Как подключить проходной выключатель как обычный и наоборот: можно ли это сделать

На чтение 6 мин Просмотров 5к. Опубликовано 28.06.2019 Обновлено 12.06.2019

Установка проходного выключателя является оптимальной, когда необходимо управлять световым устройством из нескольких разных мест. Зная схему подключения, для подобной системы можно использовать традиционный прибор. Чтобы обеспечить комфортное управление источником света, нужно знать, как подключить проходной выключатель как обычный.

Особенности конструкции

Применение проходного выключателя

Исходя из количества коммутируемых электрических цепей, устройства могут быть одно-, двух- и трехклавишными. Клеммы с винтовыми или пружинными зажимами. Также конструкция зависит от функционального назначения. Виды устройств отличаются при использовании для внешней или внутренней проводки.

Подобное электрооборудование предназначено для включения и выключения из разных мест одного или группы светильников. Нет потребности возвращаться в другой конец помещения, чтобы нажать клавишу. Электроприборы применяют в квартирах большой площади, в коридорах и на лестницах, при освещении садовых дорожек, в спальне. Кроме удобства, это дает экономию электроэнергии.

Проходные выключатели также используются в концертных залах, на стадионах, в подземных переходах и туннелях, в подъездах высотных домов.

Различия между проходным и традиционным выключателем

Разница между проходным и обычным выключателем (вид сзади)

По внешнему виду выключатели ничем не разнятся. Внутренняя конструкция обычного снабжена одним входом и выходом. Может иметь до трех клавиш, что позволяет управлять несколькими источниками освещения. Чаще устанавливают возле входа в помещение. Подключение осуществляется с помощью двух клемм.

Классический проходной имеет пару выходов и один вход. В этом случае электрический ток не разрывается, а перенаправляется на любой другой выход. Под корпусом изделия нанесена схема. Проходной одноклавишный снабжен трехжильной коммутацией и тремя клеммами с медными контактами. Это переключатель, который перенаправляет ток на другие участки.

По конструкции, способу установки и типу управления выключатели могут быть:

• клавишные;
• кнопочные;
• ползунковые;
• тяговые;
• тумблерные.

Также их классифицируют в зависимости от напряжения и силы тока, степени защиты, климатических условий, в которых их устанавливают.

Важно не спутать электроприбор с перекидным или перекрестным. На клавише проходного обозначен вертикальный треугольник, в остальных он расположен в горизонтальном направлении.

Как подсоединить проходное устройство

Подвод тока осуществляют через распределительную коробку. Выбирают подходящее место, устанавливают ее и выводят трехжильный кабель. Кроме фазы и нуля он снабжен заземляющим проводом, что делает систему безопасной. Заводская цветовая маркировка жил упрощает монтаж. Чаще это медный гибкий кабель, сечение отдельных проводов от 1 до 1,5 мм.

Предварительно делают разметку, где будут располагаться выключатели и светильники. Затем штробят стены и выполняют разводку линий проводников. Сверлят ниши для монтажа механизма выключателя. После подготовительных работ можно подсоединять всю систему.

Провода в распределительной коробке

Для правильного и безопасного подключения следует соблюдать следующую последовательность:

1. Прежде всего необходимо удостовериться, какой провод в коробке является фазой, обычно он красного цвета.
2. Отключить напряжение.
3. К близлежащему выключателю подводят фазу и подключают ее на клемму «1».
4. По маркировке на клеммнике подсоединяют остальные жилы, запомнив соответствующие цвета.
5. Аналогично выполняют работу на другом выключателе.
6. Жилу от второго выключателя с фазой светильника соединяют с ярким проводом в распределительной коробке.
   
7. Два других провода от первого выключателя подводят к соответствующим клеммам второго.
8. Ноль и заземление от коробки подводят к таким же по цвету жилам светильника.
9. Все скрутки необходимо выполнить правильно, заизолировать соединения.

Затем можно подать ток на несколько часов и проверить работу системы. Каждый из выключателей должен отключать и включать осветительный прибор независимо от другого. Если этого не происходит, следует проверить правильность схемы. Обнаруженные очаги тепла – признак слабого контакта. Необходимо обесточить систему и пересмотреть соединение.

Нельзя скручивать медную и алюминиевую жилу.

Как из простого выключателя сделать проходной

Схема управления освещением с двух мест с помощью проходных выключателей

Для преобразования понадобится два выключателя – одно- и двухклавишный. Лучше, если они будут от одного производителя и одинаковые по размеру. Суть переделки — добавление еще одного контакта в двухклавишный обычный выключатель. Предварительно нужно убедиться, что конструкция позволяет поменять местами клеммы.

На керамическом основании есть группа общих, частных и контакты «коромысла». Электрическую часть снимают, один из подвижных контактов разворачивают на 180°. Одну площадку из общей группы срезают. Получившийся механизм собирают, проверяя его работу.

Устройство закрывают одинарной крышкой. Можно оставить двойные клавиши, склеив их между собой. Таким образом, в одном положении активируется одна цепь. Переключив клавишу, будет подключаться другая.

Перекидной выключатель

Варианты схем

Снабжен двумя входами и выходами, имеет четыре клеммы, сразу переключает пару контактов. Используется не так часто, но в некоторых случаях незаменим. Облегчает передвижение в темное время суток:

• в большом коридоре или холле с множеством дверей;
• в квартире с тремя уровнями;
• спальне с выключателем у входа и двумя рядом с кроватью;
• находясь в доме, возможно управлять светильниками в гараже, на террасе, в беседке.

Чтобы обустроить освещение лестницы в трехэтажном здании, необходимо создать три точки контроля. Перекидной переключатель перекрестного типа не используется сам по себе. Подключать его нужно в разрыве между проходными выключателями. Зная порядок подключения проходного, несложно разобраться, как сделать переключатель перекидной.

Их количество может доходить до 10, но они всегда должны быть расположены между проходными.

Есть несколько схем для управления освещением из 3 и более мест. Собрать цепь можно через распределительный щиток, или минуя его. Возможно подключение сразу нескольких типов светильников.

Можно ли использовать проходной выключатель как обычный

Иногда необходимо из проходного выключателя сделать обычный двухклавишный. Устанавливают проходное устройство таким образом, чтобы оно работало как простое. Для этого нужно подключить его без пары.

Однако тогда теряется смысл элементов его конструкции. А ведь сложность механизма и количество деталей сказывается на цене. Нет смысла покупать дорогой проходной выключатель и использовать его как обычный.

Недостатки проходных устройств

Перед подключением нужно всегда проверять схему. Входные и выходные контакты перекидного выключателя могут располагаться по-разному

Положение клавиш не позволяет определить, выключена или включена система. Например, сразу не удастся понять, отключен свет или перегорела лампочка. Невозможно одновременно из разных мест управлять световым прибором. Большое количество подключенных приборов подразумевает массу скруток в распределительной коробке. Ошибки в подключении вынуждают собирать всю схему заново.

Проходной выключатель обладает многими функциональными возможностями. Но чтобы его подсоединить, нужно приобрести еще один прибор. Также возрастает количество соединительных проводов, что увеличивает общую стоимость системы. Обыкновенный выключатель имеет сравнительно низкий ценовой показатель, но проигрывает в функциональности.

://

💡 проходной двухклавишный и с одной клавишей

У человека, который не очень хорошо разбирается в электрике, иногда возникают сложности с подключением приборов освещения. Чаще всего при самостоятельном выполнении ремонта домашние мастера задаются вопросом, как подключить двойной выключатель. На первый взгляд все кажется довольно просто, но существует несколько схем подключения, поэтому при выполнении работы учитывают определенные нюансы.

Особенности проводной разводки

Перед тем как подключить выключатель, стоит разобраться с особенностями разводки проводов. Схема подключения зависит от количества клавиш выключателя:

Популярная букмекерка запустила мобильное приложение для Андроид, скачать 1xBet можно по ссылке абсолютно бесплатно и без регистрации.

1. Проще всего подключать одноклавишные разновидности приборов. В этом случае в распределительной коробке должно быть только два провода – один с фазой, а другой с нулем. Чаще всего синий провод означает ноль. Он соединен с аналогичным кабелем на осветительном приборе. Проводка с фазой сначала идет на выключатель, потом возвращается в распределительную коробку и затем только идет к фазе лампочки.
2. Для подсоединения двухклавишного выключателя в коробке тоже будет два кабеля. Однако жила синего цвета на входе будет соединена с другой проводкой аналогичной расцветки. Фаза идет на разрыв обеих кнопок. Выходящие провода идут к двум разным лампочкам или к отдельным группам светильников. Причем корпус прибора содержит три отверстия: два слева и один справа. Фазу входа подключают справа, а кабель, идущий к светильнику, – слева.
3. Подключение трехклавишного выключателя проводят так же, как и модели с двумя клавишами. Ноль идет на каждую группу лампочек. Входящая фаза идет на разрыв и разделяется на три проводника, идущих к разным группам осветительных приборов.

Необходимые инструменты для подключения

Перед тем как подключить выключатель света, готовят следующие инструменты:

• острый нож;
• плоскогубцы;
• соединители;
• индикаторную отвертку.

Правила и нормы для размещения выключателей в квартире

Если решено подключить выключатель с одной клавишей или многоклавишную модель, нужно выбрать подходящее место, учитывая правила размещения подобных электротехнических приборов. Согласно строительным нормам, устройства для выключения и включения освещения располагают возле входной двери в помещении. Оптимальное место на стене со стороны расположения ручки на дверном полотне.

Если светильники стоят в спальне и предназначены для освещения прикроватной зоны, то устройство для переключения света ставят возле изголовья кровати. При монтаже прибора в помещении с повышенной влажностью или на кухне придерживаются правил, описанных в ПУЭ.

Они гласят, что:

• от душевой кабинки переключатель устанавливают на расстоянии минимум 600 мм;
• от газопровода отступают не менее 500 мм;
• минимальное расстояние от дверного проема – 100 мм;
• прибор ставят от пола на высоте минимум 900 мм.

Важно! Выключатели света не ставят в ванной комнате, а выносят за их пределы, например, в коридор.

Есть и другие не менее важные моменты. На лампочку или осветительный прибор всегда идет нулевая жила. Фазу подключают к коммутирующим устройствам.

Схемы подключения выключателей

Чаще всего у домашнего мастера возникает вопрос, как подключить выключатель с двумя клавишами или большим числом переключателей. Чтобы дать ответ на этот вопрос, нужно поэтапно рассмотреть особенности подсоединения, начиная с одноклавишной модификации. Ниже приведены распространенные схемы подключения для разных моделей.

Внимание! Работу начинают только после того, как убедятся в отсутствии напряжения.

Подключение одноклавишного выключателя

Для начала стоит сказать, что переключающее устройство ставят только на разрыв фазы. Нулевой проводник от монтажной коробки идет к светильнику, а фаза к выключателю. При переключении клавиш прибора сеть замыкается или размыкается, включая и отключая лампочку.

Последовательность подключения:

1. От распределительного щита к коробке прокладывают кабель.
2. Жилу с фазой подключают к выходу коммутирующего устройства.
3. Синий провод подсоединяют к шине нуля.
4. Коробку закрывают заглушкой.
5. На клеммах переключателя закрепляют провода.
6. На прежнее место устанавливают клавишу в подрозетнике.

Рекомендуем к прочтению:

Подключение двухклавишного выключателя

Чтобы дать ответ на вопрос, как подключить двухклавишный выключатель, стоит сказать, что он бывает двух типов. Чаще используют модели с общим входом фазы и двумя раздельными выходами. В этом случае в монтажной коробке на лампочки расходятся нулевые жилы, а кабель с фазой подключают к входу двухклавишной модификации.

От каждого выхода через распределительную коробку идет собственный проводник. К каждому светильнику подходит свой провод. Их можно включать одновременно или раздельно.

Подключение трехклавишного выключателя

Разобравшись, как подключить двухклавишный выключатель к двум лампочкам, несложно понять последовательность выполнения работы с трехклавишными моделями. Принцип подключения такой же самый, только от коробки отходит большее количество проводов.

Подключение перекрестного выключателя

Благодаря схеме несложно понять, как подключить перекрестный выключатель к лампочке. Подобные устройства дают три и более точки управления осветительными приборами. Промежуточный или перекрестный переключатель используют в комплексе с парой проходных моделей.

Коммутирующее перекрестное устройство бывает с одной или двумя клавишами. В одноклавишной модели 4 клеммы, поэтому из распределительной коробки к ней идет 4 провода. Перекрестный выключатель устанавливают в разрыв пары жил. Иными словами, с одной стороны к прибору подключают пару кабелей, идущих от выхода первого проходного устройства, а с другой стороны – от выхода второго переключателя проходного типа.

Вследствие использованию перекрестного коммутирующего устройства включение освещения происходит независимо от положения клавиш в неработающей системе. Справедливо и обратное – если свет включен, то отключить его можно любой клавишей. Управлять освещением можно из любой точки.

Подключение проходного выключателя

Теперь разберемся, как подключить проходной выключатель с разным количеством клавиш. По своей сути, эти приборы больше напоминают не двойной или тройной выключатель, а переключатель. Внешне они похожи на одноклавишные модели, но в общей системе их всегда применяют парно. Нулевой провод прокладывают так же, как описано для стандартных модификаций с одной или несколькими клавишами. Фаза идет из коробки на вход одного устройства. К входу второго переключателя подсоединяют жилу, идущую на светильник.

Второй выход первого прибора соединяют через распределительную коробку с третьим выходом второй модели. Соответственно, третий выход первого переключателя связывают жилой с выходом второго агрегата.

На заметку! Проходные переключатели бывают с двумя и тремя клавишами, поэтому подходят для управления 2-3 приборами освещения или их группами.

Подключение сенсорного выключателя

Также легко подключить от коробки сенсорный выключатель. Рассмотрим, как это сделать через розетку. Этот вариант удобен тем, что не нужно тянуть жилы от распределительной коробки, потому что фазу и ноль можно запитать от рядом расположенной розетки. Придерживаются следующего порядка действий:

1. Для начала обесточивают выбранную розетку. После чего ее вскрывают и проверяют индикатором отсутствие тока.
2. К фазе розетки подсоединяют проводник. Другой его конец подключают к входу коммутирующего устройства.
3. К выходу выключателя подводят кабель, идущий к светильнику.
4. Далее в розетке находят нулевой контакт и подключают туда второй конец провода, соединенного с выходом от прибора освещения.
5. Аналогично подключают фазу. Только один конец крепят к фазе розетки, а второй – к входу светильника.

