соли. Соль смягчает жесткую воду для улучшения результата мойки и предотвращения образования накипи. С функцией прекращения подачи воды при обнаружении протечки. Верхняя корзина регулируется по высоте, обеспечивая место для тарелок и бокалов разного размера. Съемные корзины для столовых приборов и подставки для бокалов позволяют регулировать внутреннее пространство посудомоечной машины. Класс потребления энергии: А. Уровень шума (IEC): 50 дБ (A). Класс сушки: А. Класс мойки: А. Напряжение: 220-240 В. Объем: столовый набор на 9 персон. «Нормальное» мытье. Эко мытье. Интенcивное мытье. Быстрое мытье. Предварительное мытье. Полная информация о различных программах представлена в Руководстве пользователя. Для дверцы 45 см. Это встраиваемая модель. Диффузионный барьер для защиты от влаги прилагается. Шнур питания с вилкой прилагается. Столешница, дверца, цоколь и ручки продаются отдельно.
Характеристики
длина_провода | 150 см |
Высота | 49 см |
Глубина | 55.5 см |
Ширина | 68 см |
Длина | 87 см |
Дизайнер | IKEA of Sweden |
Длина провода | 150 см |
Вес | 33.00 кг |
Отзывы
‘), prdu = «/product/elpsam-vstraivaemaya-posudomoechnaya-mashina-a-seryy-45-sm/»; $(‘.reviews-tab’) .append(loading) .load(prdu + ‘reviews/ .reviews’, { random: «1» }, function(){ $(this).prepend(‘Посудомоечные машины Икеа: отзывы покупателей 2Стиралки.ру
Посудомоечная машина ИКЕА СКИНАНДЕ
Эльвира, 28 лет
Полноразмерная посудомоечная машина IKEA появилась в нашем доме после очередного похода в одноименный магазин, в котором мы появляемся достаточно часто. Она характеризуется неплохим функционалом и множеством рабочих программ, умеет отмывать даже самые сильные загрязнения, полностью встраивается в кухонный гарнитур. В наборе программ имеются как обычные режимы, так и интенсивные. Отдельно хочется отметить наличие автоматической программы, самостоятельно адаптирующейся под загрязнения и выбирающей температуру мойки. Чаще всего я мою посуду именно в этом режиме, полностью полагаясь на посудомоечную машину от ИКЕА. Также хочу отметить наличие полной защиты от аварийных протечек, один раз она уже выручила, перекрыв воду при неожиданном разрыве шланга – у нас на редкость сварливые соседи, которые устроили бы по поводу подтопления настоящий скандал.
Достоинства:- Все, что я загружаю в посудомоечную машину ИКЕА, выходит оттуда в чистом виде – отмываются тарелки, чашки, ложки, вилки и прочая кухонная утварь;
- На один цикл тратится всего 9,9 л воды, а также 0,932 кВт электроэнергии. В целом расходы на коммунальные услуги после покупки посудомойки немного уменьшились;
- Вместо целой горы химии, а это ополаскиватель, соль и моющее средство, в аппарате можно использовать таблетки формата «Все в одном» — они очень удобные;
- Посудомоечная машина ИКЕА СКИНАНДЕ идеально встраивается в кухонную мебель, ее совершенно не видно, если не знать о ее наличии.
- Без дополнительного ополаскивания на кухонной утвари остаются разводы от не до конца смывающейся химии. Впрочем, после того как я сменила таблетки, разводы все-таки исчезли;
- Не всю посуду можно мыть в посудомоечных машинах – не знаю, с чем это связано, но некоторые предметы приходится драить вручную.
Посудомоечная машина эльпсам инструкция
Бесплатно 5 лет гарантии. Подробнее об условиях гарантии – в гарантийной брошюре.
При мытье посуды в посудомоечной машине расход воды и электроэнергии в три раза меньше, чем при мытье вручную. И вы получаете сияющую чистотой посуду, не тратя времени и сил!
После завершения программы дверца автоматически открывается и остается приоткрытой, обеспечивая быстрое высыхание посуды.
Электрический индикатор соли. Соль смягчает жесткую воду для улучшения результата мойки и предотвращения образования накипи.
С функцией прекращения подачи воды при обнаружении протечки.
Верхняя корзина регулируется по высоте, обеспечивая место для тарелок и бокалов разного размера.
Съемные корзины для столовых приборов и подставки для бокалов позволяют регулировать внутреннее пространство посудомоечной машины.
Класс потребления энергии: А.
Уровень шума (IEC): 50 дБ (A).
Напряжение: 220-240 В.
Объем: столовый набор на 9 персон.
Полная информация о различных программах представлена в Руководстве пользователя.
Для дверцы 45 см.
Это встраиваемая модель.
Диффузионный барьер для защиты от влаги прилагается.
Шнур питания с вилкой прилагается.
Столешница, дверца, цоколь и ручки продаются отдельно.
Бесплатно 5 лет гарантии. Подробнее об условиях гарантии – в гарантийной брошюре.
При мытье посуды в посудомоечной машине расход воды и электроэнергии в три раза меньше, чем при мытье вручную. И вы получаете сияющую чистотой посуду, не тратя времени и сил!
После завершения программы дверца автоматически открывается и остается приоткрытой, обеспечивая быстрое высыхание посуды.
Электрический индикатор соли. Соль смягчает жесткую воду для улучшения результата мойки и предотвращения образования накипи.
С функцией прекращения подачи воды при обнаружении протечки.
Верхняя корзина регулируется по высоте, обеспечивая место для тарелок и бокалов разного размера.
Съемные корзины для столовых приборов и подставки для бокалов позволяют регулировать внутреннее пространство посудомоечной машины.
Класс потребления энергии: А.
Уровень шума (IEC): 50 дБ (A).
Напряжение: 220-240 В.
Объем: столовый набор на 9 персон.
Полная информация о различных программах представлена в Руководстве пользователя.
Для дверцы 45 см.
Это встраиваемая модель.
Диффузионный барьер для защиты от влаги прилагается.
Шнур питания с вилкой прилагается.
Столешница, дверца, цоколь и ручки продаются отдельно.
Современные хозяйки с удовольствием используют на кухне различную бытовую технику. Одним из электронных кухонных приспособлений, является посудомоечная машина. Это компактный агрегат, позволяющий мыть тарелки, кастрюли, столовые приборы и прочую кухонную утварь. Благодаря использованию посудомоек, хозяйки экономят личное время и получают чистую посуду без приложения особых усилий.
Посудомоечная машина Эльпсам
Агрегат Эльпсам от ИКЕА
Если кухня небольшая, рекомендуется приобрести посудомоечную машину Эльпсам в Икеа. Это компактный, экономичный агрегат, отлично справляющийся со своими функциями. Отзывы хозяек отмечают, что машина, является незаменимой помощницей, как в повседневной жизни, так и в период уборки и мойки посуды после торжеств.
Агрегат Эльпсам от ИКЕА
В инструкции производитель отмечает следующие характеристики агрегата:
- Встраиваемая посудомоечная машина Эльпсам 45 см А+ относится к технике, экономно расходующей электроэнергию.
- Одновременно в бак машины можно загрузить 9 комплектов грязной посуды.
- В памяти устройства заложено 5 программ для мойки посуды с различной степенью загрязненности.
- При необходимости верхнюю корзину можно отрегулировать по высоте.
- В случае появления протечки воды агрегат автоматически отключается.
- Встраиваемая модель легко впишется в кухонный гарнитур.
- Расход воды за один рабочий цикл – 13 литров.
- Габариты устройства, следующие: ширина 45 см, высота – 82 см, глубина – 56 см. Вес машины – 32 кг.
Отзывы хозяек
Безусловно важно знать, что говорит производитель посудомоечной машины Эльпсам о своей технике. Но многие покупатели предпочитают знать, что думают пользователи о данном агрегате.
Отзывы хозяек, успешно использующих машину на своих кухнях, выделяют следующие преимущества агрегата:
- Наличие нескольких режимов температур.
- Практическая бесшумность устройства.
- Отличный результат.
- При необходимости в бак посудомойки Эльпсам, можно загрузить габаритные кухонные принадлежности.
- Наличие гарантийного обслуживания от производителя.
Инструкция к посудомоечной машине Эльпсам акцентирует внимание на том, что в случае поломки насоса или если машина не включается, сервисные центры компании быстро окажут скорую техническую поддержку.
В среднем ремонт посудомойки занимает от двух до четырех недель. На протяжении этого времени специалисты проведут детальную диагностику устройства, выявят почему устройство не включается и имеются ли другие, серьезные поломки.
В заключении
Необходимо отметить, что пользователи довольны качеством работы посудомойки Эльпсам. Благодаря компактности и функциональности это устройство станет отличным приобретением для любой семьи.
Компания Икеа позаботилась о мельчайших деталях в строении агрегата. При необходимости в бак посудомойки можно загрузить не только тарелки и чашки, но и более габаритные предметы кухонной утвари.
Черновики рабочей группы по проверке ELPS
Отзывы будут приниматься в ответ на проекты рабочих групп по Стандартам английского языка (ELPS) на протяжении всего процесса проверки и пересмотра. Комментарии к проектам помогут обосновать рекомендации будущих рабочих групп.
При предоставлении конкретных комментариев и рекомендаций для рабочей группы, пожалуйста, укажите рабочую группу в строке темы электронного письма. Например, в строке темы укажите «Отзыв рабочей группы C по проверке ELPS.»Пожалуйста, отправляйте комментарии в TEA по адресу [email protected].
Рабочая группа D
Рабочая группа D разработала рекомендации по пересмотру основных знаний и навыков в области овладения вторым языком во всех учебных заведениях (ожидания студентов или SE) для каждой из четырех областей. Рабочая группа согласилась с рекомендациями Рабочей группы A и интегрировала SE из раздела текущих стратегий обучения в область, в которую SE лучше всего вписывается.