Подключение выключателя со световым индикатором

Многим домашним умельцам полезно будет узнать, как подключить выключатель с подсветкой. Разница в подключении состоит только в том, что питание нужно подать и на индикатор подсветки. В качестве подсветки в таких моделях используют светодиод с резистором или неоновую лампу. В выключенном положении питание подсветки происходит через нить накаливания лампы, которая имеет маленькое сопротивление.

Рекомендуем к прочтению:

Для понижения напряжения подсветки применяют токоограничивающий резистор. Малого напряжения и силы тока достаточно, чтобы подсветка горела, но не хватает для лампы накаливания осветительного прибора.

Принцип работы: когда контакты переключателя разомкнуты, ток фазы идет через сопротивление, проходит через лампочку подсветки и направляется через нить накаливания на ноль. После замыкания контактов неоновая лампочка выключается из общей схемы и гаснет. При подключении переключателя с подсветкой руководствуются теми же принципами и схемами, что и при монтаже обычного прибора с одной или двумя клавишами.

Техника безопасности при работе

В процессе работы придерживаются следующих правил безопасности:

• Запрещено подключать ноль на коммутирующее устройство. Во время проведения ремонтных работ обязательно проверяют, не поступает ли на ноль фаза.
• При отсутствии навыков проведения электромонтажных работ лучше обратиться за помощью к специалисту.
• Перед установкой выключателя или проведением любых работ, связанных с электричеством, обязательно отключают напряжение.

Виды выключателей для бытового применения

Решая, как подключить лампочку через выключатель, стоит разобраться в разновидностях приборов.

По количеству клавиш

Клавиш может быть несколько или одна. Многоклавишные приборы применяют для управления несколькими источниками света или группой ламп на одном осветительном приборе. Функциональность переключателя не зависит от количества клавиш.

По способу монтажа

В зависимости от способа установки переключатели бывают накладные и встраиваемые. Чаще используют последний вариант, потому что он совместим со скрытой проводкой. Для монтажа выключателя в стене высверливают отверстие и предварительно устанавливают в него подрозетник сечением 6,8 см.

Накладные разновидности устанавливают на стену в помещении. Они совместимы с открытой и скрытой проводкой. Поскольку агрегат сильно выступает над поверхностью стены, в интерьере он смотрится не лучшим образом. Чаще их применяют в хозяйственных помещениях и подсобках. Если класс защиты корпуса довольно высокий, то накладной выключатель разрешено устанавливать на улице или в помещении с высокой влажностью.

Классы защиты выключателей

Класс защиты коммутативного устройства обозначают буквами ІР и двухзначным числом, в котором первая цифра указывает на степень защиты от пыли и твердых частиц, а вторая – это показатель влагозащищенности. Первое число бывает в пределах 0-6, а второе – 0-9. Большее значение указывает на более высокий класс защиты.

Для установки в жилой комнате достаточно прибора с классом защиты ІР20. Для кухни лучше выбрать модель класса ІР44. В неотапливаемом помещении или в ванной комнате устанавливают агрегат типа ІР45. Для установки за пределами дома подходят только модели со степенью защиты ІР от 55 до 66.

Виды по типу клемм и способу управления

В зависимости от управляющего механизма коммуникативные устройства подразделяют на следующие виды:

1. Клавишные имеют качающийся механизм, который фиксируется в любом крайнем положении. Конструкция бывает с пружинами, коромыслом, шариками и другими деталями для закрепления клавиши в нужном положении.
2. Кнопочные разновидности бывают с фиксацией и без нее. В последнем случае дополнительно используют релейное устройство для замыкания цепи.
3. Модели поворотного типа сегодня практически не используют, кроме случаев, когда нарочно создают помещение в ретро-стиле. Это конструкции накладного типа.
4. Приборы со шнурком удобны при расположении возле кровати или в другом месте отдыха.
5. Сенсорные агрегаты легко переключать, потому что для этого достаточно коснуться поверхности.
6. Разновидности с дистанционным управлением удобны тем, что свет можно включать и отключать не вставая.

Многие переключатели укомплектованы винтовыми клеммами. Для подсоединения зачищенный конец жилы запускают в гнездо, а для фиксации в клемме отверткой затягивают небольшой винт. Моножильные провода закрепляют напрямую в клеммах, а их многожильные разновидности требуют предварительного надевания клеммного наконечника.

В современных выключателях стоят пружинные клеммы без винта. Провод просто вставляют в отверстие до упора. Происходит автоматическая надежная фиксация. Однако некоторые электрики уверяют, что подобный способ соединения не очень долговечный в сравнении с винтовыми клеммами.

Как подсоединить выключатель двухклавишный. Как подключить двойной выключатель на две лампочки: схемы и инструкции

Главная » Электрика » Как подключить проходной выключатель (управление светом из двух и более точек)

Как подключить проходной выключатель (управление светом из двух и более точек)

Нынешние цены на электричество заставляют задуматься об экономии там, где раньше об этом даже не думал. Например, освещение на лестнице. Неважно, в частном или многоэтажном доме — все равно платить нужно. Раньше просто оставляли свет гореть. Сегодня задумываешься о том, чтобы его выключить, но бегать вверх/вниз тоже нерадостно. Оказывается есть решение. Чтобы свет не горел постоянно, существуют схемы управления лампами из нескольких мест. То есть один или несколько светильников могут включаться и выключаться из нескольких точек. Выключатели для этого нужны особенные. Называются они проходными. Иногда встречаются названия «дублирующие» или «перекидные». Все это — один тип электрооборудования. Отличаются от обычных большим числом контактов. Соответственно и схема подключения проходного выключателя сложнее. Тем не менее, разобраться можно.

Как выглядит и работатет проходной выключатель

Если говорить о лицевой стороне, то отличие единственное: едва заметная стрелочка на клавише вверх и вниз.

Как выглядит проходной одноклавишный выключатель. Видите, есть двойные стрелочки

Если говорить об электрической схеме, все тоже просто: в обычных выключателях только два контакта, в проходных (еще называют перекидными) три контакта, два из которых — общие. В схеме приличествуют всегда два или больше таких устройства, вот при помощи этих общих проводов они и коммутируются.

Разница — в количестве контактов

Принцип работы прост. Изменением положения клавиши вход подключается к одному из выходов. То есть у этих устройств только два рабочих положения:

• вход соединен с выходом 1;
• вход соединен с выходом 2.

Никаких других промежуточных положений нет. Благодаря этому все и работает. Так как контакт переключается из одного положения в другое, электрики считают, что правильнее их называть «переключатели». Так что проходной переключатель — это тоже это устройство.

Чтобы не полагаться на наличие или отсутствие стрелочек на клавишах, нужно осмотреть контактную часть. На фирменных изделиях должна быть нанесена схема, позволяющая понять, какого типа оборудование у вас в руках. Она точно есть на изделиях фирм Lezard (Лезард), Legrand (Легранд), Viko (Вико). На китайских экземплярах они часто отсутствуют.

Так выглядит перекидной выключатель с тыла

Если такой схемы нет, смотрите на клеммы (медные контакты в отверстиях): их должно быть три. Но далеко не всегда на недорогих экземплярах та клемма, что стоит одна — это вход. Часто они перепутаны. Чтобы найти где же находится общий контакт, необходимо прозвонить контакты между собой при разных положениях клавиши. Сделать это обязательно, иначе ничего работать не будет, а само устройство может сгореть.

Вам нужен будет тестер или мультиметр. Если есть мультиметр, переводите его в режим звука — он пищит при наличии контакта. Если в наличии стрелочный тестер, прозваниваете на короткое замыкание. Ставите щуп на один из контактов, находите с каким из двух он звонится (прибор пищит или стрелка показывает КЗ — отклоняется вправо до упора). Не меняя положение щупов, изменяете положение клавиши. Если КЗ пропало, один из этих двух — общий. Теперь осталось проверить который. Не переключая клавишу передвигаете один из щупов на другой контакт. Если есть КЗ, то тот контакт, с которого щуп не двигали и есть общий (это вход).

Может станет понятнее, если посмотрите видео о том, как найти вход (общий контакт) для проходного выключателя.

Схема подключения проходного выключателя с двух мест

Такая схема удобна в двухэтажном доме на лестнице, в проходной комнате, в длинном коридоре. Можно применить ее и в спальне — выключать верхний свет у входа и возле кровати (сколько раз приходилось вставать, чтобы его включить/выключить?).

Электрическая схема включения проходного выключателя с 2 мест

Ноль и земля (если есть) заводятся сразу на светильник. Фаза подается на выход первого переключателя, вход второго заводится на свободный провод светильника, выходы двух устройств соединяются между собой.

Глядя на эту схему, несложно понять, как работает проходной выключатель. В том, положении, что на рисунке, светильник включен. Нажав на клавишу любого из устройств, цепь разрываем. Точно также, при выключенном положении, переведя любой из них в другое положение мы замкнем цепь через одну из перемычек и лампа загорится.

Чтобы было понятнее, что и с чем соединять, как прокладывать провода, приведем несколько изображений.

Расключение проводов на проходном выключателе

Если говорить о помещении, то прокладывать провода нужно примерно так, как на фото ниже. По современным правилам все они должны находится на расстоянии 15 см от потолка. Укладываться они могут в монтажные коробы или лотки, концы проводов заводятся в монтажные коробки. Это удобно: при необходимости можно заменить пробитый провод. Также по последним нормам все соединения происходят только в монтажных коробках и при помощи контакторов. Если же делаете скрутки, то лучше их пропаять, а сверху хорошенько замотать изолентой.

Возвратный провод лампы подсоединяется ко выходу второго выключателя. Белым обозначены провода, соединяющие между собой выходы обоих устройств.

Как разводятся провода по помещению

Как все соединить в клеммной коробке рассказано в видео.

Схема на 3 точки

Чтобы иметь возможность включать/выключать свет с трех мест, необходимо к двум выключателям купить перекрестный (крестовой) переключатель. От описанных ранее он отличается наличием двух входов и двух выходов. Он переключает сразу пару контактов. Как все должно быть организовано, смотрите на рисунке. Если разобрались с тем, что выше, понять эту просто.

Электрическая схема управления лампой с трех точек

Как собрать такую схему? Вот порядок действий:

Ноль (и заземление, если есть) заводится сразу на лампу.

Фаза подключается ко входу одного из проходных выключателей (с тремя входами).

Вход второго подается на свободный провод лампы.

Два выхода одного трехконтактного устройства заводятся на вход перекрестного переключателя (с четырьмя входами).

Два выхода второго трехконтактного устройства заводятся на вторую пару контактов переключателя с четырьмя входами.

Та же схема, но уже в другом ракурсе — куда подключать провода на корпусах.

Куда подключать провода

А вот примерно так разводить по помещению.

Проводка при управлении лампой из трех мест

Если вам нужна схема на четыре, пять и боле точек, то отличается она только количеством перекрестных переключателей (на четыре входа/выхода). Выключателей (с тремя входами/выходами) всегда в любой схеме два — в самом начале и в самом конце цепи. Все остальные элементы — перекрестные устройства.

Схема подключения проходных выключателей на 5 точек

Уберете один «перекрестник», получите схему управления из четырех точек. Добавите еще — будет уже схема на 6 мест управления.

Чтобы окончательно уложить все в голове, посмотрите еще это видео.

Двухклавишный проходной выключатель: схема подключения

Чтобы с нескольких мест управлять освещением двух ламп (или групп ламп) с одного выключателя есть двухклавишные проходные выключатели. Они имеют шесть контактов. При необходимости общие провода находите по тому же принципу, как и в обычном устройстве этого типа, только прозванивать придется большее количество проводов.

Схема подключения 2-х клавишного проходного выключателя отличается только тем, что проводов будет больше: фаза должна подаваться на оба входа первого выключателя, также как и с двух входов второго должна уходить на две лампы (или две группы ламп, если речь идет о многорожковой люстре).

Принцип подключения двухклавишных проходных выключателей

Если необходимо организовать управление двумя источниками света из трех и более точек, придется в каждой точке ставить по два перекрестных переключателя: двухклавишных их просто нет. В этом случае одна пара контактов заводится на один перекрестник, вторая — на другой. И дальше, при необходимости они между собой соединяются. На последний в цепи двухклавишный переходной выключатель подключают выходов обоих перекрестников.

Как организовать управление двумя лампами из четырех мест

Если вдуматься, все не так уж и сложно, а схема подключения проходного выключателя из 2-х точек, так вообще простая. Только проводов много…

Главная » Проводка » Выключатели » Проходные » Полезные советы для правильного использования схемы подключения двухклавишного проходного выключателя

Полезные советы для правильного использования схемы подключения двухклавишного проходного выключателя

Многим интересен вопрос подключения двухклавишного проходного выключателя самостоятельно, без вызова электриков. Сделать это не так то сложно, особенно имея под рукой подробные схемы подключения и детальное описание каждого шага.

Отличительные особенности выключателя проходного двухклавишного

Выключатель, который предназначен для управления раздельными источниками света, называется двухклавишным. К таковым источникам относятся как различные разводки софитов, так и люстры с раздельным управлением. Обычно схемы с 2-клавишными выключателями активно применяются в квартирах и кабинетах, где необходимо управление двумя линиями освещения. В коридорах, ванных комнатах и проходных помещениях нет в этом острой необходимости, поэтому там применяется самый обычный одноклавишный проходной выключатель.

На таких выключателях есть специальные стрелки, которые нужны для указания положения on/off.

Если же разводка сделана таким образом, что в комнате несколько равнозначных точек управления, то положение «Включено» или «Выключено» однозначно определить нельзя.

В этом и заключается основное отличие таких систем от обычных одноклавишных с точки зрения пользователя.

С технической точки зрения такой выключатель представляет собой два одноклавишных, которые имеют общий корпус и функционируют по принципу «перекидывания» контактов. Во всех двуклавишных системах управления используется 6 контактов: 2 являются входными, а 4 — выходными.

Схема подключения двухклавишного проходного выключателя

В решении вопроса подключения двухклавишных проходных выключателей наиболее полезным будет сначала разобраться в тонкостях установки двух одноклавишных выключателей.

Как подключить два одноклавишных проходных выключателя

Чтобы понять механизм работы более сложной системы, нужно сначала разобраться с её базовым элементом.

Приведенная схема включает в себя такие элементы: распределительный короб, пару проходных одноклавишных выключателей, любой светильник и провода. Такой вид схемы включения проходного выключателя двухклавишного используется для обеспечения возможности управлять светом из двух мест.