Рекомендации рабочей группы D (PDF, 106 КБ)
Рабочая группа C
TEA распространила опрос для сбора отзывов о двух моделях дескрипторов уровня квалификации (PLD), предложенных Рабочей группой B.Следующая группа, Рабочая группа C, рассмотрела предложенные модели и результаты опроса, а также
- рекомендовал расширить текущие PLD с четырех до пяти уровней;
- внесла предложения по новым ярлыкам для каждого из пяти уровней; и
- определила ключевые концепции для каждой из четырех областей языка (аудирование, устная речь, чтение и письмо).
Для групп оценок рабочая группа C рекомендовала сохранить текущую организацию для PLD:
- один комплект PLD для доменов аудирования и разговорной речи (детский сад – 12 класс) и
- две группы оценок по чтению и письму (детский сад – 1 класс и 2–12 классы).
Документ с рекомендациями рабочей группы C описывает пять уровней квалификации и включает образцы PLD для одной концепции в каждой области. Для доменов чтения и письма, для которых предлагается иметь две группы оценок, документ включает образцы PLDS для каждой группы оценок. Щелкните элемент, чтобы загрузить PDF-файл.
Рекомендации рабочей группы C (PDF, 842 КБ)
Рабочая группа B
Рабочая группа B рассмотрела текущие исследования, связанные с моделями дескрипторов усвоения языка и уровня владения языком из других государств / организаций.Рабочая группа предложила два варианта увеличения количества уровней для PLD, но не достигла консенсуса по окончательной модели. Рабочая группа предложила два варианта увеличения количества уровней для PLD, но не достигла консенсуса по окончательной модели. Щелкните элемент, чтобы загрузить PDF-файл.
Модели PLD, рабочая группа B (PDF, 1409 КБ)
Рабочая группа А
Рабочая группа A завершила обзор проблем и рекомендаций для будущих рабочих групп на основе результатов опроса по Стандартам владения английским языком (ELPS).Черновик Рабочей группы А представлен ниже. Щелкните элемент ниже, чтобы загрузить PDF-файл.
Рабочая группа A Краткое изложение проблем и рекомендаций (PDF, 107 КБ)
Обзор стандартов владения английским языком
Государственный совет по образованию (SBOE) уполномочен пересматривать и принимать Стандарты уровня владения английским языком (ELPS). Члены SBOE назначают людей для работы в рабочих группах по обзору. На этой странице представлена информация об обзоре и пересмотре ELPS за 2019 год.
Рабочие группы проверки ELPS
Процесс проверки и пересмотра SBOE требует создания нескольких отдельных рабочих групп. Кандидатуры для работы в рабочих группах ELPS будут производиться на протяжении всего процесса обзора. В следующий список включены лица, назначенные SBOE для работы в рабочих группах проверки ELPS.
Рабочие группы по обзору SBOE ELPS
Проект рабочей группы по проверке ELPS
Заявление рабочей группы по рассмотрению ELPS
Процесс проверки и пересмотра ELPS SBOE требует создания нескольких отдельных рабочих групп.Кандидатуры для работы в рабочих группах ELPS будут производиться на протяжении всего процесса обзора ELPS.
Следующая ссылка приведет вас к общему приложению, которое TEA использует для формирования нескольких комитетов. В конце заявки вам будет предложено выбрать «Настройки комитета». После выбора «Комитет SBOE — Комитет по проверке уровня владения английским языком» вам будут заданы вопросы о ваших предпочтениях, связанных с проверкой ELPS.
Заявление в комитет по надзору за педагогами (внешний источник)
Рабочие группы SBOEЗаявки будут представлены членам SBOE для рассмотрения в процессе пересмотра.На основании этого обзора члены SBOE выдвигают кандидатуры в рабочие группы. TEA будет уведомлять кандидатов об их кандидатурах на каждом этапе процесса рассмотрения и пересмотра
- Отобранным лицам будет предложено работать в одной или нескольких рабочих группах.
- Ожидается, что члены рабочей группы пройдут онлайн-ознакомительную сессию до встречи своей рабочей группы. Членов рабочей группы могут попросить провести первоначальный обзор стандартов перед их встречей.
- Рабочие группы соберутся в Остине как минимум на одну личную встречу.Время и даты встреч различных рабочих групп будут сообщены назначенным SBOE лицам для каждой встречи рабочей группы. Дополнительные встречи, проводимые вебинаром, также могут быть запланированы по мере необходимости.
- Члены рабочей группы могут попросить предоставить свидетельские показания на собраниях SBOE.
- Членам рабочей группы будут возмещены расходы на поездки, питание и проживание на собраниях, проводимых в Остине, в соответствии с правилами штата.
- Вопросы, связанные с заявкой на рассмотрение и пересмотр ELPS, можно направлять по адресу teks @ tea.texas.gov.
стандартов, влияющих на изучающих английский язык
В этой статье, написанной для Colorín Colorado, доктор Дайан Штер Феннер и Джон Сегота обсуждают способы, с помощью которых знание языка и стандарты преподавания могут помочь в формировании обучения изучающих английский язык.
Они также обсуждают взаимосвязь между этими различными наборами стандартов и их связь с реализацией Общих основных государственных стандартов.
Почему стандарты имеют значение
В рамках учебной программы, основанной на стандартах, все учащиеся, особенно изучающие английский язык (ELL), сталкиваются с высокими академическими и познавательными требованиями по предметным областям и уровням обучения. Чтобы полноценно и успешно участвовать в школе, ELL должны одновременно приобретать уровень владения английским языком (ELP) и успевать в учебе по всем предметным областям. Фактически, для успешной учебы в школе необходимы два типа владения языком: социальная и межкультурная компетентность в использовании английского языка в классе и академический язык, необходимый для доступа к таким предметным областям, как искусство английского языка, математика, естественные науки и общественные науки.
Стандартыпредоставляют инструмент для определения языка, а также контента, которого должны достичь ELL. Для того, чтобы ученики ELL преуспели в учебе в школах США, необходимы как стандарты ELP, так и профессиональные стандарты преподавания для учителей английского как второго языка (ESL), чтобы обеспечить успеваемость для ELL.
Стандарты ELP
Стандарты владения английским языком служат отправной точкой для определения языка, который ELL должны развивать для успешного доступа и согласования контента в классе и за его пределами.Стандарты ELP не являются самостоятельными, но обеспечивают мост к стандартам области содержания, ожидаемым от всех учащихся в классах США. Несмотря на то, что стандарты академической области содержания требуют от всех учащихся высоких достижений в обучении по содержанию, они не предоставляют педагогам стратегии, необходимые для оказания помощи изучающим английский язык, поскольку они предполагают, что учащиеся владеют английским языком и могут использовать его для взаимодействия с содержанием. Таким образом, стандарты ELP используются вместе со стандартами области содержания, чтобы служить ориентирами для преподавателей, помогая изучающим английский язык развить академические знания английского языка, необходимые для достижения высоких уровней успеваемости, установленных для всех учащихся.
Первые национальные стандарты ELP в США были опубликованы Международной ассоциацией TESOL в 1997 году. Названные ESL Standards for Pre-K-12 Student , эти стандарты были первыми, которые продвигали видение эффективного образования для растущего населения английского языка. изучающие язык в США С принятием Закона No Child Left Behind от 2001 г. (NCLB) федеральное правительство признало необходимость в языковых стандартах, чтобы помочь изучающим английский язык в развитии уровня владения английским языком, и, таким образом, впервые потребовало, чтобы каждый штат разрабатывает стандарты ELP для изучающих английский язык.В результате каждый штат США — самостоятельно или в рамках различных государственных консорциумов — разработал стандарты ELP для использования в своих школьных системах. Стандарты, разработанные консорциумом World Class Instructional Design and Assessment (WIDA) Consortia, в настоящее время используются в 27 штатах и были адаптированы и дополнены Международной ассоциацией TESOL в ходе пересмотра ее собственных стандартов в 2006 году.
Профессиональные стандарты обучения для ESL
Как и в случае с движением за стандарты в целом, 1990-е и 2000-е годы были отмечены большим разнообразием в области английского как второго языка (ESL) и подготовки учителей к преподаванию ESL.В течение этого периода количество ELL на уровне P-12 в школе резко увеличивалось, особенно на восточном и западном побережьях. Калифорния, Нью-Йорк и Флорида, а также Техас и другие штаты на юго-востоке испытали экспоненциальный рост количества обслуживаемых ими ELL. Education Week (2011) сообщает, что с 1997-1998 учебного года по 2008-2009 учебный год количество ELL, зачисленных в государственные школы, увеличилось с 3,5 миллиона до 5,3 миллиона, или на 51%.
Когда Международная ассоциация TESOL стала членом Национального совета по аккредитации педагогического образования (NCATE) в 1999 году, это произошло потому, что ассоциация почувствовала, что находится в лучшем положении, чтобы помочь определить область для учителей, которые будут преподавать эти знания. Студенческий английский. Ассоциация приступила к разработке стандартов национального признания программ подготовки учителей английского языка как иностранного на уровне P-12, которые впервые были введены в действие в 2001 году. Эти стандарты, которые были пересмотрены в 2009 году, представляют собой то, что должны знать кандидаты предпрофессионального обучения, получившие первоначальную лицензию на знание английского языка и уметь делать, чтобы эффективно обучать EL.Более 200 высших учебных заведений использовали стандарты профессионального обучения TESOL P-12 в качестве основы для своих программ ESL для целей национального признания NCATE.
Национальный совет по стандартам профессионального обучения (NBPTS) впервые разработал свои стандарты для «опытных» учителей английского языка как нового языка (ENL) в конце 1990-х, а затем пересмотрел их в 2010 году. В настоящее время существует более 1300 национальных советов. Сертифицированные учителя английского как нового языка, использующие стандарты NBPTS ENL в качестве основы.Пересмотр обоих наборов стандартов отражает недавние изменения в образовательной среде для ELL и их учителей, такие как ожидания подотчетности и требования к оценке для ELL, упор на изучение академического языка, расширение ролей учителей ESL, развитие технологий и их применение в образовании, исследованиях. — понимание природы языка и языкового обучения, роли языка и культуры в обучении, а также роли защиты интересов в обучении ELL.
И Международная ассоциация TESOL, и NBPTS пересмотрели свои профессиональные стандарты для учителей английского языка как иностранного в течение того же периода времени, и их стандарты могут отражать текущее состояние области обучения английскому языку.Хотя форматы и цели стандартов TESOL и NBPTS различаются (см. Таблицу 1), они имеют сходство (Harper & Staehr Fenner, 2010). Оба являются профессиональными стандартами для учителей ESL, ориентированы на квалификацию учителей в школах США и представляют собой высококачественное преподавание ELL. Они также включают процесс проверки, основанный на результатах, который использует основанные на стандартах доказательства и документацию о влиянии на обучение учащихся.
Таблица 1. Профессиональные стандарты обучения TESOL и NBPTS
Профессиональные стандарты обучения TESOL P-12 | NBPTS Английский язык как новые языковые стандарты |
---|---|
Разработано для программ обучения учителей ESL | Разработано для индивидуальных преподавателей ESL |
Обращение к компетентности учителя на начальном уровне лицензирования / сертификации ESL | Обращение к компетентности учителя на достигнутом уровне после не менее 3 лет опыта в классе |
Обеспечение национального признания программ подготовки учителей ESL | Присуждение индивидуальной сертификации Учителя ESL |
26 штатов требуют участия; другие программы подготовки учителей ESL добровольно проходят процесс | Добровольное участие отдельных преподавателей ESL |
Что наиболее важно в общих чертах между стандартами TESOL и NBPTS, так это то, что они оба признают уникальную академическую дисциплину, которая является отдельной от других области контента, тем не менее, служат для их дополнения, и это становится все более важным для U.С. Система образования.
Общие основные государственные стандарты
В дополнение к разработкам в области, описанным ранее, введение общих основных государственных стандартов (CCSS) также оказывает заметное влияние на образование в области ESL. Когда они были впервые представлены в 2010 году, существовало много неопределенностей относительно того, как эти стандарты будут реализованы и оценены для ELL. Хотя CCSS действительно включал некоторую базовую информацию о реализации с ELL, в этой области еще предстоит провести много исследований.Несколько известных организаций и исследователей начали работу над этим вопросом, признавая, что внедрение CCSS для ELL важно для всех учителей, поскольку с ELL работает все большее количество преподавателей в разных областях содержания.
Рассматривая вопрос ELLs и CCSS, в настоящее время ведутся следующие мероприятия:
- WIDA находится на завершающей стадии обновления своих стандартов ELP, которые будут называться стандартами разработки английского языка (ELD), чтобы проиллюстрировать согласование с CCSS.
- Международная ассоциация TESOL также разрабатывает дополнительную информацию для своих стандартов, которая показывает связь с CCSS.
- В других штатах, помимо тех, которые являются членами WIDA, также ведутся разговоры о пересмотре своих стандартов ELP для приведения их в соответствие с CCSS, создании новых оценок ELP и обеспечении специального профессионального развития учителей в отношении влияния CCSS на ELL.
Как эти стандарты работают вместе
Хотя важно, чтобы все учителя получали профессиональное развитие и информацию о передовых методах работы с ELL, профессиональное развитие является просто исходным уровнем и само по себе недостаточным.Так же, как стандарты ELP не работают сами по себе, то же самое верно и для стандартов академического контента, когда речь идет о ELL. Точно так же опыт преподавателей ESL и преподавателей контента необходим, чтобы помочь ELL достичь успеха, поэтому очень важно иметь профессиональные стандарты обучения для преподавателей ESL, такие как стандарты TESOL и NBPTS.
Чтобы обеспечить эффективное профессиональное развитие тех, кто преподает ELL, преподаватели должны сначала понимать систематическую роль области содержания и учителей ESL в обучении ELL.В рамках этой структуры каждый из трех компонентов (учителя, стандарты и оценивание) постоянно взаимодействует и влияет друг на друга как части неразрывной системы. Оптимальная система триангулирует эти элементы и развивает их одинаково, чтобы ELL могли изучать контент и язык одновременно. Одним компонентом нельзя пренебрегать, иначе два других не будут процветать. На рисунке 1 представлен многогранный подход к обучению ELL, который триангулирует взаимосвязь между стандартами контента, стандартами ELP, оценками контента и оценками ELP для поддержки общих академических достижений ELL.
Рисунок 1
Вопросы политики / необходимые области исследований
Однако необходимо провести гораздо больше исследований, чтобы эффективно внедрить CCSS для ELL и определить роль ELP и стандартов преподавания в будущих разговорах о подготовке и оценке учителей . Ниже мы формулируем потенциальные потребности в исследованиях как вопросы политики.
- Требования к сертификации учителей ESL сильно различаются от штата к штату, напоминая лоскутное одеяло.При таких огромных различиях между этими полномочиями, которые предлагает каждый штат, каковы конкретные требования к учетным данным между штатами?
- Какое влияние оказывает подготовка учителей ELL на успеваемость ELL?
- Как стандарты профессионального обучения TESOL P-12, а также стандарты ENL Национального совета по профессиональным стандартам преподавания могут добавить к разговору о том, как удовлетворить потребности ELL, когда они работают в рамках CCSS?
- Для того, чтобы действительно дать рекомендации о том, как лучше всего использовать опыт преподавателей ESL для реализации CCSS, нам нужно гораздо больше информации об их текущих ролях.Какова роль учителя ESL в различных контекстах США?
- Поскольку количество ELL в школах США будет только расти, вопросы ELL и преподаватели ESL должны быть центральными в обсуждениях, которые в настоящее время ведутся относительно внедрения CCSS, а не надстройкой или второстепенным вопросом. Такой уровень сотрудничества поможет убедиться, что ELL учитываются на этом новаторском этапе в системе образования США.
Об авторах
Dr.Дайан Штер Феннер
Трёхъязычный преподаватель и исследователь с двадцатилетним опытом обучения, оценки и поддержки изучающих английский язык (EL), доктор Дайан Штер Феннер является президентом DSF Consulting. Ее интересы заключаются в достижениях учащихся EL, в том числе в EL с ограниченными возможностями, а также в улучшении педагогического образования и профессионального развития тех, кто преподает EL в классах K-12. Доктор Штер Феннер получила степень доктора философии. Магистр многоязычного / поликультурного образования Университета Джорджа Мейсона с упором на грамотность.
В дополнение к своей работе над политикой и практическими вопросами на национальном, государственном и местном уровнях, доктор Штер Феннер имеет обширный педагогический опыт в K-12, включая десять лет преподавания и оценки EL в государственных школах округа Фэрфакс (Вирджиния). ), а также опыт преподавания английского языка как иностранного в рамках стипендии Фулбрайта. Она была членом комитета по недавнему пересмотру Национальным советом стандартов профессионального обучения своих стандартов «Английский как новый язык» и членом комитета по пересмотру стандартов работы учителей ESOL во Флориде.
Доктор Штер Феннер также поддержала Международную ассоциацию TESOL в качестве координатора программы Национального совета по аккредитации педагогического образования (NCATE), и она является ведущим автором книги, которая будет опубликована TESOL в марте 2012 года, в которой применяется профессиональная программа TESOL. стандарты для разработки программ обучения учителей ESL, аккредитации NCATE и повышения квалификации в округах и штатах. Она также является автором книги, посвященной обучению английских школьников, которая будет опубликована Corwin Press в начале 2013 года.Вы можете узнать больше о работе доктора Штер Феннер на ее веб-сайте DSF Consulting, LLC.
Джон Сегота
Джон Сегота работает в TESOL с 1996 года. В обязанности г-на Сеготы в TESOL входят отношения с правительством, анализ политики, коммуникация со СМИ и управление информационно-пропагандистской деятельностью TESOL. Он тесно сотрудничает с исполнительным директором и Советом директоров TESOL по вопросам управления вопросами и элементами стратегического планирования, а также помогал в разработке нескольких проектов по стандартизации.В состав текущих обязанностей г-на Сеготы также входит обеспечение связи TESOL с такими группами, как Национальная коалиция за грамотность, Коалиция латиноамериканского образования и Объединенный национальный комитет по языкам, а также взаимодействие с персоналом Комитета по стандартам TESOL, Global Комитет по профессиональным вопросам и Комитет по вопросам занятости.
Г-н Сегота входит в совет директоров Национальной коалиции за грамотность и входит в состав Консультативного совета USA Learns. Г-н Сегота имеет степень бакалавра политических наук со специализацией в области международных исследований Колледжа Святого Креста в Вустере, штат Массачусетс, а также диплом об окончании факультета управления проектами Высшей школы менеджмента Келлера.
Благодарности
Наш раздел политики стал возможным благодаря щедрому гранту от Carnegie Corporation. Авторы несут исключительную ответственность за высказанные заявления и мнения.
ELPS сталкивается с неуверенным падением из-за сокращения финансирования и вопросов дистанционного обучения
На своем заседании на этой неделе Совет по образованию государственных школ Ист-Лансинга обсудил растущую неопределенность на 2020-2021 учебный год. Эксперты ожидают резкого сокращения государственного финансирования школ в следующем году, и остаются вопросы о том, придется ли школам ELPS продолжать дистанционное обучение всех или некоторых учеников K-12 осенью.
Этот учебный год закончится хныканьем, а не треском для выпускников. Начало и выпускной бал не пройдут по расписанию. Теперь администраторы изучают данные опроса, чтобы рассмотреть другие формы для награждения выпускников. Решения зависят от будущих директив общественного здравоохранения.
Ежегодная сводка новостей о детском саду, которая обычно помогает спрогнозировать численность поступающих в детский сад, также была отменена. Родителям поступающих в детский сад рекомендуется использовать онлайн-портал округа или связываться по телефону с ближайшей начальной школой своей семьи для записи в школу.