Как видно на предоставленном рисунке, «земля» проходит из распределительной электрической коробки напрямую на лампочку. Фазу сети подсоединяют к общему зажиму первого выключателя. Два выходных контакта этого выключателя соединяются с такими же элементами второго. Логически понятно, что из второго выключателя провод идет обратно в коробку и уже оттуда напряжение поступает на лампу.

Монтаж на практике достаточно прост: сначала выключатели размещаются в своих коробках.

Затем устанавливаются лампочки. причем соединяются они между собой параллельно и наружу выходит лишь один двухжильный кабель.

На подготовленное заранее установочное место помещается распределительная коробка, куда подключаются контакты и от выключателя, и от ламп, а также «земля».

Включение освещения с двух мест — схема управления

А вот теперь можно говорить и о более сложной системе. Вот схема подключения проходного выключателя с 2х мест:

Вы, наверное, уже догадались, что такая схема представляет собой ни что иное, как удвоенную схему подключения одноклавишного выключателя для управления из двух мест. По факту, каждая клавиша является независимым выключателем. Здесь всё просто, поэтому нет смысла особо распространяться. Гораздо интереснее выглядит ситуация с подключением хотя бы трех двухклавишных проходных выключателей.

Предварительный расчет предполагаемой мощности для бытовых потребностей помогает осуществить правильный и безопасный монтаж электропроводки. При расчете сечения кабеля по мощности перед окончательным выбором нужного сечения надо учитывать потребляемые группы электроэнергии и величину максимального тока для каждого сегмента.

Повысить надежность электроснабжения потребителей помогает правильное соединение проводов в распредкоробке. Здесь можно прочитать о разных методах подключения кабеля, как однородного, так и из разных металлов, в распределительном коробе.

Здесь может возникнуть несколько сложностей, которые легко установить из представленных выше схем:

• средний выключатель имеет больше проводов и совсем другую схему подключения;
• конструкция такого выключателя несколько отличается от крайнего.

Понятно, что оба эти фактора никак не способствуют упрощению схемы, а, наоборот, создают огромное количество проводов.

В этом то и ключевой недостаток: больше проводов — больше материалов, больше материалов — больше работы — больше затраты.

Несмотря на непопулярность данной схемы, рассмотреть её все же стоит.

Особенности управления освещением с трех мест

Из-за низкой популярности такой схемы достаточно сложно найти перекрестные двухклавишные проходные выключатели, которые занимают среднее место в схеме. Обычно такую проблему решают установкой дополнительной пары одноклавишных выключателей в одну рамку. Схема этого приведена на рисунке:

Как видите, эта схема характеризуется наличием ещё одной параллельной схемы одноклавишного проходного выключателя. Таким образом, для управления из трех мест используется две совмещенные схемы для управления из двух мест.

Монтаж схем проходного двухклавишного выключателя

О монтаже одноклавишных схем мы говорили выше. Для двухклавишных всё несколько иначе: тут нет распределительной коробки, поэтому механизм будет таков:

• сначала в специальные коробки устанавливаются сами выключатели, выводы которых оставляются достаточно длинными;
• после этого устанавливаются светильники, контакты которых тоже должны быть большой длины;
• производится подключение в соответствии со схемой.

Как видите, каких-либо сложных деталей в монтаже двух и трех проходных двухклавишных выключателей нет. Всё достаточно просто, а имея под рукой схемы и механизм монтажа с работой справится даже непрофессиональный электрик.

Подключение проходного двухклавишного выключателя на видео
Как подключить проходной выключатель

Все сталкивались с ситуацией, когда для включения освещения необходимо пересечь темную комнату. Это доставляет массу неудобств, помощью в подобной ситуации станет установка проходного выключателя, позволяющего управлять освещением из разных мест. В этой статье мы расскажем вам, как подключить проходной выключатель, продемонстрируем схема подключения, а также покажем фото и видео инструкцию.

Назначение проходного выключателя

Проходные выключатели используют для включения и выключения осветительных приборов из разных концов комнаты, коридора или на лестничных маршах. Схема их работы позволяет не возвращаться к первому устройству и выключать свет из удобного места.

По своему исполнению они бывают:

Конструкция устройства определяет количество подключаемых к нему осветительных приборов и точек отключения. Кроме управления клавишами существует сенсорная модель.

Устройство проходного двухклавишного выключателя

Любой выключатель служит для разрыва фазного провода и обесточивания электроприборов, но специфика проходного выключателя заключается в том, что размыкая одну цепь, он замыкает контакты парного переключателя.

В отличие от обычного устройства, подключаемого двумя проводами, проходной выключатель требует трехжильной коммутации. По своей сути он является переключателем, направляющим напряжение с одного контакта на другой. Освещение включается, когда клавиши на обоих устройствах находятся в одном положении и выключается, когда положение меняется. Управление может осуществляться не только из двух, но и из трех и более мест, для этого в схему подключается перекрестный переключатель, а если необходимо, то несколько. Одноклавишный выключатель оснащен тремя клеммами. Двухклавишное устройство имеет 5 клемм: по две для соединения с выключателями и одну общую. У трехклавишного выключателя более сложное устройство, но, имея схему, разобраться в этом не предоставит сложности.

Монтаж проходного выключателя

Схема управления проходными выключателями

Схема подключения незначительно отличается от монтажа привычных выключателей, но наличие трех проводов вместо двух заставляет задуматься. Рассмотрим назначение каждого из них. Два провода используются в качестве перемычек между разнесенными по комнате выключателями, а третий служит для подачи фазы. Перед тем как начать подключать проходной выключатель, купите коммутационную коробку, в которой будет происходить соединение проводов.

Концы проводов освобождаются от изоляции на 2–3 см – это нужно для скрутки. Если провода будут соединены соединительными колодками, то провод зачищается не более чем на 1 см. В распредкоробке провод, подающий питание от распределительного щита, скручивается с входным контактом первого выключателя. Два оставшихся выходных контакта соединяются с такими же проводами от второго устройства. Входной контакт второго выключателя скручивается с проводом от лампы. Нулевой провод от осветительного прибора соединяется с нулем, пришедшим от щитка. Все места скруток закрываются изоляционной лентой. Сечение проводов для маршевых выключателей подбирается по мощности управляемого освещения.

Устройство, контролирующее две группы светильников

Схема подключения двухклавишных проходных выключателей

Устанавливать двухклавишный проходной выключатель целесообразно в большом помещении, где необходимо управлять несколькими осветительными приборами. Его конструкция представляет собой два одинарных выключателя в общем корпусе. Монтаж одного устройства для контроля двух групп позволяет сэкономить на прокладывании кабеля к каждому из одноклавишных выключателей.

Монтаж двойного проходного выключателя

Такой прибор используется для включения света в ванной и туалете или в коридоре и на лестничной площадке, он способен включать лампочки в люстре несколькими группами. Для монтажа проходного выключателя, рассчитанного на две лампочки, понадобится большее количество проводов. К каждому подводится шесть жил, так как в отличие от простого двухклавишного выключателя, проходной не имеет общей клеммы. По существу, это два независимых выключателя в одном корпусе. Схема коммутации выключателя с двумя клавишами выполняется в следующей последовательности:

В стене устанавливаются подрозетники для устройств. Отверстие для них вырезается перфоратором с коронкой. К ним по штробам в стене подводятся два провода с тремя жилами (или от распредкоробки один шестижильный).

К каждому осветительному прибору подводится трехжильный кабель: нулевой провод, заземление и фаза.

В коммутационной коробке фазный провод подключается к двум контактам первого выключателя. Два устройства соединяются между собой четырьмя перемычками. Ко второму выключателю присоединяются контакты от светильников. Второй провод осветительных приборов коммутируется с нулем, приходящим с распределительного щита. При переключении контактов общие цепи выключателей попарно смыкаются и размыкаются, обеспечивая включение и выключение соответствующего светильника.

Подключение перекрестного выключателя

Двухклавишные выключатели также используют при необходимости управлять освещением из трех или четырех мест. Между ними устанавливается двойной выключатель перекрестного типа. Его подключение обеспечивают 8 проводов, по 4 для каждого концевого выключателя. Для монтажа сложных соединений с множеством проводов рекомендуется использовать коммутационные коробки и выполнять маркировку всех кабелей. Стандартная коробка Ø 60 мм не вместит большое количество проводов, потребуется увеличить размер изделия или поставить несколько спаренных или приобрести распределительную коробку Ø 100 мм.

Провода в распределительной коробке

Важно помнить, что вся работа с электропроводкой и монтажом приборов выполняется при отключенном напряжении.

В этом видео рассказывается об устройстве, принципе подключения и установке проходных выключателей:

В этом видео показан эксперимент, в котором испытывались различные способы соединения проводов:

Монтажная схема подключения

Принцип подключения проходных выключателей

Схема подключения двухклавишного выключателя с подключением через распредкоробку

В статье все правильно написано, но я столкнулся стем, что электрик, который раньше устанавливал выключатели не оставил запасных проводов в коробке и когда один алюминиевый провод подломился пришлось повозиться с наращиванием этого провода. Советую оставлять запас хотя бы на два ремонта.

Я сам учился на электрика и иногда подрабатываю, в роли электромонтера. Но с каждым годом, или даже с каждым месяцем, создается всё больше вопросов по электрике. Работаю по частным вызовам. Но Ваша опубликованная инновация, мне в новизну. Схема интересная и обязательно мне пригодится в ближайшем будущем. Всегда стараюсь воспользоваться советами «бывалых» электриков.

Фото монтажа двухклавишного выключателя света

Стоит отметить, что перед тем, как подключить выключатель света, который является двойным, нужно проложить электропроводку. Если дом только строится и в нем проводится скрытый монтаж проводки, то сложностей нет. Саму проводку устанавливают еще до того, как наносится штукатурка.

После этого надо подключить сам выключатель и светильники к проводке. Прокладка всех проводов осуществляется согласно схеме (см. ниже).

Двухклавишный выключатель предназначен для включения и выключения из одного места двух электроприборов или управления отдельными секциями одного прибора.

Чаще всего такие выключатели используются для переключения режимов работы люстры: каждая из двух клавиш включает одну из двух групп ламп, а при включении обеих клавиш подключается полностью вся люстра.

Используя такой выключатель, можно контролировать освещенность помещения. Также применение выключателя света с двумя клавишами пригодится для включения освещения раздельных ванной комнаты и туалета.

Схему подключения проходного выключателя на две лампы составить на самом деле не так сложно, как может показаться на первый взгляд. Если это частный дом, подключить двойной выключатель света будет удобно для освещения улицы при выходе. Если есть возможность использовать осветительный прибор с двухклавишным выключателем на балконе, там наличие устройства будет тоже уместно.

В каждой из групп может быть разное количество лампочек – это может быть как одна, так десять и более ламп. Но двухклавишный выключатель может управлять лишь двумя группами ламп.

Понятно, что если планируется осуществить открытый монтаж проводки, то каждый кабель, который надо подключить к двухклавишному выключателю и светильнику, прокладывается в отдельных кабель-каналах или гофротрубах.

Если же проводка в доме используется в течение многих лет, и действующие электропровода не подходят, то их нужно будет заменить. В том случае, если они были смонтированы открытым способом, проблем не возникнет. Если же они были скрыты под штукатуркой, придется делать новые штробы и прокладывать новые кабели.После размещения кабелей на своих местах, приступают к их подключению.

Перед началом работ по замене электропроводки в квартире или частном доме и монтажу двухклавишного выключателя в целях безопасности следует полностью отключить электроснабжение.

Для этого достаточно будет отключить автоматический переключатель, который стоит в начале цепи, предназначенной для подачи тока к осветительным приборам.

И так, когда все подготовительные работы сделаны и провода размещаены согласно схеме, можно приступать к подключению двухклавишного выключателя.

Выключатель с подсветкой отличается от обычного только тем, что внутри его находится индикатор подсвечивания. Этот индикатор может представлять собой неоновую лампу или светодиод с ограничивающим резистором. Схема выключателя с подсветкой довольно проста.

Индикатор подсоединяется параллельно выводам выключателя. При отключении выключателем осветительной прибора индикатор подсветки оказывается подключенным к нулевому проводу сети через малое сопротивление лампы и загорается. При включении освещения схема индикатора оказывается закороченной и он гаснет.

Схема подключения выключателя с подсветкой основана на следующей последовательности действий:
• обесточивается цепь освещения. Для надежности отсутствие напряжения проверяется с помощью пробника или мультиметра;
• в проем в стене устанавливается и закрепляется коробка для выключателя. При замене старого – сначала производится его демонтаж;
• с выключателя снимается клавиша и производится подключение силовых проводов. Параллельно кабелям подключаются выводы индикатора подсветки;
• корпус выключателя устанавливается в коробку и закрепляется с помощью винтов;
• производится включение сети и проверка работоспособности выключателя, его подсветки и сети освещения.

Кроме стандартных моделей, выключатель из двух клавиш может дополнительно укомплектовываться подсветкой, индикатором. Подсветка помогает определить его в темноте, а светящийся индикатор даст понять, что электрическая сеть исправна и является замкнутой. Выпускают также модели с ударопрочными и влагозащитными корпусами. Устанавливаться они могут в бане, ванной или на улице.

Существуют еще и проходные выключатели. Конструкцию они имеют практически ту же, за исключением дополнительной клеммы. Такие устройства подключаются к одному или группе светильников и позволяют управлять освещением с противоположных концов помещения. Например, заходя в спальную, можно включить свет, а ложась спать, выключить его около кровати.

Галерея изображений

Самый простой вариант сооружения электроточки с двумя клавишами заключается в установке устройства с двумя механизмами в одном корпусе

Двойной выключатель можно собрать из двух одноклавишных модулей типа ABB Niessen Zenit, которые соединяются перемычкой из куска провода

Для подключения устройств необходимо отключить питание и подготовить провода. Длина проводов примерно по 10 см, их края нужно зачистить от изоляции приблизительно на 1 см

Провода подключаются согласно указаниям изготовителя. Фаза подсоединяется к клемме L, вторые два к клеммам со стрелками, расположенными над клавишами

Для соединения двух отдельных модулей в двухклавишный выключатель из отрезка провода делают перемычку

Подготовленной перемычкой соединяют два отдельных модуля. Дальнейшие действия по подключению производятся в общем порядке

Синий и зеленый провод подключают к каждому из двух модулей через клеммы со стрелками, белый подсоединяется к фазе одного из модулей

Стандартный двойной выключатель просто заводится в подрозетник, модульный вариант сначала устанавливается в суппорт и закрепляется в подрозетнике шурупами. Затем все закрывают рамкой

Каких-нибудь стандартов для размещения устройства законодательством не предусмотрено. Их установка подразумевает удобное использование для взрослых и детей.