Сокращение государственного финансирования может быть самым сильным из когда-либо существовавших
На виртуальном заседании в понедельник вечером финансовый директор ELPS Ричард Пью представил школьный бюджет на предстоящий год, вновь выразив обеспокоенность, которую он адресовал Финансовому комитету Совета в конце прошлого месяца.
Финансовый директор ELPS Ричард Пью на виртуальной встрече в понедельник.В преддверии заседания в понедельник Пью рекомендовал Правлению отложить запланированное 8 июня принятие бюджета на 2020-21 годы до 22 июня.Правление согласилось с этим.
Большая часть финансирования ELPS зависит от государственного финансирования. В настоящее время школы получают от штата примерно 8000 долларов на учащегося. 6 февраля, до того, как стало известно, что пандемия действительно поразила США, губернатор Гретхен Уитмер предложила школьный бюджет, который предусматривал бы дополнительные 150 долларов на учащегося в государственных школах Мичигана.
В первоначальном бюджете, который планировал Пью перед пандемией, доход ELPS должен был увеличиться на 374 000 долларов, несмотря на прекращение некоторых грантов и единовременных источников дохода.
Теперь ответ на пандемию потрясает государственный бюджет. Заказы на дому означают, что люди тратят меньше денег, что приводит к резкому падению налоговых поступлений. Увольнения означают падение налогов на фонд заработной платы и массовые выплаты пособий по безработице.
Пью сообщил Правлению, что ходят слухи, что в штате Мичиган может возникнуть дефицит от 1 до 3 миллиардов долларов в этом финансовом году и еще от 1 до 4 миллиардов долларов в следующем.
Чтобы справиться с неопределенностью, Пью разработал три возможных сценария бюджета на предстоящий учебный год, предупредив, что разработка бюджета более чем когда-либо находится в стадии разработки.
Для сценария 1 Пью спрогнозировал сокращение финансирования на 300 долларов на одного студента. В сценарии 2 прогнозируется снижение на 500 долларов на студента, а в сценарии 3 — на 700 долларов на студента. В каждом бюджете Пью также планировал, что ELPS не получит ранее ожидаемого финансирования для студентов из группы риска, возмещения расходов на специальное образование или доходов от процентов.
Что касается расходов, Пью планировал покрыть все контрактные соглашения, отметив при этом, что одна группа еще не достигла контрактного соглашения.
Каждый сценарий приводит к дефициту в размере от 1,4 миллиона долларов до почти 2,9 миллиона долларов. Бюджет перед пандемией на 6 февраля работал бы с дефицитом всего в 571 000 долларов.
ELPS имеет здоровый остаток средств в размере около 6,6 миллиона долларов и пережил хороший финансовый год в 2019-2020 учебном году. Но наступающий учебный год изменит эту радужную картину.
И реальность может быть намного хуже, чем даже сценарий 3. На этой неделе журнал Bridge сообщил , что школы могут столкнуться с сокращением финансирования на 2 000 долларов на учащегося с сокращениями на 20-25 процентов.
Суперинтендант ELPS Дори Лейко на виртуальной встрече в понедельник.На встрече в понедельник суперинтендант Дори Лейко заявила, что ситуация беспрецедентная. В последнее время наибольшее сокращение финансирования на одного студента составляло 470 долларов на студента.
В то время как Пью планировал выполнить обещания по контрактам, он сообщил Правлению, что все варианты все еще рассматриваются. Лейко отметила, что они с Пью недавно посетили многочисленные встречи по вопросам финансов, в том числе с представителями профсоюзов. Она объяснила, как оценивается ситуация.
«У нас есть длинный список возможностей», — сказала она Правлению в понедельник. «Некоторые вещи мы не хотим сокращать», — сказала она, но сокращения придется делать. По ее словам, администрация «старается оказывать наименьшее влияние на персонал и их моральный дух».
После презентации Пью Правление проголосовало за покупку iPad, ноутбуков и настольных компьютеров на сумму 196 000 долларов. Попечитель Кейт Пауэр попросила Пью пояснить, что они выплачивались из фонда технологических облигаций и фонда погашения, денег, которые нельзя было использовать для общих целей.
Совет также рекомендовал утвердить проект бюджета школьного округа Ingham Intermediate.
Осенние занятия — где и что?
В настоящее время студенты ELPS проходят третью неделю обучения по программе экстренного дистанционного обучения. В пятницу школы разослали семьям опрос, который будет использован для корректировки текущей программы и принятия решений на осень, если это необходимо.
Лейко предупредил Правление, что Департамент образования штата Мичиган еще не предоставил каких-либо указаний относительно осеннего семестра.
Секретарь правления ELPS Крис Мартин на виртуальном собрании в понедельник.В ответ секретарь Правления Крис Мартин и президент Эрин Грэм призвали начать планирование прямо сейчас, учитывая возможность дистанционного или гибридного обучения осенью. Мартин резюмировал подход так: «Мы можем надеяться на лучшее, но все же готовиться к худшему».
Мартин и Грэм упомянули обеспокоенность сообщества по поводу дистанционного обучения. Родители говорят, что они обеспокоены тем, что маленькие дети учатся читать, а старшеклассники планируют будущее.
Грэм сказала, что считает, что голоса сообщества имеют решающее значение для перспективного планирования, и приветствовала использование опросов в качестве отправной точки для изучения того, как улучшить дистанционное обучение, особенно в поддержке учителей, «чтобы предоставить высококачественные, строгие и справедливые возможности обучения, к которым мы стремимся. . »
Мартин сообщил, что он начал просеивать появляющиеся исследования дистанционного обучения во время пандемии, уделяя особое внимание обучению в малых группах и дифференцированным урокам, которые помогают учителям охватить учащихся разного уровня.
Грэм повторила свои опасения, высказанные на заседании академического и технологического комитета по поводу политики округа в отношении отсутствия оценок в чрезвычайных ситуациях. Она рекомендовала использовать лето для планирования дистанционного обучения, которое позволит выставлять буквенные оценки.
Председатель правления ELPS Эрин Грэм на виртуальном заседании в понедельник.Грэм повторил, что ELPS является исключением при выставлении оценок на зачетной / неполной основе, и опасается, что продолжение этой политики нанесет ущерб учащимся, особенно старшеклассникам.
Комитет Правления по политике собирается встретиться в эту пятницу в 15:00, и тогда могут возникнуть некоторые из этих вопросов. (Найдите информацию о том, как слушать и участвовать здесь, и обратите внимание, что вы должны лично отправить электронное письмо суперинтенданту Дори Лейко, чтобы получить пароли для входа в систему.) На заседании в понедельник Правление также единогласно приняло резолюцию, призывающую Комиссию Капитолия штата Мичиган запретить огнестрельное оружие в здании Лансинга и получить обновленную информацию о реконструкции шести начальных школ округа.
Поправка, 14:00: в этой статье изначально говорилось, что студенты находятся на четвертой неделе своего плана дистанционного обучения в чрезвычайных ситуациях, что является формулировкой, которую Лейко использовал на встрече. Однако первая неделя плана не включала обучение, поэтому мы изменили его формулировку, чтобы уточнить, что студенты находятся на третьей неделе обучения.
Быстрое сшивание эластиноподобных полипептидов гидроксиметилфосфинами в водном растворе
Abstract
Гелеобразование in situ материалов на основе инъекционных полипептидов является привлекательным для минимально инвазивной имплантации in vivo биоматериалов и каркасов тканевой инженерии.Мы демонстрируем, что химически сшитые гидрогели эластиноподобного полипептида (ELP) могут быть быстро образованы в водном растворе путем взаимодействия лизинсодержащих ELP с фосфорорганическим сшивающим агентом, β- [трис (гидроксиметил) фосфино] пропионовой кислотой (THPP) в физиологических условиях. Механические свойства сшитых гидрогелей ELP в значительной степени модулировались молярной концентрацией остатков лизина в ELP и pH, при котором проводилась реакция сшивания. Фибробласты, встроенные в гидрогели ELP, выжили в процессе сшивания и были жизнеспособными после культивирования in vitro в течение 3 дней.Количественное определение ДНК гидрогелей ELP с инкапсулированными фибробластами показало, что не было значительной разницы в содержании ДНК между днем 0 и днем, когда гидрогели ELP формировались с эквимолярным соотношением остатков THPP и лизина в ELP. Эти результаты предполагают, что сшивание THPP может быть биосовместимой стратегией для образования in situ сшитых гидрогелей.
Введение
Биологически вдохновленные материалы на основе пептидов 1 , 2 представляют растущий интерес для применения в качестве биоматериалов 3 — 8 , потому что: (1) их последовательность может быть запрограммирована в гене уровень; (2) они могут быть легко синтезированы методами рекомбинантной ДНК в бактериальных системах экспрессии; (3) они дают монодисперсные полимеры с точно определенными молекулярными свойствами; (4) их можно обрабатывать для отображения ряда полезных физических и механических характеристик 9 , 10 ; (5) они обладают потенциалом хорошей биосовместимости и низкой цитотоксичности 11 ; и (6) они могут быть разработаны для разложения с контролируемой скоростью in vivo посредством широкого разнообразия протеолитических механизмов с образованием продуктов разложения аминокислот, которые могут легко выводиться из организма или резорбироваться. 11 — 13
We 14 — 18 и другие 11 , 19 — 21 особенно заинтересованы в специфическом классе эластичных полипептидов с повторяющимися типами -подобные полипептиды (ELP). ELP представляют собой искусственные полипептиды, которые происходят из повторяющегося пептидного мотива Val-Pro-Gly-Xaa-Gly в тропоэластине (где Xaa представляет собой любую аминокислоту, отличную от Pro). Для приложений, требующих больших количеств (∼ граммов в лабораторных условиях), таких как биоматериалы и каркасы тканевой инженерии, ELP имеют два преимущества по сравнению со многими другими повторяющимися полипептидами. 22 , 23 Во-первых, ELP могут быть стандартно экспрессированы при> 200 мг / л в культуре во встряхиваемых колбах 24 — 26 и при оптимизации до уровней 1,6 г / л. 27 Во-вторых, ELP являются полипептидами, реагирующими на стимул, поскольку они претерпевают фазовый переход, обратный температуре; ELP хорошо растворимы в водных растворах, но когда их температура поднимается выше критической температуры перехода (T t ), они десольватируются и становятся нерастворимыми в водном растворе в обратимом процессе.Такое поведение фазового перехода ELP полезно, поскольку оно позволяет быстро очищать граммовые количества ELP с помощью простого, нехроматографического процесса периодической очистки, цикла с обратным переходом (ITC). 24 — 29
ELP также являются многообещающими каркасными материалами для инженерии костно-мышечной и сердечно-сосудистой ткани, поскольку их пептидные последовательности являются нативными для гладких и скелетных мышц, связок и других мышечно-скелетных тканей, и они обладают низкой цитотоксичностью и не обладают антигенными свойствами. ответ in vivo . 11 , 19 Кроме того, ELP могут дать некоторые преимущества для применения в инженерии хрящевой ткани, поскольку мы показали, что термически индуцированная агрегированная, «коацерватная» фаза ELP позволяет инкапсулировать хондроциты и стволовые клетки, полученные из жировой ткани человека. одновременно способствуя хондрогенному фенотипу и синтезу хрящевого матрикса. 14 , 17 Хотя эти исследования показали перспективность ELP для инженерии хрящевой ткани, эти материалы демонстрируют узкий диапазон механических свойств, что может ограничивать их применимость в качестве каркасов для клеточной регенерации и дает обоснование для разработки стратегий сшивания.
В последние несколько лет были исследованы различные методы сшивания ELP 15 , 30 , 31 ; химические методы включают сшивание под действием излучения 32 — 34 , фотоинициирование 35 , химическое сшивание 15 , 30 , 31 , 36 — 903 и ферментативное сшивание тканевой трансглутаминазой 16 , в то время как образование физически сшитых сетей было также продемонстрировано для блок-сополимеров ELP 5 , 9 , 10 , 39 .Кроме того, поведение фазового перехода ELP также поддерживается в их сшитом состоянии, что обеспечивает вторичную переменную для настройки их механического поведения путем модуляции степени сольватации сшитого гидрогеля ELP. 15
Несмотря на разнообразие подходов к сшиванию, которые были предложены в литературе, многие из этих методов нельзя использовать для создания инъекционных каркасов ELP, в которых жидкие предшественники могут быть легко введены в место дефекта, а затем in situ образование конформного гидрогеля из-за цитотоксичности реагентов или побочных продуктов, необходимости в органических растворителях или неоптимальной кинетики реакций сшивания 16 .Исходя из этих соображений, цель данного исследования заключалась в разработке стратегии сшивания, которая позволяет вводить смесь растворимого ELP и клеток и сшивать in vivo с оптимальной кинетикой (время гелеобразования <5 мин), с минимальной цитотоксичностью для обеспечения гидрогель, механические свойства которого соответствуют свойствам хрящевой ткани. Вторичной целью этого исследования была оценка возможности изменения физических свойств сшитых гелей по плотности сшиваемых функциональных групп в ELP, а также рН реакции сшивания.
В этой статье мы представляем конденсацию типа Манниха гидроксиметилфосфинов (ГМФ) с первичными и вторичными аминами аминокислот в качестве нового метода сшивания биоматериалов на основе полипептидов, который удовлетворяет этим требованиям. 40 — 44 Эта реакция ранее использовалась для включения фосфинов в пептиды для координации с переходными металлами 45 — 49 , но, насколько нам известно, не использовалась для сшивания полипептидов .В этом исследовании мы демонстрируем, что химически сшитые гидрогели ELP могут быть быстро образованы в водном растворе путем реакции ELP, содержащих периодические остатки лизина (Lys или K: однобуквенный аминокислотный код) с β- [трис (гидроксиметил) фосфино] -пропионовой кислотой. кислота (THPP). Мы представляем данные, показывающие, что механические свойства гидрогелей ELP, поперечно сшитых THPP, могут модулироваться концентрацией остатков Lys в ELP и pH реакции сшивания. Наконец, мы показываем, что мышиные фибробласты могут быть инкапсулированы в гидрогели ELP в процессе биосовместимости и что они выживают после процедуры сшивания и культивирования in vitro в течение 3 дней.
Experimental
Обозначение ELP
Все ELP названы в следующей форме: ELP [X i Y j Z k — n ], где заглавные буквы в скобках представляют собой однобуквенные коды аминокислот гостевой остаток, соответствующие нижние индексы обозначают соотношение этого гостевого остатка в мономере, а n указывает количество пентапептидов в ELP. Например, ELP [KV 7 F-9] представляет собой ELP, который содержит 9 повторов пентапептида VPGXG, в котором один пентапептид содержит K в положении 4 -го , гостевой остаток (X), другой пентапептид имеет F в 4 -е положение и 7 пентапептидов имеют V в том же положении.
Синтез мономерного гена ELP и его олигомеризация
Стандартные протоколы молекулярной биологии были использованы для синтеза гена мономерного гена ELP и его олигомеризации путем рекурсивного направленного лигирования (RDL) для синтеза генов, кодирующих более длинные ELP. 25 Две плазмиды pUC19, отдельно содержащие ELP [KV 6 -7] и ELP [VF-2], были ранее клонированы и использованы для этого исследования. 15 показывает метод, с помощью которого были собраны мономеры для двух ELP: ген для ELP [KV 7 F-9] был сконструирован путем лигирования плазмидного гена для ELP [KV 6 -7] с плазмидный ген, кодирующий ELP [VF-2], тогда как ген для ELP [KV 2 F-4] был сконструирован путем лигирования плазмидного гена ELP [VF-2] с синтетической олигонуклеотидной вставкой, которая закодированный ELP [VK-2].Множественные раунды RDL были выполнены с этими мономерными генами для создания генов для ELP [KV 7 F-18, 36, 72, 144] и ELP [KV 2 F-16, 32, 64, 128], которые кодируют для ELP с молекулярной массой (MW) от 7,7 до 61,1 кДа.
Схема конструирования плазмид, кодирующих гены мономеров ELP [KV 7 F-9] и ELP [KV 2 F-4]. Плазмида, содержащая ELP [KV 6 -7], дважды переваривается с помощью Pflm I и Bgl I, а комплементарные одноцепочечные олигонуклеотиды термически отжигаются с образованием двухцепочечной олигонуклеотидной кассеты, кодирующей ELP [VK-2] с Pflm I, совместимой свесы.Плазмида ELP [VF-2] расщепляется Pflm I и затем ферментативно дефосфорилируется. Линеаризованные дефосфорилированные векторы ELP [VF-2] отдельно лигируют со вставкой ELP [KV 6 -7] и олигонуклеотидной кассетой ELP [VK-2].
Экспрессия гена и очистка ELP
Вектор экспрессии pET-25b (+) (Novagen Inc., Милуоки, Висконсин) был ранее модифицирован для введения уникального сайта рестрикции Sfi I для вставки гена ELP и кодонов, которые кодируют C-концевой Trp для спектрофотометрического обнаружения ELP. 15 , 25 ELP были экспрессированы вставкой генов ELP, рестриктированных Pflm I и Bgl I, в модифицированный вектор экспрессии pET-25b (+) (Novagen Inc., Милуоки, Висконсин), расщепленный Sfi I (Новая Англия) Biolabs, Beverly, MA), которые были дефосфорилированы с использованием CIP. Штамм E. Coli , клетки BLR (DE3) (Novagen Inc., Милуоки, Висконсин), трансформированные модифицированным вектором pET-25b (+), содержащим вставку ELP, выращивали в 1 л культур среды CircleGrow ™ с добавлением 100 г / мл ампициллина в течение 24 ч при 37 ° C и 200 об / мин (Qbiogen, Карлсбад, Калифорния).Экспрессированные ELP очищали циклическим обратным переходом (ITC), как описано ранее. 24 — 29
Физико-химическая характеристика ELP
Чистота ELP была охарактеризована с помощью SDS-PAGE (BioRad, Inc., Hercules, CA) и визуализирована медным пятном. Их MW определяли с помощью матричной лазерной десорбции / ионизационной масс-спектрометрии (MALDI-MS) на приборе PE Biosystems Voyager-DE, оснащенном азотным лазером, 337 нм.Образцы ELP растворяли в 50% водном растворе ацетонитрила, содержащем 0,1% трифторуксусной кислоты, и для MALDI-MS использовали матрицу синапиновой кислоты. Температура обратного фазового перехода (T t ) ELP была измерена путем нагревания 25 мкМ раствора ELP между 10 ° C и 90 ° C со скоростью нагрева 1 ° C / мин, и OD 350 был измеряется спектрофотометром в УФ-видимой области (Cary 300 Varian Instruments). T t ELP (0,625 мг / мл) в зависимости от pH измеряли путем растворения лиофилизированных ELP в различных 20 мМ фосфатных буферах при pH 7.5, 10,0 и 12,5. T t определяется как температура, при которой изменение оптической плотности по отношению к температуре ( d OD / d T) достигает своего максимума. Концентрацию ELP определяли с помощью коэффициента молярной экстинкции ELP при 280 нм (5690 M -1 см -1 ), рассчитанного из первичной аминокислотной последовательности ELP с использованием программы Protean (DNA Star).