И если раньше привычной практикой было размещать устройство на высоте около 2 м, то сейчас выключатель часто располагают на уровне опущенной кисти руки взрослого человека. Таким образом, элемент становится доступным практически для всех жильцов дома.

Размещать выключатель лучше так, чтобы он был доступен всем, кроме самых маленьких

Единственным местом, где размещение выключателя может иметь какие-либо ограничения — это ванная комната или баня. Здесь нужно учитывать размещение умывальника и открытого душа. При эксплуатации прибора он не должен попадать под капли воды.

Какие бы работы по электромонтажу ни приходилось выполнять, первое, что важно сделать — обесточить сеть. Ни на секунду нельзя забывать, что электричество опасно. Кроме воздействия тока, неграмотно проложенная электропроводка может стать причиной поломки электроприборов или возгорания в доме.

Правила поведения при работе с электросетями:

• обязательно обесточить сеть;
• не прикасаться к подключенным приборам мокрыми руками;
• не использовать металлические скобы для закрепления проводки;
• не перегружать электрическую сеть;
• поврежденный провод лучше заменить новым, а не ремонтировать его;
• выполнять работу можно только инструментом с заизолированными ручками;

Работая с электричеством, нельзя дотрагиваться к водопроводным или газовым металлическим трубам.

Приступая к самостоятельному подключению, необходимо:

• предпринять шаги по соблюдению техники безопасности;
• ознакомиться с закономерностями маркировки проводов;
• проверить сеть на соответствие маркировки.

Любому хозяину дома для замены и подключения выключателя вряд ли захочется приглашать электрика. К тому же, для выполнения этой задачи, нет необходимости в сложных приборах и инструментах.

Для установки понадобятся:

• монтажный нож;
• изоляционная лента;
• молоток и зубило;
• пассатижи;
• индикаторная отвертка, а также фигурная и прямая.

Если установку приходится проводить в новом месте, а в доме проложена скрытая проводка, может пригодиться дрель с насадкой «коронка» или перфоратор.

Без отвертки-индикатора не обходятся ни одни электромонтажные работы

Без знания и соблюдения маркировки приступать к установке категорически нельзя. Она используется для создания безопасных условий и сокращения временных затрат при проведении работ.

Правильная маркировка от производителя поможет избежать проблем с идентификацией проводников

Для формирования правильный соединений применяют следующие обозначения:

• ноль — всегда и без исключений синий;
• защита также строго одного цвета — желто-зеленого;
• фаза — имеет преимущественно коричневый или красный цвет.

Это лишь основные комбинации. Кроме того, чтобы исключить путаницу при идентификации, используют буквенно-цифровую маркировку.

Если при проведении работ выяснилось отсутствие визуальных обозначений, то необходимо самостоятельно промаркировать проводку с помощью разноцветной термоусадочной трубки или цветной изоляции.

Слепо доверять маркировке не стоит. Эти обозначения не раз меняли свои стандарты. Поэтому, приступая к делу, необходимо дополнительно проверить характер проводников. Для этого используют индикаторную отвертку и мультиметр.

Если в строении проведена однофазная электрическая сеть без системы заземления, то определить фазу или ноль поможет индикатор. Отключив электроэнергию, зачищают проводники и отводят их так, чтобы они не касались друг друга.

Включив подачу электроэнергии, к проводам подносят отвертку. Лампочка в индикаторе вспыхнет, при касании к проводнику фазы, а от прикосновения к нулю не загорится.

Мультиметр – многофункциональное контрольно-измерительное устройство, выполняющее работу как минимум трех контрольных приборов: вольтметра, омметра и амперметра

Внутренне устройство выключателя

Внутреннее устройство двухфазного выключателя отличается от однофазного наличием двух выходных клемм вместо одной.

Конкретнее, он складывается из таких элементов:

• механизма и декоративной панели;
• одной входной клеммы;
• двух выходных клемм;
• двух клавиш.

Клеммы — это специальные зажимные механизмы. Для присоединения провода достаточно лишь зачистить его, вставить в клеммник и зажать с помощью винта. Входная или общая клемма располагается преимущественно отдельно и маркируется как L.

С противоположной стороны размещаются две выходные клеммы. Они могут обозначаться как L1, L2 или 1,2. У некоторых моделей вместо клеммника могут быть винтовые зажимы. Использовать их нежелательно, так как крепление может постепенно ослабляться и его придется поджимать.

Основное отличие выключателя с двумя клавишами от одноклавишного собрата заключается в том, что с его помощью производится управление парным количеством осветительных приборов

Устанавливать устройство нужно так, чтобы при его включении нажимать на верхнюю половину клавиши. Определить верх и низ элемента можно с помощью индикатора — специальной отвертки, которая работает на замыкание.

Для этого берут гвоздь или кусочек провода и дотрагиваются им до одного контакта, к другому прикладывают индикатор, придерживая большой палец сверху.

Устройство выключателя с двумя клавишами немногим отличается от одноклавишного. Основные составляющие устройства: механизм, клавиши и декоративный корпус

Если огонек внутри не горит, значит, контакты выключателя разомкнуты. При включенном положении клавиш он должен светиться. Остается отметить верхнюю часть элемента.

Занимаясь подборкой электрики к новому или обновленному интерьеру в сети, часто приходится наталкиваться на фото двухклавишного выключателя. Данный прибор выглядит также аккуратно, как и одноклавишный, при этом выполняя сразу две полезные функции. При большей функциональной нагрузке, чем у стандартной разновидности, данный тип переключателей не является сложным в установке.

Применение

Применение такого устройства управления, как правило, проходит по двум сценариям. В первом случае к одному выключателю подводятся провода от двух разных приборов. Чаще всего, речь идет о лампах, осуществляющих освещение в смежных комнатах. Однако, управляемым может быть любой электрический прибор, начиная от кухонной вытяжки и заканчивая теплым полом.

Второй вариант использования переключателя позволяет обеспечить разные режимы работы прибора. Например, регулировать уровень освещения в помещении.

При использовании ламп, обладающих несколькими источниками света, данным типом выключателей контролируется подключение разного числа лампочек. Потому, нажатие одной из клавиш ведет к соответствующему зажиганию подведенных к ней лампочек.

Разборка

Процесс подключения двухклавишного выключателя можно осуществить своими руками. Здесь не потребуется серьезной узкоспециальной базы знаний. Главное: обесточить сеть при работе и соблюдать рекомендации.

Для того чтобы начать манипуляции, механизм потребуется разобрать. Внешне он выглядит, как целостная конструкция, не предназначенная к разборке, однако без снятия лишних деталей подключение невозможно.

При помощи тонкой плоской отвертки следует поддеть клавиши со стороны внешних боковин (или сверху) и аккуратно вынуть их из пазов.

Затем можно приступить к отсоединению рамки. Данный элемент крепится зажимами или винтами. То есть, используя отвертку, достаточно ослабить или отвинтить крепежи. После проделанной работы внутренний механизм выключателя легко вынется.

Подключение

Современные модели выключателей ориентированы на самостоятельную установку даже новичками. Помимо инструкции, вложенной в пакет со всеми составляющими, тыльная сторона механизма снабжена обозначениями всех контактов, а в некоторых случаях, еще и схемой подключения.

Всего в таком устройстве три контакта:

• входной, для фазового питающего провода;
• два выходных для управления приборами.

В процессе работы потребуется соединить входной контакт с проводом питания (фазой), а два выходных – с проводами управления прибором. В случае с люстрой это будут жилы, питающие разные лампочки.

Стоит отметить, что инструкция для подключения двухклавишной разновидности выключателя несколько меняется в зависимости от того, какой тип контактов используется в механизме. На рынке электротоваров представлено два типа контактных креплений:

• самозажимный
• винтовой.

Чтобы подключить двухклавишное устройство управления электроприбором используется трехжильный провод. При приобретении данного кабеля, особенно новичку, стоит обратить внимание на цвета изоляции проводов. Ускорит и облегчит процесс установки разноцветная изоляция.

Если речь идет о действующей сети, предварительной процедурой в установке любого выключателя является определение, который из двух проводов, подведенных к механизму, является фазовым. От этого зависит правильность подключения.

Осуществляется такая проверка при помощи щупа. Если собираемая схема является новой, фазовый провод выбирается на усмотрение монтажника.

После того, как фаза определена, ее нужно пометить маркером (лучше на поверхности изоляционного слоя). Затем сеть помещения обесточивается и можно приступать к непосредственному монтажу.

Установка выключателя с самозажимными контактами

Установка двойного выключателя с самозажимными контактами своими руками проста и безопасна. Преимуществом такого механизма является автоматический процесс фиксации вставляемой в гнездо жилы.

В случае с самозажимными контактами, их еще называют «втычными», провода купленного кабеля потребуется зачистить от изоляции на 8-10 мм длины. Затем, жила определенная, как фаза, подключается на входной контакт. Он, как правило, расположен в верхней части керамической основы и имеет маркировку 1 или L. Зачищенный провод просто вставляется в проем для фазы, а закрепление происходит при помощи внутреннего пружинного механизма. Две оставшихся зачищенных жилы должны быть вставлены в гнезда для выходных контактов. Процедура проводится аналогично установке входного контакта.

Перед тем, как приступить к монтажу выключателя на стену, важно проверить качество крепления жил кабеля. Для этого нужно просто потянуть за каждую жилу по очереди. Если провод окажется не зафиксирован или зафиксирован ненадежно, это может привести к его повреждению при эксплуатации, что, в свою очередь спровоцирует поломку или возгорание.

Потому, при обнаружении ненадежной фиксации, достаточно нажать на кнопку, расположенную над соответствующим контактом и полностью вытянуть жилу. Затем аккуратно повторить процедуру установки до тех пор, пока провод не будет зафиксирован в должной степени.

Когда с подключением контактов покончено, можно приступить к монтажу. Выключатель устанавливается в подрозетник при помощи специальных распорных лапок, расположенных, обычно, по бокам, которые встают в необходимое положение посредством управления винтов.

Здесь стоит отметить, что механизмы нового поколения обладают меньшими размерными характеристиками, нежели устройства старого образца. По этой причине не во всех старых подрозетниках новые выключатели станут надежно из-за несоответствия размеров. Потребуется либо замена подрозетника на конструкцию нового образца, либо его уменьшение механическим путем. Также можно рассмотреть «увеличение» распорок посредством замены их на более длинные полоски металла.

В подрозетниках нового образца выключатель фиксируется быстро, буквально парой поворотов винтов. Затем осуществляется дополнительное закрепление при помощи вмонтированного металлического каркаса. Остается выровнять положение механизма управления в стене согласно вертикальным и горизонтальным плоскостям. После этого рабочий механизм закрывается рамкой и клавишами из пластика.

Установка механизма с винтовыми контактами

Схема установки двухклавишного выключателя с винтовым креплением контактов не особенно отличается от самозажимного устройства. Сложность здесь состоит в том, что на таких приборах, как правило, нет обозначений контактов, а потому поиском входного нужно заниматься самостоятельно.

При этом, по логике расположения гнезд на тыльной стороне выключателя можно предположить, что отдельно стоящий в верхней части керамической панели вход и является контактом, предназначенным для фазы. Чтобы догадку подтвердить на 100%, нужно использовать индикатор.

Изоляция с проводов в данном случае снимается на 0,7 см. К верхнему контакту подводится фазный провод. Зачищенная часть жилы вставляется в зажим, образовавшийся при откручивании винта. Аккуратно, чтобы туда же не попал слой изоляции, винт фиксируется. Таким же образом подводятся два других контакта. Процесс фиксации в подрозетник и монтажа в стену проводится стандартным путем.

Теперь вопрос, как правильно подключить выключатель на две лампочки, не будет представлять сложности даже для человека, мало знакомого с электричеством в повседневной жизни. Главное соблюдать технику безопасности и лишний раз проконсультироваться со специалистом.

Фото двухклавишных выключателей

Существует значительное количество сфер использования двойных выключателей. Их используют для люстр, когда требуется контроль и регулировка яркости освещения. Актуальны они и для раздельного санузла. Для освещения входа в частных домовладениях. Если нет определенной подготовки, то схема подключения двухклавишного выключателя может вызвать некоторые трудности. Но используя инструкцию к монтажу и полезные рекомендации, с подобной установкой справится даже новичок.

Двухклавишное устройство является важной составляющей любого современного интерьера

Прежде чем узнать, как правильно подключить двухклавишный выключатель света, давайте узнаем больше информации об его устройстве. Механизм включает пластмассовый корпус, клеммы входного и выходного типа, две клавиши, а также у некоторых моделей есть индикатор света.

Если правильно выполнить подключение, то при помощи клавиш можно обеспечивать подачу электричества или останавливать его.

У конструкции есть некоторые достоинства:

• возможность отключать и включать целые группы ламп;
• экономия на кабеле, так как не нужно тянуть два провода, как для одинарных устройств;
• позволяет регулировать освещение при большом количестве ламп в люстре;
• применяется для помещений с повышенным уровнем влажности;
• не требует особого ухода;
• простота монтажа.

Перед изучением инструкции, как подключить люстру к двухклавишному выключателю, нужно подготовить все необходимые инструменты. К таковым относится пластмассовая форма, отвертки индикаторного и фигурного типа, обжимные инструменты, а также строительный нож.

Статья по теме:

Грамотный выбор электротехнического оборудования гарантирует безопасность, надежность и эстетичность использования. Давайте разберемся в существующих брендах и моделях.

Подготовка проводов для правильной установки

Предварительная заготовка кабелей зависит от типа подключенного оборудования. В таких механизмах предусмотрены готовые магистрали. Чтобы поменять компоненты, потребуется разобрать базу светильника. Устройство коробки предполагает три кабеля. Их общая длина не должна быть более 10 см. Концы кабелей необходимо зачистить от изоляции, а затем подсоединить к определенным клеммам. К клемме с обозначением L подсоединяется фаза. Подключение других проводов зависит от того, какие клавиши будут использоваться.

Полезная информация! Если у вас модульный механизм, то важно обеспечить питание каждого его компонента. При этом можно воспользоваться перемычкой.

Выбирая схему подключения двухклавишного выключателя, нужно учитывать, что монтаж и крепеж проводов производится с использованием зажимов винтового типа или самозажимных клемм. Первый вариант предполагает укладку оголенного провода между пластинами. При таком способе требуется периодическое подтягивание винта.

Выполняя подключение двухклавишного механизма, нужно помнить, что ноль подключается напрямую, а фаза прерывается при прохождении через устройство.

Процесс подключения производится так.