Кинетика гелеобразования по колебательной реологии
Кинетику сшивания ELP с THPP (Пирс, Рокфорд, Иллинойс) измеряли с помощью колебательной реологии как функции времени.Их реологические свойства во время сшивания были охарактеризованы в режиме динамического сдвига при кручении с использованием конфигурации конус на пластине (ARES Rheometer, TA Instruments, угол конуса = 0,1 рад, диаметр пластины = 25 мм) при 35 ° C в течение 1 часа (частота 1 Гц и 0,01 деформации сдвига). Чтобы гарантировать гомогенное смешивание реагентов, 75 мкл 200 мг / мл THPP в 20 мМ фосфате с 700 мМ NaCl при pH 7,5 интенсивным пипетированием смешивали с 450 мкл 200 мг / мл ELP [KV 7 F -144] в 20 мМ фосфате при pH 7.5, чтобы получить 8-9-кратный молярный избыток реакционноспособного гидроксиметилфосфина (HMP) THPP по отношению к первичному амину ELP, а также конечную концентрацию NaCl 100 мМ. Нижнюю плиту испытательного устройства поддерживали при постоянной температуре 35 ° C. Значения модуля накопления (G ’) и потери (G”) были получены из данных крутящего момента.
Механические свойства сшитых гидрогелей ELP
ELP [KV 7 F-72] и ELP [KV 2 F-64] были сшиты в 20 мМ фосфате, 100 мМ NaCl при различных pH (pH 7.5 и 12.0) следующим образом. Раствор THPP смешивали энергичным пипетированием каждого раствора ELP в специальной тефлоновой форме (диаметр 8 мм и высота 2 мм) при 4 ° C, а затем смесь инкубировали при 37 ° C в течение 1 часа. Полностью сшитые гидрогели ELP погружали в дистиллированную деионизированную воду при 4 ° C на ночь для удаления солей, свободных фосфатов и непрореагировавшего THPP и хранили при 4 ° C в набухшем состоянии в 20 мМ фосфате при pH 7,5. Сшитые гидрогели ELP [KV 7 F-72] и ELP [KV 2 F-64] испытывали в 20 мМ фосфате при pH 7.5 для определения равновесного модуля сжатия (E), комплексного модуля сдвига (| G * |), равновесного модуля сдвига (μ) и угла потерь (δ). Использовали параллельные пластины из пористой нержавеющей стали (радиус пластины = 10 мм; пористые пластины из нержавеющей стали; пористость 50%; размер пор 40-60 мкм) с образцами и испытательными пластинами, погруженными в 20 мМ фосфат при pH 7,5 и выдерживаемых при комнатной температуре. Образцы уравновешивали под нагрузкой тары 5-10 граммов, и эталонную толщину регистрировали как расстояние между плитами в состоянии равновесия.Затем образцы сжимали до 5% деформации сжатия, ε, и позволяли расслабиться до достижения равновесия. Этот протокол повторяли с шагом 5% до достижения 15% деформации. Линейная регрессия расчетного нормального напряжения σ при равновесии по ε была выполнена для расчета равновесного модуля сжатия E. При 15% -ном сжатии испытание динамической развертки частоты было выполнено при крутильном сдвиге при максимальной деформации сдвига 0,01 (0,1-50 рад / сек). Теория линейной вязкоупругости использовалась для расчета величины комплексного модуля сдвига | G * | и угла потерь, представляющих жесткость и внутреннюю диссипацию энергии материала при динамической нагрузке, соответственно.Равновесный модуль сдвига (μ) также был определен из зависимости между измерениями деформации сдвига при кручении 0,05 и результирующим напряжением сдвига. У четырех гидрогелей ELP для каждого состава измеряли все механические свойства в 20 мМ фосфате при pH 7,5.
Характеристика свойств набухания
Коэффициент набухания по массе, Q w , определяемый как отношение массы набухшего геля, W s , к массе лиофилизированного геля, W d (Q w = W s / W d ) измеряли в 20 мМ фосфате при pH 7.5 как функция температуры, чтобы измерить изменения размеров между набухшим и сжатым состояниями термочувствительных гидрогелей ELP. Коэффициент набухания гидрогелей ELP [KV 7 F-72] и ELP [KV 2 F-64], сшитых при pH 7,5 и 12,0, измеряли с использованием четырех гидрогелевых конструкций ELP для каждого состава.
Морфология микроструктуры
Лиофилизированные гидрогели ELP были физически разрушены пинцетом, и их микроструктуры были визуализированы с помощью полевой эмиссионной сканирующей электронной микроскопии Philips FEI XL30 при ускоряющем напряжении 30 кВ.Четыре гидрогеля ELP каждого состава были проанализированы, чтобы исследовать морфологию как функцию плотности сшиваемого Lys в ELP.
Жизнеспособность клеток и количественное определение ДНК
Суспензию мышиных фибробластов NIH-3T3 смешивали с ELP [KV 7 F-144] и THPP при комнатной температуре в молярном соотношении HMP: Lys 1: 1 для достижения конечного результата. концентрация 200 мг / мл ELP и 10 × 10 6 клеток / мл в забуференном HEPES физиологическом растворе (25 мМ HEPES, 150 мМ NaCl). Раствор вводили в специальную форму с помощью шприца при комнатной температуре, а затем инкубировали в течение 1 ч при 37 ° C в инкубаторе с 5% CO 2 .Включенные в фибробласты сшитые пластины ELP толщиной 2 мм вырезали биопсийным перфоратором диаметром 5 мм (Miltex, York, PA) для получения множественных клеточных гидрогелей ELP, имеющих идентичные размеры. Каждый клеточный гидрогель ELP погружали в питательную среду в отдельные лунки 24-луночных планшетов и затем культивировали при 37 ° C в инкубаторе с 5% CO 2 в течение 3 дней. Анализ жизнеспособности клеток выполняли с использованием набора для анализа жизнеспособности / цитотоксичности Live / Dead® клеток (Molecular Probes, Юджин, Орегон). Четыре клеточных гидрогеля ELP удаляли в каждый момент времени из культуральной среды, помещали в 48-луночные планшеты и 3 раза промывали PBS для удаления активности сывороточной эстеразы.Каждую конструкцию инкубировали в окрашивающем растворе, который содержал 2 мкМ кальцеина и 2 мкМ гомодимера этидия-1 (EthD-1), в течение 30 мин. Раствор кальцеина / EthD-1 отбрасывали, и каждый гидрогель промывали 3 раза PBS. Выживание клеток в гидрогелях ELP визуализировали с помощью конфокальной микроскопии с флуоресцентным лазерным сканированием (Zeiss LSM 510, Carl Zeiss, Inc., Thornwood, NY).
Содержание ДНК инкапсулированных фибробластов в каждой конструкции гидрогеля ELP определяли с четырьмя или пятью различными конструкциями в каждый момент времени с использованием анализа дцДНК Quant-iT ™ Picogreen (Molecular Probes, Eugene, OR).Гидрогели ELP с инкапсулированными фибробластами переваривали в PBS, содержащем 125 мкг / мл папаина (Sigma, Сент-Луис, Миссури), 0,05% трипсина (Invitrogen, Carlsbad, CA), при 37 ° C в течение 1 дня с последующей последовательной инкубацией при 65 ° C. ° C в течение 1 дня, а затем центрифугировали при 13000 g в течение 10 минут. Реагент Пикогрин добавляли к аликвотам каждого расщепляющего раствора и контрольных образцов ДНК в 96-луночном планшете, а затем инкубировали в течение 5 мин. Общее содержание ДНК в расщепленном растворе измеряли с использованием планшет-ридера (Tecan GENios, Phenix Research Products, Candler, NC) с использованием возбуждения / излучения 480-485 нм / 520-530 нм.
Статистический анализ
Двухфакторный дисперсионный анализ (ANOVA) и апостериорные тесты Фишера в программном обеспечении Statview (SAS Institute, Кэри, Северная Каролина) были использованы для проверки влияния типа ELP и pH сшивки на различные механические свойства (E , | G * | и μ). Однофакторный дисперсионный анализ ANOVA использовали для проверки влияния времени культивирования на содержание ДНК в клетках. Статистическая значимость определялась при значении p <0,05.
Результаты и обсуждение
Дизайн и характеристика ELP
Две библиотеки ELP, ELP [KV 7 F-9, 18, 36, 72, 144] и ELP [KV 2 F-8, 16, 32 , 64, 128], были синтезированы из плазмидных генов E.coli. периодических остатков Lys (K) были включены в их первичную аминокислотную последовательность для обеспечения сайтов для химического сшивания. Различные концентрации Lys были выбраны для изучения влияния плотности сшивки на механические свойства сшитых гидрогелей. Включение остатков Lys повышает T t при физиологическом pH, что имеет два нежелательных последствия: во-первых, затрудняет очистку ELP с помощью ITC в разумном диапазоне температур, что требует использования высоких концентраций NaCl для запуска фазового перехода. ELP во время ITC.Во-вторых, поскольку реакция сшивания не продолжается до завершения, доля несшитых остатков Lys в гидрогелях ELP увеличивает диапазон температур, в котором происходит объемный фазовый переход. Phe, гидрофобный гостевой остаток, был включен в ELP в том же соотношении, что и остатки Lys в повторе ELP, чтобы уравновесить эффект остатков Lys, поскольку он снижает T t ELP.
Члены библиотек ELP [KV 7 F] и ELP [KV 2 F] были экспрессированы в E.coli и очищен ITC. 25 Гели SDS-PAGE, окрашенные медью, показывают, что ELP могут быть очищены до по крайней мере 95% гомогенности с помощью нескольких раундов ITC. 15 , 25 Все ELP мигрировали примерно на 20% больше, чем их расчетная молекулярная масса, основанная на модели миграции белковых стандартов, как ранее сообщалось для других ELP. 15 , 25 MALDI-MS, однако, подтвердил, что размер ELP был близок к тому, который предсказывался их аминокислотной последовательностью, поскольку разница в молекулярной массе между их рассчитанной и экспериментально измеренной MW составляла от 0 .01% и 0,5%.
Окрашенные медью гели SDS-PAGE (A) ELP [KV 7 F] и (B) ELP [KV 2 F]. Дорожка, отмеченная (M), содержит маркеры размера молекул (205, 116, 97, 84, 66, 55, 45, 36, 29, 24, 20, 14, 7 кДа сверху вниз). Количество пентапептидных повторов ELP указано над каждой полосой, а ожидаемая молекулярная масса ELP показана слева.
показывает, что T t серии ELP [KV 2 F] на 16-42 ° C выше, чем у ELP [KV 7 F] аналогичной молекулярной массы из-за большей доли остатков Lys. в семействе ELP [KV 2 F].Точно так же T t полипептидов серии ELP [KV 7 F] более чем на 20 ° C ниже, чем у полипептидов ELP [KV 6 ] аналогичной молекулярной массы из-за введения гидрофобного Phe. остатки. 50 , 51 Внутри каждой серии T t также обратно пропорционален MW ELP, как ранее было замечено для других ELP. 52 Эти результаты подчеркивают степень контроля, который можно осуществлять над T t ELP, просто контролируя аминокислотную последовательность и MW полипептидов.
(A) Температура перехода, T t и (B) ΔT t / M NaCl ELP как функция количества пентапептида ELP для 25 мкМ растворов ELP в фосфатно-солевом буфере. (C) T t [KV 7 F-144] и ELP [KV 2 F-128] как функция pH для 0,625 мг / мл (10,2-11,2 мкМ) растворов ELP в 20 мМ фосфате. буфер.
Результаты и показывают влияние ионизируемых групп на T t ELP. показывает, что чувствительность к соли, определяемая параметром ΔT t / M NaCl (определяемая как уменьшение T t , вызванное добавлением 1 M NaCl к 25 мкМ раствору ELP в PBS) находится в диапазоне 30-50 ° C и 15-25 ° C для ELP [KV 2 F] и ELP [KV 7 F], соответственно.Повышенная солевая чувствительность серии ELP [KV 2 F] по сравнению с серией ELP [KV 7 F] согласуется с большей плотностью остатков Lys в ELP [KV 2 F]. Кроме того, показано, что изменение T t ELP [KV 2 F-128] и ELP [KV 7 F-144] при повышении pH с 7,5 до 12,5 составляет 64 ° C и 23 ° C. , соответственно. Это наблюдение согласуется с биофизическими свойствами других заряженных ELP 50 , 53 , 54 и может быть отнесено на счет заметной разницы в ионизации ELP при повышении pH выше pK их остатков Lys.
Химическое сшивание ELP
Реакция сшивания ELP [KV 7 F-72] и ELP [KV 2 F-64] с THPP была проведена в 20 мМ фосфате, 100 мМ NaCl при pH это варьировалось от 2 до 13 (). показывает, что ELP [KV 7 F-72], сшитый в фосфатном буфере при pH 7,5, набухал при 4 ° C, но находился в свернутом состоянии при 37 ° C из-за термически инициируемого объемного фазового перехода сшитых цепей ELP. . Напротив, ELP [KV 2 F-64], сшитый в тех же условиях, показал меньшее разрушение, чем гидрогели ELP [KV 7 F-72] при 37 ° C.Чтобы изучить различия в их микроструктуре, лиофилизированные и разрушенные гидрогели ELP визуализировали с помощью сканирующей электронной микроскопии (SEM). Гидрогель ELP [KV 2 F-64] демонстрирует более плотную микроструктуру, чем гидрогель ELP [KV 7 F-72], который был сшит в идентичных условиях. Коэффициент набухания (Q w ), определяемый как отношение веса набухшего геля (W s ) к весу высушенного геля (W d ), Q w = W s / W d , гидрогелей ELP [KV 7 F-72] как функция температуры варьировались от 12.От 3 ± 0,5 при 4 ° C до 3,7 ± 0,2 при 37 ° C. Напротив, гидрогели ELP [KV 2 F-64], сшитые при pH 7,5, демонстрируют Q w , который варьируется от 8,2 ± 0,5 при 4 ° C до 4,2 ± 0,7 при 37 ° C. Более низкий коэффициент набухания ELP [KV 2 F-64] при 4 ° C по сравнению с ELP [KV 7 F-72], а также его более плотная микроструктура, предположительно, обусловлены его более высокой плотностью сшивки, чем ELP [KV 7 F-72] гидрогелей из-за большей концентрации остатков Lys (K) в ELP [KV 2 F-64].Более высокие плотности химически конъюгированных аминов, аминометилфосфинов, а также более высокое соотношение гидрофобного гостевого остатка Phe в гидрогелях ELP [KV 2 F-64] резко снижают НКТР сшитых гидрогелей ELP, делая гели непрозрачными при 4 ° C. Сопутствующие исследования стабильности гидрогелей ELP показывают, что влажная масса сшитых THPP гидрогелей His 6 с меткой ELP в PBS при 37 ° C существенно не изменилась в течение 60 дней, что позволяет предположить, что гели, сшитые THPP, были стабильными в течение как минимум двух месяцев. в физиологических условиях. 18
(A) Схема механизма меж- или внутримолекулярного сшивания между остатками Lys ELP и THPP (β- [трис (гидроксиметил) фосфино] пропионовая кислота). (B) фотографии термочувствительных набухших гидрогелей ELP [KV 7 F-72] и ELP [KV 2 F-64], сшитых THPP в 20 мМ фосфатном буфере при pH 7,5 при 4 ° C и 37 ° C, соответственно, и их изображения поперечного сечения, полученные с помощью SEM (растровая электронная микроскопия). Масштабные полосы на изображениях SEM показаны в 50 мкм (1) и 20 мкм (2).
Кинетика гелеобразования ELP, поперечно сшитого THPP [KV 7 F-144], измеренная осцилляторной реологией как функция времени, показала, что гидрогели ELP образуются менее чем за одну минуту в физиологических условиях, причем образование гидрогелей определяется точка пересечения модуля динамической памяти (G ‘) и потерь (G ”) (). 55 После этой точки перехода эластичный отклик гидрогелей ELP начал преобладать над вязким откликом, и структура гидрогелей продолжала развиваться, когда G ’увеличился до более чем 5.3 кПа в течение часа, в то время как G ”оставался постоянным, приблизительно на уровне 0,1 кПа. Эти результаты предполагают, что остатки Lys в гидрогелях ELP продолжали сшиваться до тех пор, пока G ’не достигнет своего максимального значения (). 15 Полностью сшитые гидрогели ELP из ELP [KV 7 F-72] и ELP [KV 2 F-64] были высокоэластичными, что было продемонстрировано в динамическом испытании на кручение, когда значения G ‘превышали G ”в течение нескольких декады частоты (от 0,01 до 50 рад / сек). Кинетика сшивания ELP [KV 7 F-144] и других ELP в физиологически релевантном буфере с изотонической концентрацией соли (PBS) была сходной и поэтому не показана.Кроме того, целостность и выживаемость сшитых THPP ELP после инъекции в участок ткани на модели козы оценивали как инъекционные гидрогели для восстановления суставного хряща костно-хрящевого дефекта. 56 Мы наблюдали, что смесь растворов THPP и ELP становилась мутной в течение одной минуты и становилась твердой через 5 минут. Таким образом, все хирургические участки были закрыты через 5 минут после инъекции в участок дефекта хряща. Результаты этого исследования привели нас к выводу, что гелеобразование происходит достаточно быстро, так что диффузия непрореагировавшего THPP в пределах <5 минут от места дефекта не вызывает беспокойства в отношении гелеобразования in vivo .Достаточное количество THPP оставалось в дефекте с течением времени, чтобы обеспечить образование и удержание геля через 7 дней и даже через 3 месяца. 56 Предварительные исследования также показывают, что реакция THPP с другими аминами в месте инъекции будет способствовать интеграции геля ELP с существующей тканевой структурой, что предположительно необходимо для успешной процедуры заполнения дефекта хряща.
Колебательные реологические профили для смесей ELP [KV 7 F-144] и THPP. Аликвоты THPP (200 мг / мл, 20 мМ фосфат, 700 мМ NaCl, pH 7.5) добавляли к ELP [KV 7 F-144] (200 мг / мл ELP, 20 мМ фосфат, pH 7,5), помещенному в ступень реометра «конус на пластине», уравновешенного при 35 ° C. Упругая составляющая динамического модуля G ’и вязкая составляющая G” как функция времени показаны на (A) и (B). Динамическое срезание проводилось при скорости 1 рад / с и γ 0 = 0,01.
Механические свойства гидрогелей ELP
Окончательные механические свойства полностью сшитых гидрогелей ELP характеризовались при комнатной температуре их: (1) комплексным модулем сдвига, | G * |, (2) равновесным модулем сжатия, E и ( 3) равновесный модуль сдвига μ для косвенной оценки степени эффективного сшивания.Механические свойства ELP [KV 7 F-72] и ELP [KV 2 F-64] с разной плотностью Lys значительно различались при одинаковых условиях сшивания, а также сильно зависели от pH сшивания (7,5 и 12,0 ). Средние значения для | G * |, динамического модуля гидрогелей ELP [KV 2 F-64], варьировались от 25,8 до 45,8 кПа, что в 3,6 — 4,8 раз больше, чем у сопоставимых ELP [KV 7 F-72] ] гидрогели при двух различных значениях pH, pH 7.5 (* p <0,001) и pH 12,0 (** p <0,01), используемых для проведения реакции сшивания. Значения для | G * | гидрогелей ELP [KV 7 F-72] и ELP [KV 2 F-64], сшитых при pH 12,0, примерно в 1,7-2,2 раза больше, чем гидрогелей, сшитых при pH 7,5, и этот эффект был статистически значимым для обоих ELP [KV 7 F-72] гидрогели (*** p <0,05) и гидрогели ELP [KV 2 F-64] (** p <0,01) (). Это наблюдение показывает, что степень сшивания ELP посредством THPP зависит от pH, возможно, из-за высокого соотношения [NH 2 ] / [NH 3 + ] в ELP при pH 12.0.
Механические свойства гидрогелей ELP [KV 7 F-72] и ELP [KV 2 F-64], сшитых THPP в 20 мМ фосфате при pH 7,5 и 12,0. (A) комплексный модуль сдвига, | G * |, (B) равновесный модуль сдвига, E, и (C) равновесный модуль сдвига, μ. Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение (n = 4). *, р <0,001; **, p <0,01; ***, p <0,05, значительно различается между типами ELP и pH сшивки.