В завершение подсоединяется источник освещения и тестируется корректность работы выключателя. К монтажной коробке проводится двухжильный провод.

Статья по теме:

В данной статье рассмотрены вопросы выбора подходящих изделий и монтажные работы. Изучив эту информацию, можно самостоятельно реализовать проект с разумными затратами.

Вариант схемы подключения двухклавишного выключателя на две лампочки

Несложна схема подключения двухклавишного выключателя на две лампочки. Она включает такие этапы:

• обесточивание помещения;
• важно выявить выходящие проводки. Должны присутствовать кабели, отходящие на ноль, заземление и фазу. Чтобы в них лучше разобраться, следует посмотреть в щиток;
• проводится установка источников света и проведение проводов к выключателю;
• выключатели считаются навесными, так как крепятся на стены. При этом в стене должно иметься отверстие, куда выводятся провода. Соединение производится с помощью паяльника или методом скрутки.

После подведения всех деталей, выключатель фиксируется на поверхность стены. Стоит знать о разных техниках подсоединения проводов в распределительном коробе. Опрессовка актуальна для производственных помещений. Для пайки используется специальное оборудование. К самым простым и надежным способам стоит отнести применение самозажимных соединений. Также стоит иметь представление о способе подсоединения выключателя двухклавишного для скрытой проводки.

Особенности схемы подключения двухклавишного проходного выключателя

Часто применяется подключение проходного выключателя. Подобные устройства применяются для длинных коридоров, больших проходных комнат и лестниц. В просторных помещениях часто сложно подобрать подходящее место для установки включателя, поэтому без проходного устройства обойтись сложно. Розетка монтируется в любом месте, но регулировка должна быть доступной из любых мест. При этом нужно монтировать дополнительные элементы в начале и в конце помещения.

Подключение проходного механизма имеет некоторые особенности. Три контакта требуется для грамотного подсоединения. К отдельному контакту подводится фаза, а ноль ведется к светильнику. Два других контакта используются для подсоединения проходных устройств.

Подключение переходного или перекрестного двухклавишного выключателя проще выполнить, если следовать некоторым рекомендациям:

• при монтаже проверяйте отдельные кабели;
• фаза- это один провод, его можно проверить с помощью индикаторной отвертки;
• перед креплением важно проверить работоспособность конструкции.

Какие могут быть проблемы

Неисправности установленного устройства случаются от разных причин. Например, одна из клавиш может пропускать определенную световую группу, или все лампы включаются одновременно. Это свидетельствует о том, что не работает распределение осветительных приборов на клавиши. Также выключатель может вообще не срабатывать. Подобные проблемы возникают при неправильном подсоединении проводов или при их подключении в неправильном порядке.

Помните, что при закладке проводов часто не соблюдаются стандарты маркировки по цветам, поэтому проводите дополнительную проверку. С помощью индикатора прозвоните все провода.

Простые советы помогут избежать многих проблем. Не забывайте перед началом любых работ с электричеством отключать электричество. Действуйте в соответствии с инструкцией и правильно маркируйте проводники.

Cхема подключения двухклавишного выключателя на две лампочки (видео)

Возможно Вам также будет интересно:

Проходной выключатель: схема подключения на 2 точки и другие варианты монтажа Схема подключения светодиодной ленты 220в к сети – выполняем правильно Экономим электроэнергию: датчики движения для включения света

Подключение двухклавишных выключателей к люстре на две лампы несколько сложнее, чем рассматриваемый недавно . Но так как в комментариях эта тема поднимается довольно часто — внесём сюда ясность и выложим подробную инструкцию со схемой. Начнем с того, что у нас есть люстра или настенный светильник с двумя лампочками, и надо чтобы каждая из этих ламп была независимо включена с помощью отдельной кнопки.

Посмотрим на принципиальную схему

Тут подключаем только фазные проводники к выключателю, а точнее: фазовый вход питания 220 В, фазовый провод который питает первую лампочку, фазовый провод который питает вторую лампочку.

Нейтральные и защитные провода соединены вместе внутри коробки с помощью электрических разъемов (), за исключением автоматического выключателя.

Для правильной работы схемы нужен 4-х жильный кабель, идущий от коробки к лампе. Если электрическая проводка двухжильная (защиты нет, система TN-C), достаточно трех проводов. В этом случае подключите нейтральный проводник к защитному разъему в лампе, и он соединяется с помощью короткого провода с нейтральной клеммой.

Оно работает так, что нажав клавишу слева, электрический потенциал от шнура питания подключенного к клемме № 1, передается на клемму № 2 и оттуда до верхней лампы. При нажатии правой клавиши потенциал от клеммы № 1 передается на клемму № 3 и оттуда питание идёт до нижних лампочек.

Путем переключения любой клавиши закрываем электрическую цепь, потому что с одной стороны подаем потенциал, а с другой стороны к лампам нейтральный провод постоянно подключен (рисунок анимирован — понаблюдайте за ним).

Помните, что любые работы с электрическим напряжением 220V могут быть опасны. Перед началом работы убедитесь, что напряжение выключено, например с помощью тестера-неонки. Удалите предохранители или отключите токовые предохранители! Несоблюдение этой инструкции может привести к поражению электрическим током, что уже случалось не раз с беспечными людьми.

Переходим к практическому подключению

Давайте расширим тему ответив на вопрос: Что, если у люстры больше лампочек?

Ничего особенного не произойдёт, схема остается прежней. Внутри люстры лампочки делятся на две группы (произвольно), и для переключателя выводится один провод для каждой группы лампочек. Например в люстре с 5 лампочками сделаем 4 вывода на электрическом блоке.

Нейтральный станет для всех ламп общим, а 2 фазных будут подаваться на 2+3 или 4+1 лампы.

Подключите защитный провод к последней клемме подключенной к корпусу лампы. Этот зажим может быть размещен отдельно, непосредственно на корпусе лампы, но его может и не быть, если корпус люстры выполнен из токонепроводящего материала, такого как пластик.

В результате мы зажжем 2 лампы одной кнопкой, другой — 3 лампочки, а нажимая обе клавиши получаем свет от всех 5 лампочек.

Как это выглядит со стороны переключателя — смотрите на фото:

В данном переключателе есть 4 пары контактов.

• В одно из двух отверстий в верхнем левом углу вставьте провод фазы источника 220 В.
• Для пары контактов в левом нижнем углу подключаем один из фазных проводников к лампе.
• К паре клемм в нижнем правом углу подключаем второй фазовый проводник, ведущий к лампе.

Как узнать где тут терминал? Он всегда обозначается на корпусе переключателя.

Здесь он отмечен стрелками. На рисунке слева вы видите стрелку, указывающую на внутреннюю часть переключателя (верхний левый угол), символизирующую введение потенциала сети или шнура питания. На рисунке справа (левый нижний угол переключателя) стрелка указывает направление отхода тока от переключателя и переход питания к лампе.

Как управлять двумя независимыми лампами

Принципиальная схема управления двумя независимыми лампами будет выглядеть так:

Тут заменяем один 4-х проводный кабель двумя проводами, минимально должны быть 3-х жильные (они могут быть и 4-х проводными для будущих модернизаций, но только 3 из них будут использоваться в данный момент).

Два независимых выключателя 2-х ламп

Такое решение довольно редко, хотя двойные переключатели часто имеют 4 терминала. То есть иногда двойной переключатель состоит как бы из двух независимых отдельных переключателей. Или же просто у вас есть 2 одиночных клавишных выключателя. Тогда просто разделяем тот переключатель что в схеме на две половинки, каждая из которых ставится там где нужно в комнате.

Это позволяет подключать каждую из ламп к своему источнику питания.

Уверены, что после изучения этой статьи подключение двойного переключателя будет таким же простым делом,

Как подключить двойной переключатель?

Схема подключения двойного проходного выключателя с 2-х мест для 2 ламп

Что такое проходной выключатель мы уже рассказывали в одной из наших статей «Как включить люстру из двух разных мест ». Основной целью статьи было рассказать о том, что бывают такие проходные выключатели. Они способны обеспечить питание лампы (люстры) из разных мест от 2 и более, но при этом в статье не были рассмотрены частные случаи. Под частным случаем мы понимаем возможность управлять не только одной лампой (группой ламп), но и включать – выключать и две группы. Ведь бывают и двойные проходные выключатели. Именно о подключении двойного проходного выключателя мы расскажем в нашей статье.

Двойной проходной выключатель и как он монтируется в стену

По сути двойной проходной выключатель является размноженной копией своего младшего собрата, то есть одинарного проходного. Разве что в одном корпусе их уже двое. То есть два отдельных проходных выключателя в одном корпусе и есть один двойной проходной.
На нашем рынке это продукция довольно таки редкая. Это мы к тому, что встречаются они не часто, но все же «есть в природе». Так двойные проходные выключатели выпускает legrand, lizard, viko… Это двухклавишные выключатели с обозначением на каждой из клавиш. (значок проходного выключателя)
Монтаж двойного проходного выключателя в стену ни чем не отличается от монтажа обычного одинарного либо двойного выключателя. Более подробно о процессе установки выключателя в стену можно узнать из статьи «Монтаж встроенного выключателя в стену ». После того как вы смонтировали выключатель, необходимо проложить проводку. То есть вам необходимо будет осуществить электрическое подключение двух проходных выключателей. Как раз о такой электрической схеме далее.

Схема подключения двойного проходного выключателя в 2 местах для 2 ламп (групп ламп)

По логике происходящего здесь все также как и для одинарного двойного выключателя, но взятого два раза. То есть фактически необходимо осуществить подключение двух двойных выключателей, так как в случае если бы они были просто в разных корпусах. Только что они не в разных все же корпусах, а в одном корпусе.
Схема будет выглядеть следующим образом.

А если вы будете все монтировать в распределительные коробки, то соединения будете еще и следующими.

О том как лучше соединить провода можно узнать из статьи «Как соединить электрические провода в проводке дома ».
В принципе, здесь все так как мы и говорили, схема реализована с выключателями, словно это два независимых проходных выключателя.
В итоге у нас получается электрическая схема с двумя сдвоенными проходными переключателями, которые обеспечивают управления двумя лампами (группами ламп) в одном месте.

Подводя итог о подключении двойного проходного выключателя с 2-х мест для 2 ламп

Итак, подводя итог нашей статьи можно сказать о том, что желающие управлять люстрой с двумя группами ламп с двух разных мест вполне могут реализовать свое желание на практике. Тому способствуют два фактора. Первое, производители выключателей производят сдвоенные проходные переключатели. Второе, воспользовавшись электрической схемой с нашего сайта вы сможете использовать 2 проходных выключателя, для управления двумя группами ламп из одного места.

Добавить комментарий

Комментарии

Как подключить проходной выключатель

Если использовать проходные выключатели, возможно управление одним источником света из двух, трех и более мест. Рассмотрим, какие бывают варианты подключения проходных включателей.

Подключаем двухклавишные проходные выключатели

Этот способ необходим в том случае, если есть длинный коридор. Входя в него, Вы зажигаете свет, дойдя до конца, свет нужно выключить. Именно здесь и используется схема подключения двух проходных выключателей.

Схема подключения двухклавишного выключателя

Необходимо переключение перекидного вида, т.е. с одной стороны коридора контакты замыкаются, с другой – размыкаются. Для этого устанавливаем разветвительную коробку, из которой выходят два кабеля – нулевой и питания, соответственно, нулевой отходит на первый выключатель, питания – на второй. Провод фазы в этом случае соединяется через коробку с двумя контактами выключателя в конце коридора, и эта фаза перекидывается на лампу.

Схема подключения двухклавишного выключателя

Бывают также и двойные проходные сенсорные выключатели. Нет ничего сложного в том, как подключить модель с диммером. Данные устройства управляются с 30 метрового расстояния. Провода сенсора подключаются к разрыву в цепи управления лампы. В свою очередь сам монтаж коробки сенсорного выключателя практически не отличается от обычного. Один провод уходит в минус, другой – к фазе. Перед тем, как установить дистанционные проходные переключатели, нужно определить, какие контакты уходят к светильнику, а какие к командному блоку или разветвительной коробке, объединить их в определенные группы.

Тройные включатели

Принципиальных отличий, как подсоединить проходные выключатели Легранд для трехместного управления от методики, изложенной выше, нет. Нужно использовать спаренный вид выключателя и четырехжильные провода. При помощи спаренного выключателя с одного прибора контакты перекидываются на остальные два.

Схема крестового спаренного выключателя

Одинарные тройные переключатели имеют по три контакта – это два входа и один выход. Нулевой провод от кабеля питания уходит на источник света. Выходные контакты соединены со вторым проходным выключателем, а третий контакт уходит на сеть питания.

Одинарные тройные переключатели

Кроме того, к любой из таких схем можно подключить специальный пульт дистанционного управления, который работает без проводов. Можно использовать абсолютно любое устройство для включения техники на расстоянии мощностью до 1,5 кВт с целью выключения освещения на определенной дистанции. Для этого к пульту подключаем реле, направляем в сторону лампы и нажимаем на определенную кнопку, которая после будет использоваться нами как командная. После этого, операция зафиксирована в энергозависимой памяти и теперь при нажатии именно этой кнопки будет включаться или выключаться свет, независимо, подключен пульт к реле или нет. Места управления освещением в таком случае не ограничены.

Двухклавишные выключатели

Эти устройства имеют возможность управлять шестью источниками света одновременно. Конструктивное решение выполнено таким образом, что в одном корпусе расположено 2 отдельных выключателя. Они могут подсоединяться следующими образами:

• 3 контакта или одинарный метод;
• спаренный или перекрестный способ (для подключения 4 и более светильников).

Разные схемы подключения выключателей

Покупаем проходные перекрестные выключатели

Перед тем, как подключить проходные выключатели света, нужно подобрать приборы под свои потребности. Сенсорные выключатели имеют от одной до четырех контактных зон, благодаря чему одним прибором можно контролировать до четырех источников света. Такими моделями являются устройства фирм lezard, viko и makel.

Если используются обычные накладные переключатели электричества, рекомендуются приборы двухжильные от фирм Шнайдер Электроникс и abb. Несмотря на то, что цена этих приборов немного ниже. Чем вышеперечисленных фирм, они не отличаются по качеству исполнения.

Что нужно знать, перед тем, купить проходные выключатели:

• количество источников света;
• расположение светильников: параллельное или последовательное;
• сила напряжения сети питания квартиры.

Количество установочных мест, из которых можно управлять светом, неограниченно, любой электрик это подтвердит. Монтаж переключателей производится по всем правилам: герметизация контактов, установка заземления, подключение к УЗО.

Как подключить двухклавишный проходной выключатель? Схема подключения и нюансы

Два одиночных проходных переключателя, объединённых в один корпус – вот что собой представляет проходной выключатель, схема подключения на 2 клавиши, о которой мы расскажем в этой статье. Необходимо шесть проводов для того, чтобы это устройство нормально работало, было правильно подключено. По три провода поддерживают работу каждого из приборов.

Количество клавиш и мест не так уж важно. В любом случае, надо просто соединить несколько штук в одном устройстве, чтобы решить проблему, если надо иметь вариант с тремя и более деталями для управления, местами.

• Основные особенности
• Некоторые нюансы при подключении устройства
• Разводка в коробке
• Как соединить провода между выключателями?
• Двойные выключатели с розетками
  • Проводка без заземления
  • Как выполняется проводка с заземлением?
• Советы для тех, кто собирается купить переключатель

Основные особенности

По своей сути, схема подключения двухклавишного проходного выключателя практически идентична одноклавишному варианту, просто представлена как удвоенная схема.

• Первый этап – подготовка проводов, мест к подключению. Обычно используется пара кабелей, где есть не меньше трёх жил.
• Провода необходимо укоротить. От края подрозетника провода должны выступать минимум на 60-80 миллиметров.
• Изоляция и оплётка с концов жил снимается полностью. Достаточно будет расстояния в 10-14 миллиметров.
• После этого можно начинать подключение проводов к механизму самого выключателя. На тыльной стороне всегда присутствуют клеммы со своей маркировкой, благодаря которой монтаж становится легче.
• Провода укладываются в подрозетнике настолько компактно, насколько это возможно. Наконец, переходим к механизму самого выключателя.
• Выравниваем систему строго по горизонтальной плоскости. Крепёжные винты должны быть полностью затянуты. Лучше всего для крепления использовать элементы, идущие в комплекте.
• Устанавливается специальная рамка.
• Для этого используем специальный фиксатор из пластика. Его надо вставлять в пазы суппорта.
• Остаётся только провести монтаж трёх или двух клавиш.

Некоторые нюансы при подключении устройства

Внутри распаячной коробки при работе с двухклавишными переключателями нужно в два раза больше не только самих проводов, но и их соединений. Лучше купить специальные клеммники, чтобы при их организации не возникло серьёзных проблем. Тогда невозможно будет запутаться и в скрутках. Маркер и лента помогут обозначить важные детали, тогда процесс вообще не отнимет много времени.

При монтаже трёх и больше устройств запитывается две разные цепи, отвечающие за освещение. Потому лучше использовать последовательную схему для подключения. Сначала маркируем и ставим одну цепь, а потом – вторую.

Разводка в коробке

У таких конструкций выхода 4, а входа всего 2. Для подключения к фазной линии нужен двухжильный провод. 4-жильная его вариация понадобится, чтобы соединить выключатели между собой. Такие провода развести несложно, весь процесс отнимает минимум времени.

Начинаем монтаж, предварительно отключив электричество. К соответствующему зажиму надо завести каждую жилу. После этого всё прижимается винтом. В распаячную коробку прокидывается две жилы, они идут от первого выключателя. Они должны быть соединены с фазной жилой в линии. Подключение должно получиться параллельным.

Наши читатели рекомендуют!

Для экономии на платежах за электроэнергию наши читатели советуют «Экономитель энергии Electricity Saving Box». Ежемесячные платежи станут на 30-50% меньше, чем были до использования экономителя. Он убирает реактивную составляющую из сети, в результате чего снижается нагрузка и, как следствие, ток потребления. Электроприборы потребляют меньше электроэнергии, снижаются затраты на ее оплату.

После этого заводится 2 жилы со второго устройства. Они должны быть подключены к двум фазным проводам от лампочек. В таких ситуациях ноль уже соединён с общим нулём, а сами провода остаются свободными. Но не стоит волноваться, если в данном конкретном случае всё идёт по-другому. Можно наносить маркировку на провода в произвольном порядке. Тогда фазы и ноль владелец выбирает сам.

Как соединить провода между выключателями?

Устройства включения необходимо правильно соединить друг с другом, иначе они не будут правильно работать. Здесь требуется большая аккуратность, не рекомендуется торопиться. Лучше взять провода разных цветов и нанести на них маркировку, тогда никто не запутается.

Сначала берём первую клавишу устройства для включения №1. Это нужно сделать так, чтобы второе устройство тоже было включено при работающем первом. Таким образом, ток должен проходить через контур непрерывно. Клавиши 2 от первого и второго выключателя подключаются так же.

Клавишные контакты не должны соединяться между собой. Соединение делаем только в распаячной коробке, когда электричество отключено.

Лучше не выполнять за раз больше одного соединения. Иначе можно запутаться, использовать провода не в том порядке, в каком нужно.

Двойные выключатели с розетками

Проводка без заземления

На этом этапе необходимо прокладывать пятижильный кабель от РК до розетки и самого выключателя. Возможно использование двух кабелей, с тремя и двумя жилами. Фаза на выключатель и розетку подводится по одному из проводов, на другом проводе необходимо ставить ноль к розетке. Фаза, пришедшая через двухклавишный проходной выключатель на источники света, идёт по остальным жилам. Двойные провода с жилами должны идти от распределительной коробки и до источников света.

Как выполняется проводка с заземлением?

Снова нам не обойтись без шестижильного кабеля, он должен идти от РК до розетки, самого выключателя. Фаза на выключатель и розетку идёт по одному проводу кабеля. Ноль и земля идут на розетку. Остаётся только фаза, пришедшая на источники света через выключатель, её надо проводить по остальным жилам. Провода с жилами от трёх и больше проходят на источники света от распределительной коробки.

Советы для тех, кто собирается купить переключатель

Приборы надо выбирать по потребностям каждого конкретного покупателя. Контактных зон обычно бывает несколько, от 1 до трёх и больше. Благодаря чему современные приборы позволяют контролировать сразу несколько источников света. На рынке таких моделей представлено уже достаточно много.

Благодаря таким выключателям можно экономить электроэнергию. В обычных устройствах для подводимого провода имеются две специальные контактные клеммы.

Не стоит увлекаться дорогими устройствами, цена – их единственное отличие от более дешёвых вариантов, характеристики остаётся примерно одинаковыми, как и места монтажа.

О чём необходимо знать перед тем, как совершить покупку?

1. Сила напряжения сети питания квартиры.
2. В каких местах и как расположены светильники? Могут быть последовательными или параллельными.
3. Сколько источников света используется на объекте? Обычно их от трёх и больше.

Не имеет значения, в каких именно местах расположены устройства. Схема управления всегда остаётся одинаковой. А вот у обычных устройств места всегда фиксированные, в этом главное преимущество именно устройств проходного типа. Лучше выбирать корпуса с максимальной защитой от влаги, они обозначаются как IP44. Винты или зажимы идут в комплекте, отдельно ничего покупать практически не нужно. Допустимо использование гибких проводников как с многопроволочной, так и однопроволочной конструкцией. Есть модели со световой индикацией, это очень удобная дополнительная возможность.

Источники:

Комфорт проживания складывается из многих составляющих, среди которых важное место занимает управление системой освещения. Его можно сделать более удобным, установив двухклавишные электроприборы.

Чтобы подключить двойной выключатель на две лампочки, следует выбрать схему и правильно соединить провода сначала в распределительной коробке, а затем в осветительных приборах и выключателе.

Плюсы и минусы двойного подключения

Опытный электрик любой проект по улучшению осветительной системы начинает с оптимизации использования всех электроустройств, объединенных в одну цепочку.

Примером оптимизированного контура является традиционная организация освещения блока «туалет + ванная комната». Со стороны коридора обычно устанавливают один выключатель, но с двумя клавишами.

Таким образом, светильником в ванной управляют одной клавишей, а лампочкой в туалете – второй. Одним движением руки можно совершить сразу два действия, погасив свет в одной комнате и включив освещение в соседней, что очень удобно.

Если выключатель установить в простенке между двумя частями санузла, то выбрать клавишу не составит труда – она будет находиться со стороны нужного помещения

Установка общего выключателя на две комнаты целесообразна в том случае, если они находятся рядом. Для удаленных друг от друга помещений разумно использовать отдельные электроустановки.

Двойной выключатель может потребоваться и при монтаже люстры или бра с двумя лампочками. Раздельное управление расширяет функциональные возможности осветительного прибора и позволяет увеличивать или уменьшать интенсивность горения.

Если задействовать одну клавишу, то освещение будет неполноценным, при нажатии обеих клавиш оно становится в два раза ярче.

С целью экономии электроэнергии необязательно эксплуатировать обе лампочки одновременно. Для создания атмосферы отдыха достаточно включить только одну из них

Как видите, возможность подключения двойного выключателя на две отдельные лампочки облегчает управление осветительными приборами или регулировку интенсивностью света. При установке единого прибора на две комнаты экономится не только электричество, но сокращается количество монтажных материалов и устройств.

Как выбрать схему на две лампочки

Существуют различия в подключении 1-клавишного и 2-клавишного выключателей. Чтобы лучше понять разницу, сначала рассмотрим монтажные нюансы одноклавишника.

К обычному выключателю с единственной клавишей можно подключить одну или несколько лампочек – принцип останется одинаковым.

На схеме показан вариант с применением двухжильного кабеля, без использования «земли». Нулевую жилу протягивают напрямую к осветительному прибору, а фазу подводят к выключателю, откуда она следует к лампочкам

Это самая простая схема, ее традиционно используют, если необходимо простое управление светильником или целой группой. При включении электроустановки загораются все задействованные источники света. Если люстра или бра с двумя лампами, то включатся обе сразу, по одной их использовать возможности не представится.

А сейчас рассмотрим, что меняется, если одноклавишный прибор заменить двухклавишным. Первая схема для подключения двойного выключателя на две отдельные лампочки актуальна для системы TN-C, которая до сих пор встречается в старых домах. Для осветительного контура используют двухжильные провода.

Ноль через распредкоробку отправляется прямо к лампам, подключенным последовательно, а фаза уходит на входную клемму выключателя. Но выход уже двойной: с каждой из выходных клемм уходит фазная жила к отдельной лампе

Получается, что одновременно можно задействовать либо одну, либо обе лампочки, воспользовавшись или одной, или двумя клавишами.

Положительный момент – возможность менять интенсивность освещения в одной комнате. Если светильники находятся в разных помещениях, соответственно, можно включать свет в каждой комнате по отдельности или сразу в обеих.

В новых домах применяют отличающиеся по устройству системы заземления, например, TN-S. Отличие второй схемы для домашней электросети в том, что требуется трехжильный провод: третья жила и есть «земля».

Как и нулевая жила, заземляющая отправляется в распредкоробку, а затем соединяется с проводами ламп и подключается к металлическим деталям

Заземляющий провод подсоединяют по-другому, если в одном блоке с выключателем находится розетка. Тогда «земля» от электрощитка тянется к распредкоробке, а оттуда – к розетке.

Поэтапная инструкция по монтажу

Условно подключение коммутационного устройства можно разделить на несколько этапов. Начинают с кабелей: если проводка старая, то она обязательно требует замены. Затем необходимо правильно соединить провода в распределительной коробке, а напоследок — в механизме выключателя. Для монтажа люстры или светильника обычно используют инструкцию, предложенную производителем.

Этап #1 – подготовка стен

Этап штробления стен рекомендуется пропускать только в том случае, если уже проложена новая проводка с медными жилами подходящего сечения. Когда возникают сомнения, лучше проконсультироваться с электриком.

Для осветительной группы подходит обычный провод ВВГнг с сечением 1,5 мм². Если вместе с освещением подключаются розетки, то лучше сразу брать тот же провод, но 2,5 мм².

В подготовку стен входит штробление, обустройство мест монтажа подрозетников и распредкоробок. На этом же этапе можно установить дополнительный автоматический выключатель в электрощиток.

Отдельное защитное устройство пригодится, когда линия освещения потребует ремонта – можно отключить только один контур, остальные будут работать в обычном режиме.

Штробы выбивают перфоратором, циркуляркой и даже вручную, однако для вырезания ровных канавок используют специальный инструмент – штроборез, оснащенный пылесосом

Система освещения деревянного дома отличается типом проводки. Скрытый способ не применяют, так как он является крайне пожароопасным и требует максимальной изоляции кабелей.

Провода монтируются с наружной стороны, на специальные изоляторы. Вместо внутренних выключателей устанавливают накладные, но принцип подключения жил к клеммам не меняется.

По окончании штробления бетонных, кирпичных, газобетонных стен канавки, в которые укладывают провода, заделывают строительной смесью или алебастром. Затем можно штукатурить и проводить декоративную отделку стен, но месторасположение проводов лучше сохранить на чертеже или схеме – до следующего ремонта.

Этап #2 – подключение в распредкоробке

Распределительная коробка – это камера, где происходит разводка и соединение жил. При установке выключателей или розеток различного типа схема подключения меняется.

Но сначала нужно правильно выбрать коробку. Раньше использовались металлические изделия, сейчас выпускают более безопасные и удобные в монтаже пластиковые аналоги.

Существуют внутренние и внешние модели, но работать легче и оперативнее всегда с внешними. Если потребуется срочное расключение проводов по причине замены электроустановки, то для доступа к встроенной распредкоробке придется демонтировать штукатурку, а затем производить ремонт.

Корпус внешней модели всегда на виду: достаточно открутить крышку и произвести необходимые действия.

Схема соединения жил проста: нулевой провод от щитка скручивается с нулями двух подключаемых ламп, а фаза отправляется к выключателю. Две выходные фазы из выключателя идут к лампам – по одной на каждую

Если провод трехжильный – а сейчас чаще всего применяют именно его – то в распредкоробке, аналогично нулевой жиле, происходит скрутка «земли». А если проводка старая, но надежная, то смысла менять ее нет, и нужно использовать подключение, указанное на схематическом изображении.

Существует несколько способов соединения проводов. Самые распространенные – скрутка с последующей изоляцией и соединение клеммниками.

Пайку применяют крайне редко. Если вы привыкли пользоваться клеммниками, то можно рассмотреть вариант распредкоробки с уже предустановленными клеммами.

 Этап #3 – монтаж светильников

Как производится установка люстры с двумя лампами или двух раздельных светильников, зависит от многих факторов:

• модели осветительного прибора;
• готовности проводки;
• основы для монтажа.

Проще всего менять осветительное оборудование, когда провод выведен в месте установки, например, в центре комнаты.