Эта общая картина также наблюдается для E и μ, которые обеспечивают измерения модулей материала геля при сжатии и сдвиге, соответственно ().Результаты показывают, что широкий диапазон механических свойств сшитых гидрогелей ELP может быть достигнут путем сшивания ELP с различной плотностью Lys и путем проведения реакции сшивания при различных pH. Кроме того, значения угла потерь (δ), который указывает на рассеяние, присущее материалам (δ = 0 ° для упругого твердого тела; δ = 90 ° для ньютоновской вязкой жидкости), находятся между 1,0 ° и 3,0 ° независимо от формул ELP. , что позволяет предположить, что все гидрогели ELP являются высокоэластичными и энергоемкими твердыми телами, как сообщалось ранее. 15 , 16 Примечательно, что модуль сдвига сшитых гидрогелей ELP [KV 2 F-64] сопоставим или выше, чем у некоторых соединительных тканей, таких как пульпозное ядро или мениск (см. ). Это предполагает их потенциальную полезность в качестве функционального каркаса, который может помочь в восстановлении хрящевой ткани. 14 , 16
Таблица 1
Комплексные модули сдвига полимерной сети
Полимерные сети | МВт (кДа) | Периодичность Lys | Концентрация | мл * | (кПа) a | Каталожный номер b | ||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
Корцерват ELP, 37 ° C | 36.1 | 17, 7 | 180 | 8-10 | 15 | ||||||
THPP-поперечно-сшитый ELP | 31,0, 28,3 | 9, 4 | 200 | 5,8 -45,8 | 906Настоящее исследование | Nuus Pulposus | NA | NA | NA | 11.0 | 58 |
Суставной хрящ | NA | NA | NA | 440,0 | 59 |
Биосовместимость смешанных сшитых волокон ELP при комнатной температуре с ELP-гидрогелями при комнатной температуре
7 F-144] и THPP при молярном соотношении 1: 1 остатков HMP к остаткам Lys ELP, и полученный гель культивировали при 37 ° C. Жизнеспособность клеток оценивали с момента инкапсуляции до 3 дней в культуре.Изображения флуоресцентных клеток, полученные с помощью окрашивания живых / мертвых, показывают, что клетки выжили после THPP-поперечного связывания ELP с однородным распределением клеток и оставались жизнеспособными в день 0 и день 3. Небольшое количество клеток продемонстрировало красную флуоресценцию при окрашивании через 3 дня, однако это указывает на проникновение гомодимера этидия-1 через поврежденные клеточные мембраны и последующее связывание с нуклеиновыми кислотами. Это открытие показывает, что не все инкапсулированные клетки выжили в гелях, сшитых THPP. Содержание ДНК инкапсулированных фибробластов в каждом гидрогеле существенно не различалось между 0 и 3 днями (p> 0.05), однако, это указывает на то, что гибель клеток не была значительным ограничивающим фактором (рис. 7C). Связанные исследования инкапсулированных человеческих хондроцитов в гидрогелях ELP, поперечно сшитых THPP, показывают, что клетки выживают до 12 недель, даже для старых человеческих клеток дегенерированных тканей 57 , клинически значимое открытие, учитывая, что эндогенные клетки, вероятно, будут способствовать заселению этих гелей in vivo в этой временной шкале. Вместе эти результаты показывают, что сшитые THPP гидрогели ELP при молярном соотношении HMP и остатка Lys 1: 1 не являются цитотоксичными, и эти гидратированные гидрогели ELP могут поддерживать выживание клеток in vitro в течение 3 дней и, вероятно, гораздо более длительных периодов времени.Вместе с результатами механических испытаний эти наблюдения предполагают, что сшитые таким образом ELP образуют биосовместимую инъекционную систему с потенциалом для поддержки регенерации тканей в несущей нагрузке среде.
Флуоресцентная микроскопия фибробластов, инкапсулированных в быстро сшитые гидрогели ELP [KV 7 F-144], и их содержание ДНК в каждом гидрогеле. Выживаемость клеток инкапсулированных фибробластов оценивали на (A) день 0 и (B) день 3 с помощью флуоресцентного анализа жизнеспособности / цитотоксичности клеток.Содержание ДНК в фибробластах в каждом гидрогеле количественно измеряли с помощью анализа ДНК Picogreen ™. Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение (n = 5). p> 0,05, не было обнаружено разницы между днем 0 и днем в содержании ДНК в конструкциях.
Дэйв Рэмси | ELP | Весна, Техас
Stone Insurance Group позаботится о вас!
Быть ELP непросто; это тяжелая работа, потому что ELP придерживаются более высоких стандартов мастерства. В то время как ELP действительно платят взносы для покрытия расходов на обслуживание веб-сайтов и трудоустройства, поддержка Дэйва Рэмси не покупается — она заработана.У Дэйва Рэмси есть команда из 45 человек, которая несколько раз опрашивает потенциальных ELP и оказывает поддержку, чтобы убедиться, что ваш ELP дает советы, которые дал бы Дейв. Его команда также заботится о том, чтобы каждый ELP был человеком, с которым вам комфортно разговаривать, и человеком, которому вы можете доверять.
Кроме того, они ежемесячно оценивают эффективность всех ELP, чтобы убедиться, что они (команда Stone Insurance Group) порекомендуют вам лучшего агента. Кроме того, каждый человек, использующий ELP, имеет возможность оценить их на основе своего личного опыта с помощью проводимых нами опросов.
ELP обеспечивают отличное обслуживание клиентов и просты для пониманияНаша команда в Stone Insurance Group заботится о том, чтобы у каждого из наших ELP действительно было сердце учителя, поэтому вы можете доверять своему ELP в предоставлении первоклассного обслуживания клиентов. Никто не любит, когда его унижают или заставляют думать, что он не имеет значения. ELP гордятся тем, что относятся к каждому фанату Дэйва как к другу. Компания Stone Insurance Group, получившая весной статус ELP Дэйва Рэмси, живет этим подходом каждый день со своими клиентами.
Зачем использовать независимого страхового специалиста ELP?Шокирующее количество людей, сами того не осознавая, переплачивают за страхование автомобиля и жилья. На вас работает независимый страховой профессионал, а не страховая компания. Они не ограничиваются планами одной страховой компании. Независимые агенты могут искать по десяткам полисов многих уважаемых компаний. И, что самое главное, услуги независимого страхового специалиста абсолютно бесплатны!
Если вы живете в Спринг или в любой другой части Техаса и ищете ELP Дэйва Рэмси и хотите получить лучший опыт в процессе покупки страховки, Stone Insurance Group — единственный номер, который вам нужен.
Позвоните в наш офис сегодня или перейдите на нашу страницу контактов, чтобы начать процесс.
Главный научный сотрудник Январский бюллетень
Уважаемый научный сотрудник
!С Новым годом. Приветствуем вас в обновлении этого месяца, подготовленном для окружных руководителей высшего звена. Как всегда, не стесняйтесь обращаться с идеями и вопросами ко мне или к контактным лицам, указанным ниже. Я с нетерпением жду возможности связаться с вами.
Пенни Швинн
Главный заместитель комиссара, Академическое управление
В ответ на отзывы TEA, полученные от округов и Кабинета суперинтендантов Техасской ассоциации школьных администраторов (TASA), а также в консультации с исполнительным руководством TASA, TEA пересмотрела календари тестирования на 2019–2020 и 2020–2021 учебные годы.
Просмотр календарей
Пересмотренные стандарты английского и испанского языков и чтения были приняты в 2017 году и будут применяться в детских садах до 8 классов, начиная с 2019–2020 учебного года.Учащиеся будут оцениваться только по стандартам, которые появятся как в текущем, так и в пересмотренном TEKS весной 2020 года, и будут оцениваться по всем пересмотренным TEKS, начиная с весны 2021 года. Чтобы облегчить усвоение пересмотренных стандартов, TEA предоставит доступ к материалам для повышения квалификации для ESC, районы и школы для использования на тренингах для персонала. TEA также модернизирует Академии чтения с помощью грантов на повышение качества чтения и развитие академий. Академии будут структурированы с использованием привлекательной смешанной модели обучения, которая включает в себя доставку цифрового и личного контента в течение 15 месяцев, начиная с 5-дневного профессионального обучения летом.Участники также получат индивидуальный инструктаж. Заявки на участие в конкурсных письмах принимаются до 1 марта 2019 г.
Узнать больше
Это последний призыв округа к участию в пилотной программе оценки качества учебных материалов. В рамках этого пилотного проекта округа получат эксклюзивный доступ к бесплатной, прозрачной и удобной для пользователя информации о качестве материалов, представленных издателями для 3–8 классов по изучению английского языка и чтению (ELAR).Округа могут использовать эти обзоры, аналогичные отчетам потребителей об учебных материалах, в качестве инструмента для оценки и выбора высококачественных учебных материалов. Заполните краткую (11 вопросов) заявку и заверения до Пятница, 11 января 2019 г. .
Применить здесь
TEA запрашивает предварительное общественное обсуждение проекта списка отраслевых сертификатов, которые будут использоваться для подотчетности государственных школ.Новый список отраслевых сертификатов должен вступить в силу в 2019–2020 учебном году и будет применяться к рейтингам подотчетности школ в августе 2021 года. Сейчас открыт период общественного обсуждения, который завершится 4 февраля 2019 года.
Читать ТАА
Отчет об академической успеваемости штата Техас за 2017–2018 гг. (TAPR) был выпущен с расширенным охватом и расширенными функциями. Теперь он имеет две формы: онлайн-систему данных, более полную и динамичную, чем в предыдущие годы, и версию в формате PDF.
Посмотреть отчет
Прочтите прошлые бюллетени в нашем архиве бюллетеней для руководителей академических учреждений.
.