Чтобы установить люстру, необходимо совершить две операции: подвесить осветительный прибор на крючок или кронштейн и правильно соединить провода

Если потолок новый и представляет собой подвесную конструкцию (натяжной, пластиковый или гипсокартонный), то для монтажа люстры следует установить дополнительный крепеж или закладные.

Когда от двухклавишника к светильнику подаются два фазных провода, их подключают поочередно – каждый к своей лампе. Также из распредкоробки протянуты две нулевых жилы – их тоже раскидывают по разным лампам.

Если обе лампочки присоединить к одному и тому же проводу, то они будут включаться/выключаться одновременно, и смысла устанавливать двойной выключатель нет.

При установке двух раздельных ламп в разных комнатах принцип подключения остается прежним, меняется только протяжка проводов от распредкоробки – они направляются в разные стороны. Как правило, комнаты находятся по соседству. Распредкоробку лучше монтировать над выключателем, примерно в 15-20 см от потолка.

Этап #4 – установка выключателя

Ни в монтаже, ни в подключении двухклавишника никаких сложностей нет. Его устанавливают в подрозетник или прямо в стену, зафиксировав лапками или винтовым соединением. Как именно присоединяются провода, показано на фото.

Двойной выключатель всегда подключается только к фазной жиле, идущей от распредкоробки, куда он попадает от электрощитка. Жилу вставляют в клемму, обозначенную «фаза L». От выходящих контактов L1 и L2 фазные жилы идут к лампам

Если в люстре не две, а более ламп, что встречается гораздо чаще, то подключение выполняется по группам. Все лампы делят на две равнозначные или неравнозначные группы, и тогда провод с контакта L1 направляется к одной, а провод с контакта L2 – ко второй.

Условное деление на группы производится в зависимости от желаемой степени освещенности комнаты. Если нужны два режима интенсивности, слабый и яркий, то можно к одной лампе подвести первую жилу, а к остальным вторую. Чтобы достичь максимального уровня яркости, достаточно нажать обе клавиши.

Общие рекомендации и полезные советы

Существует несколько важных моментов, о которых забывать нельзя. Они касаются как монтажных работ, так и выбора оборудования.

Выполнение простых правил сделает систему более безопасной и надежной, что актуально для сети закрытого типа.

Галерея изображений

Фото из

Все работы по подключению электрооборудования в распределительном щите проводят квалифицированные электрики, обслуживающие дом. Самостоятельно вмешиваться в систему безопасности, расположенную на площадке, не рекомендуется

Для наружного типа проводки используют специальные материалы: кабель в прочной изоляции, керамические ролики, на которые он монтируется, и накладной выключатель. Более эстетично смотрятся изделия из одной коллекции

Если нет возможности арендовать штроборез, то канавки можно вырезать и циркуляркой, но это сложное и трудоемкое занятие. Чтобы штробы были ровными, рекомендуется предварительно сделать точную разметку на стенах

Для аккуратной установки выключателей используют подрозетники, как и для розеток. Это полимерные коробки из негорючего материала, которые необходимо закрепить в стенном отверстии. Установка выполняется на крепления, зазоры замазывают алебастром

Чтобы обеспечить собственную безопасность, во время электромонтажа необходимо использовать отвертки и плоскогубцы с изоляцией, а также специальные перчатки и приборы для измерения напряжения в электроустановках – тестеры и индикаторы

Чтобы выполнить скрутку или вставить провода в клеммы, концы жил необходимо освободить от изоляционной оплетки – зачистить. Для этого используют острый канцелярский или строительный нож, а также специальные клещи – стриппер

Традиционно для обозначения нагрузки жил используется цветовая маркировка: фаза – красный, коричневый, черный; ноль – синий или сине-белый; земля – зеленый или желто-зеленый. Однако установленные провода могут быть перепутаны, поэтому необходима перепроверка

Распределительные коробки и подрозетники имеют ограниченное внутреннее пространство, поэтому необходимо отрезать лишние провода. Однако всегда нужно оставлять небольшой запас для последующей замены электрооборудования или переподключения

Монтаж автоматического выключателя в щитке

Монтаж наружной проводки в деревянном доме

Инструмент для вырезания штроб

Оборудование отверстия под выключатель

Инструмент для электромонтажных работ

Как производится зачистка проводов

Цветовая маркировка жил для подключения

Длина проводов в коробках

Не забывайте, что любые действия с электрическими приборами и установками производятся только после отключения электроэнергии на общеквартирном щите. Перед каждой операцией с проводами следует убедиться в том, что контур обесточен.

Если вместо обычного двухклавишника вы захотите установить выключатель бесконтактного типа или прибор с диммером, обязательно изучите схему, так как монтаж таких устройств может отличаться.

Выводы и полезное видео по теме

Как правильно выполнить соединение проводов и установить приборы, лучше всего представить, просмотрев обучающее видео.

Двухклавишник на два светильника:

Нюансы подключения люстры:

Полезные советы по подключению:

Процедуру установки и подключения двойного выключателя можно выполнить без привлечения квалифицированного мастера, однако во время работ следует помнить о правилах безопасности. Перед электромонтажными работами необходимо учесть все факторы и выбрать верную схему.

Схема подключения проходного выключателя. Как подключить проходной выключатель Схема подключения двухклавишного выключателя с 2х мест

Своей статье Я подробно рассказывал, как работают проходные выключатели и как подключить одноклавишный вариант. Сейчас Я подробно расскажу, как подключить 2-х клавишный или двойной проходной выключатель, который позволяет отдельно управлять 2 независимыми линиями включения. Например, 2 светильников или одной люстрой с отдельными включениями ламп.

Как правило, 2 клавишные схемы применяются в комнатах, кабинетах — там где необходимо раздельное включение с разных мест двух линий освещения, а в коридорах, возле лестниц вполне хватает и одно клавишного проходного выключателя.

На клавишах наносятся указатели в виде стрелок , которые указывают на направление её положения для выключения или включения света. Необходимо учитывать, что если свет включен при помощи любого выключателя, то если будите выключать другим, то не имеет значения положении его клавиши- просто перещелкните его. В этом и отличие от обычных выключателей у которых есть два фиксированных положения клавиш: вверх- включено, вниз-выключено.

Проходной двойной выключатель конструктивно состоит из двух одноклавишных проходных , объединенных в одном корпусе. Они также работают по принципу “перекидывания” контактов. У всех них для подключения используется 6 контактов, из которых 2 входных и 4 выходных.

Принципиальная схема подключения проходного двухклавишного выключателя.

Итак давайте рассмотрим как устроен и как подключить 2 клавишный проходной выключатель . Его устройство очень простое: он состоит из двух независимых групп контактов. Контакты 1 и 2 при нажатии клавиш переключаются с верхних двух не взаимосвязанных линий на две нижние, которые идут на второй такой же выключатель.

Как видно на данной схеме на контакт правого выключателя № 2 приходит с распределительной коробки электросети дома или квартиры. Далее контакты 1 и 2 объединяются перемычкой. А с левого 1 и 2 уходят не пересекаясь на два независимых по включению светильника. Четыре перекрестных контакта соединяются соответственно по парам между собой. Внимание будьте внимательны , если перепутаете из разных пар подключите- схема не будет работать.
как и в обычных светильниках, идет к лампам напрямую с .

Для схемы управления из трех и более мест понадобится два двухклавишных выключателя концевого и один (для управления из трех мест) двойной перекрестного вида , который устанавливается в схеме между двумя первыми.

Подключить перекрестный проходной выключатель будет не сложно , но для этого понадобится его объединить 4 электрическими проводами с каждым из концевых. Как правило для этого, в одну распределительную коробку заводится с перекрестного 8 проводов и по 6 с каждого проходного выключателя концевого типа. И конечно, не забываем туда завести кабель электропитания, и два отходящих- для подключения светильников или люстры.

Если необходимо подключить 4 выключателя , значит добавляйте между перекрестным и любым концевым- еще один перекрестного типа.

При подключении двухклавишного перекрестного типа не перепутайте пары и не подключите провода с разных линий в одно включение, иначе схема не будет работать. При монтаже своими руками, что бы исключить ошибки- всегда в голове представляйте, что Вы подключаете 2 независимых одноклавишных проходных выключателей, объединенных в одном корпусе .

Практическая схема подключения проходных двойных выключателей Legrand.

Я всегда с удовольствием ставлю и подключаю выключатели известной немецкой Legrand , которые не только выделяются качеством и долговечной и безупречной работой, а так же их легко установить и подключить с помощью пружинных контактов.

Давайте рассмотрим, как подключаются 2 клавишные проходные выключатели этого производителя, используя схему из комплекта.

На расположенный слева приходит фаза на его нижний левый контакт, далее второй и третий снизу объединены проводами со 2 и 3 нижними правого выключателя, у которого с первого уходит уже коммутируемая фаза на первую линию включения светильников.

Верхние первые два контакта объединены у обоих выключателей электрическими проводами соответственно. А с третьего контакта левого уходит фаза на вторую линию включения светильников. А у правого на третий контакт приходит фаза с ответвительной коробки электропроводки дома. Но чаще достаточно одного фазного провода, который соответственно объединяется перемычкой со вторым входом для фазы.

В принципе, как видите проходной выключатель будет под силу самостоятельно подключить практически любому человеку. Только обязательно соблюдайте . А если не будет правильно работать схема, тогда проверьте правильность всех подключений по схеме.

Похожие материалы:

Популярная и достаточно простая схема подключения проходного выключателя с 2х мест позволяет существенно повысить удобство эксплуатации системы освещения.

Как правило, именно единая осветительная конструкция, управляемая одним электрическим выключателем, является максимально эффективной в условиях частного домовладения.

Чаще всего схема управления системой освещения с задействованным выключателем проходного типа используется в длинных коридорах, проходных комнатах, а также на лестничных маршах.

В таких помещениях выключатель, как правило, монтируется рядом с дверью, но также могут выполняться другие способы установки устройства включения/выключения.

Посредством выключателя проходного типа осуществляется управление одиночным осветительным прибором или целой группой светильников.

В каждом конкретном случае подбирается оптимальный вариант устройства, который может быть представлен не только одноклавишным и двухклавишным, но также трехклавишным устройством.

Основной целью применения проходных выключателей является возможность обеспечить удобное управление системой освещения при снижении общих затрат на оплату расходуемой электрической энергии.

Принцип работы

Проходные выключатели своим внешним видом не имеют отличий от стандартных устройств для включения и выключения, а разница заключается в конструктивных особенностях контактной группы, скрытой под корпусом.

Простые выключатели способствуют замыканию и размыканию электрической цепи с применением одного провода. Принцип работы устройств проходного типа представлен размыканием одной и одновременным замыканием другой цепи в результате изменения положения клавиши.

Принципиальная схема работы проходного выключателя

Процесс перекидывания контактов в проходном выключателе способствует размыканию одного участка осветительной цепи и замыкания другого участка.

Следует отметить, что выключатели такого типа устанавливаются исключительно попарно с другими устройствами. С практической точки зрения вполне допускается подключение в схему выключателя проходного типа таким образом, чтобы устройство срабатывало как простое, но в этом случае будет полностью потерян смысл использования всех конструктивных элементов.

В плане технического решения такой вид элемента в системе освещения правильнее было бы обозначить не проходным выключателем, а классическим переключателем.

Схема подключения проходного выключателя с двух мест

Такой вариант подключения очень удобен для установки на лестницах в двухэтажных зданиях и в проходных комнатах. Схема стандартного подключения предполагает завод кабелей «земля» и «ноль» непосредственно на осветительный прибор.

Проходной выключатель – схема подключения на 2 точки

Фаза, в этом случае, должна подаваться на выход из первого переключающего устройства, а вход со второго выключателя потребуется завести на провод осветительного прибора, после чего выходы соединяются.

При соблюдении схемы подключения, нажатие на клавишу вызывает разрыв цепи, а изменение положения сопровождается замыканием, в результате чего подключенный осветительный прибор включается.

Схема подключения на две лампочки

Самостоятельная коммутация осветительных приборов из разных точек основана на сборке схемы с применением устройств, представленных:

• проходным переключателем;
• перекрестным переключателем;
• двухклавишным переключателем проходного типа;
• двухклавишным переключателем перекрёстного типа.

Схема подключения двухклавишного выключателя на две лампочки

Применение одного проходного переключателя позволяет осуществлять переключение света между парой ламп, а также включать и выключать всего один источник освещения.

Выключили лампочку, но она начала моргать? , разберем подробно в статье и найдем метод решения проблемы.

Схему подключения дросселя для ламп дневного света вы найдете .

В вашем доме часто перегорают лампочки? Наверняка, в проводке имеются проблемы. О причинах частого выхода ламп из строя читайте .

Подключение одноклавишного выключателя

Монтажные работы при использовании одноклавишных выключателей начинаются с разметки под установку распределительного короба. Коробку нужно монтировать под потолком, на одинаковом расстоянии от выключателей. От щитка к коробу проводится «ноль» и «фаза», после чего от распределителя до места установки выключателя прокладывается штроба под укладку трёхжильного кабеля. Перфоратором и специальной насадкой в стене проделывается углубление для установки подрозетника, который фиксируется гипсовой шпаклёвкой.

Подключение двух одноклавишных переключателей

Внутрь подрозетника заводится кабель, одна из жил которого подключается к фазе и входу на арматурный электрический элемент, а пара других – на выход выключателя, и в коробку-распределитель, где выполняется соединение с выходами на втором выключателе.

На заключительном этапе подключения входной провод от второго выключателя заводится на элементы осветительного прибора. В результате такого монтажа, включение светильника обеспечивается одновременным подключением в единый контур пары выключателей.

Подключение одноклавишного выключателя позволяет задействовать все электротехнические приборы для включения освещения и его отключения.

Подключение двухклавишного выключателя

Самостоятельное выполнение установки двухклавишного выключателя отличается от монтажа одноклавишной конструкции только количеством кабельных жил, подводимых к устройству, а также количеством клавиш. Процесс подключения двухклавишных проходных элементов требует заведения пяти отдельных кабельных жил на первую конструкцию, и шести жил кабеля – на второе устройство.

На первый выключатель запитывается фаза. Подключение фазного провода осуществляется к паре клемм или одному контакту на вход. Группа на выход, как правило, представлена четырьмя клеммами, поэтому подключение выполняется по типу «кабельная жила – провод».

Схема подключения двухклавишного выключателя

Все подключаемые жилы должны подводиться к распределительной коробке, где выполняется подсоединение к четырём клеммам на входе второй конструкции.

В процессе подключения необходимо правильно распределить все пары электрических проводов. Очень важно пару кабельных жил от первого выключателя подсоединить к двум жилам второго арматурного элемента, используемого для включения осветительного прибора.

Пара выходов на втором подключаемом выключателе последовательно подсоединяется на отдельный осветительный прибор, и именно эти электрические провода отвечают за питание «фазы».

Выполнение монтажных работ

С целью самостоятельного выполнения монтажа необходимо подготовить основные рабочие инструменты, представленные:

• перфоратором с установленной стандартной коронкой, посредством которой высверливаются посадочные места для выключателей, а также выполняется штробление для укладки электрических проводов;
• плоскогубцами и кусачками;
• стандартными бокорезами;
• набором отверток.

Также необходимо приобрести необходимое количество выключателей, электрического кабеля, соединительных элементов, изоляционной ленты и распределительных коробок. Процесс прокладки электрических проводов в штробах заканчивается выполнением штукатурных работ, поэтому следует запастись алебастром или стандартным цементно-песчаным раствором.

Количество жил в электрическом кабеле подбирается в соответствии с используемой схемой для управления системой освещения. Простейшие электрические схемы предполагают использование стандартного трехжильного медного провода.

При использовании более сложной схемы подключения применяются пятижильные электрические провода, которые при необходимости можно заменить парой трёхжильных кабелей. Выбор сечения жил напрямую зависит от показателей нагрузки, но чаще всего используются провода, имеющие 2,5 кв.

Установка проходного выключателя

На первом этапе монтажа осуществляется разметка параллельной потолку и полу трассы для штробления. Все отводы по направлению к полу выполняются строго под углом в 90 о.

При помощи перфоратора высверливаются гнезда под монтаж выключателей, а также осуществляется штробление для прокладки электрических проводов. Внутри установленных соединительных коробок выполняется подключение и последовательное скручивание электрических проводов в соответствии с электрической схемой.

После сборки выполняется предварительное тестирование мультиметром, после чего подаётся напряжение и осуществляется проверка работоспособности осветительной системы. На самом последнем этапе необходимо произвести отделочные работы.

Видео на тему

Для создания максимального комфорта прибор для выключения или включения светильников в доме должен обладать не только функциональностью, но и практичностью. В сравнении с проходными устройствами с одной клавишей, двухклавишные выключатели благодаря своей универсальности более удобны.

Проходная конструкция двухклавишной модели выключателя — это не что иное, как два одинарных устройства объединённых в одном корпусе, которые функционируют по принципу переключателя контактных групп. Обычно такие приборы имеют 2 входных и 4 выходных контакта. При этом на корпусе изделия существует указатель, помогающий разобраться, в каком положении находится устройство — включённом или выключенном.

Основное предназначение проходного выключателя

Проходное устройство для управления освещением в доме по своему принципу полностью повторяет обычный стационарный аналог и поэтому выпускается с одной, двумя или тремя независимыми клавишами. Трудно не согласиться, что обычная конструкция выключателя установленного в начале лестничного пролёта или длинного коридора и пульт управления, размещённый в другом конце помещения очень удобны для решения вопроса освещения конкретно взятого участка дома.

Выбор проходной конструкции выключателя в первую очередь основывается на количестве клавиш прибора, так как это позволяет управлять сразу несколькими источниками света, подключёнными к такому устройству. В свою очередь, возможность дистанционной системы управления или сенсорный датчик — это дополнительные элементы, улучшающие комфортность в управлении светом в доме.

Многоклавишные выключатели проходного типа лучше устанавливать в больших помещениях, в которых присутствует несколько входов и разных источников света, которые нужно включать одновременно. В других ситуациях целесообразно устанавливать проходные приборы с одной клавишей , которые более удобны в использовании и имеют простейшую схему подключения.

Разновидности выключателей проходного типа

На рынке электротехники и сопутствующей ей аксессуаров существует множество моделей проходных выключателей и переключателей от зарубежных и отечественных производителей как простейших одноклавишных, так и многофункциональных моделей. Самыми популярными считаются двухклавишные устройства , которые могут управлять сразу несколькими осветительными приборами, находящимися в разных помещениях или в одном светильнике. Не такие популярные, но не менее эффективные выключатели с тремя клавишами, хотя схема их подключения намного сложнее.

Благодаря проходному принципу работы выключателя появляется возможность организовать управление одним светильником с разных точек дома или квартиры. Но для её воплощения потребуется несколько одноклавишных приборов и перекрёстный переключатель. А при использовании нескольких перекрёстных приборов можно добиться управления светильником сразу из четырёх точек в квартире.

Хочется отметить, что каждая дополнительная точка управления источником света значительно усложняет схему подключения выключателей проходного типа, что может привести к затруднению обслуживания и ремонта осветительных приборов в доме. Хитросплетение проводов может ввести в заблуждение даже опытного электрика.

Особенности схемы подключения проходных выключателей с двух мест

При правильной сборке схемы подключения двойных выключателей появляется возможность управления несколькими осветительными группами из двух мест независимо друг относительно друга. При этом оба выключателя с двумя клавишами проходного типа будут функционировать по двум направлениям , но для этого нужно выполнить следующие работы.

1. Двухклавишные выключатели в количестве двух штук устанавливаются на заранее выбранных местах в подрозетниках.
2. Монтируются светильники или многоламповые источники света, такие как люстра. К осветительным приборам подключают трёхжильный кабель с фазой, рабочим нулём и заземлением.
3. Учитывая то, что на каждом переключателе по 3 контакта, то понадобится два трёхжильных кабеля соответствующей длины.
4. Соединение проводов происходит в распределительном коробе согласно схеме.

Воплощение такой схемы, возможно, и с четырьмя одноклавишными проходными выключателями, но это не рационально в плане расхода дополнительных кабелей и коробок распределения.

При необходимости двойной проходной выключатель можно использовать в качестве перекрёстного аналога с одной клавишей. Для этого перемыкают соответствующие контакты, а клавиши соединяют друг с другом для одновременного срабатывания.

Двухклавишные переключатели проходного типа, как и аналоги с одной клавишей могут работать как перекрёстные приборы. Принцип переключения контактных групп имеет аналогичную схему с управлением светильником с двух мест. То есть, как и в предыдущем случае подключать нужно два двойных прибора и перекрёстный аналог в соответствии с определёнными этапами.

1. Первым шагом будет установка выключателей в подрозетниках, закреплённых в стене. Эта схема подразумевает подключение 12 проводов в распределительной коробке.
2. На следующем этапе выполняется установка двух отдельных источников света и прокладки к ним кабеля с задействованным нулём.
3. Кабель обрезается по необходимой длине, при этом используют трёхжильный провод. К концевым выключателям подводится 6 жил, а двухклавишный проходной перекрёстный переключатель имеет 8 контактов.
4. Фаза подводится к первому выключателю с двумя клавишами проходного типа, а дальше следуя схеме к остальным приборам.
5. Подключение второго конечного выключателя проходного типа будет происходить непосредственно от осветительного прибора.
6. Очень важно при прокладке схем повышенной сложности правильно промаркировать все кабеля и отдельные жилы. Чтобы не ошибиться в хитросплетении проводов, нужно выполнять пошаговую маркировку начиная с первого провода и продолжая от контакта к контакту. Нужно маркировать даже на первый взгляд простые в подключении кабели.
7. Как стало известно из практики, монтаж такой схемы требует использования увеличенной коробки или спаренного её аналога. Это в первую очередь обусловлено тем, что в стандартном распределительном коробе попросту не хватит места для качественного соединения проводов или же из-за большого количества соединительных колодок не удастся закрыть крышку.

Также любые двухклавишные выключатели проходного типа можно использовать как обычные аналоги. С этой целью одну контактную группу либо, вообще, не используют, либо через неё подключают ещё один отдельно взятый осветительный прибор. Ознакомившись с вышеприведёнными способами управления светильниками с разных мест можно разобраться, что такое схема подключения или как говорят электрики, схема расключения проходного выключателя.

Как подключить проходной выключатель на две группы светильников

Прежде чем переходить к монтажным работам, нужно разобраться с особенностями конструкции двухклавишного проходного выключателя. Как упоминалось ранее конструктивно это два прибора с одной клавишей собранные в одном корпусе. Разобравшись с этой особенностью, каждый желающий сможет понять принцип его работы и способы подключения, которое выполняются по аналогии с обычным выключателем с одной клавишей, за исключением пары нюансов:

• На первую часть выключателя, а, точнее, на обе одинаковые его половинки подаётся электрическая энергия по одному проводу. На втором приборе, с которого будет осуществляться подсоединение источника света каждая из выходящих фаз будет питать свой светильник.
• В случае с конструкцией одинарного проходного прибора выполняется прокладка трёхжильного кабеля к каждому устройству. Если же это двухклавишный аналог, то протягивают пять проводников к первому и на один больше ко второму прибору. Разница в количестве проводников обусловлена в общем фазном проводе.

Исходя из, выше рассмотренных вариантов подключения проходных выключателей с разным количеством клавиш и возможности использования их комбинаций, можно прокладывать самые разные схемы, которые позволяют управлять осветительными приборами из различных мест дома. Хотя исходя из практики, в быту редко встречается необходимость управления светильниками более чем из трёх разных точек в квартире.

Правильно собранная схема подключения двойного выключателя позволяет управлять двумя разными группами освещения из двух мест независимо друг от друга. Два двухклавишных проходных выключателя будут работать на два направления.

Инструкция по монтажу:

1. Два двухклавишных выключателя монтируются на выбранных местах в установочных коробках (подрозетниках).
2. Размещаются все группы, подключаемого освещения: светильники, бра или люстра с несколькими точками света. К каждому источнику света должен подходить один трехжильный кабель: фаза (L), защитный (земля), рабочий ноль (N).
3. Выбирается кабель необходимой длины (3х1.5 мм2), с учетом того, что к выключателям подходят 6 контактов — два трехжильных кабеля.
4. В распределительной коробке (РК) согласно схеме соединяются провода.
5. Выполнить монтаж такой схемы можно и с использованием четырех одинарных проходных выключателей, но замена будет не рациональной. Установка двойных проходных выключателей выгодней, так как происходит экономия кабеля и распределительных коробок.

Из двойного проходного выключателя можно сделать одинарный перекрестный выключатель. Для этого контакты соединяются между собой, а клавиши закрепляются вместе для совместной одновременной работы.

значительно проще и может помочь организовать управление электроосвещением из двух точек.

О том как правильно выбрать и смонтировать систему вентиляции для загородного дома можно узнать перейдя по этой .

Так же любой проходной выключатель можно использовать как обычный. В этом случае один из контактов либо не подключается вообще, либо так же подключается для еще одной независимой регулировки имеющейся линии освещения. Теперь вы знаете как правильно подключить, или как говорят электрики расключить, двухклавишный проходной выключатель.

Исходя из элементарной экономии начинаешь задумываться, как не жечь свет круглыми сутками. Освещение в разных комнатах особенно на разных этажах. Свой ли дом или многоквартирный проблема у всех одна. В недалеком прошлом свет горел везде не выключаясь. Как же сделать подключение, которое позволит решить эту проблему. И выход есть. Чтобы свет не горел постоянно, существует возможность контроля из разных мест.

Включать и выключать светильники возможно из разных мест. И возможность такая есть благодаря проходным выключателям. Они могут называться «дублирующие» или «перекидные». Но это все один тип оборудования. От обычных они отличаются большим количеством контактов. По этому и подключение этих выключателей более сложное. И так разбираемся с проходным выключателем.

• Как работает проходной выключатель
• Схема подключения выключателя с двух мест
• Схема на три точки
• Двух клавишный выключатель: схема подключения

Если говорить о видимом отличии, то это единственное: едва заметная стрелочка на клавише вверх и вниз.

Выглядит проходной одно клавишный выключатель, есть двойные стрелочки

Схема проходной выключатель, не так уж сложна: в простых выключателях только два контакта, в проходных (еще дублирующими) три контакта, два из которых — общие. В схеме подключения присутствуют всегда два или больше таких выключателя, при помощи общих проводов они и собираются.

Выключатель проходной: отличие в количестве контактов

Простой принцип, изменяя положения клавиши вход переключается к одному из выходов. У проходных выключателей только два рабочих положения:

• вход на выход 1;
• вход на выход 2.

Других положений просто нет. Вследствии чего это все и работает. Поскольку контакт переключается из одного положения в другое, правильнее называть их «переключатели». По этому проходной переключатель — это то же самое устройство.

Даже если стрелочки на клавишах не наблюдаются, разбираем контактную часть. На стандартных изделиях указывается схема подключения, позволяющая понять, оборудование какого типа у вас в руках. У всех более-менее уважающих себя производителях эта схема есть. На многих китайских эта схема отсутствует.

Перекидной выключатель с тыла

Если схемы нет, посмотрев на контакты (медные зажимы в отверстиях): вы обнаружите три контакта. Очень часто отдельный контакт, особенно у недорогих производителей, является входом. Часто они перепутаны. Для определения общего контакта, нужно просто прозвонить при разных положениях клавиши. Необходимо это сделать в любом случае, иначе возможно не будет работать, а сам выключатель может и сгореть.

С помощью тестера или мультиметра определяем какой из этих трех — общий.

Посмотрев это видео вы поймете как найти вход (общий контакт) для проходного выключателя.

Такое подключение понадобится на лестнице двухэтажного дома или в длинном коридоре. Также можно применять даже в спальне — выключать верхний свет у входа и возле кровати (вспомните сколько раз вы с этим мучились)

Выключатель проходной это система подключения, когда ноль и земля (если есть) подаются сразу на светильник. Фаза подключается на выход первого выключателя, вход второго подключается на свободный провод светильника, выходы двух выключателей соединяются между собой.

Посмотрев на схему, сразу понятно, как работает проходной выключатель. Светильник на рисунке во включенном положении. При нажатии на клавишу любого из устройств, цепь разрывается. Также, при выключенном положении, нажав на клавишу, мы замкнем цепь через одну из перемычек и лампа загорится. проходной выключатель схема подключения

Для наглядности, приведем несколько примеров.

Выключатель схема

Говоря о помещении, то разводку нужно сделать начиная от электро-щита с автоматами и и продолжая, как показано на фото ниже. По правилам они должны находится на расстоянии 15 см от потолка. Укладка их возможна как в гофре, так и короба, заводятся провода в монтажные коробки. Для удобства возможной замены провода. По последним нормативам все соединения производятся только при помощи контакторов в монтажных коробках. При использовании скрутки их нужно пропаять и хорошо заизолировать.

Возвратный провод лампы подсоединяем ко выходу второго выключателя. Белым обозначены провода, соединяющие между собой выходы обоих устройств.

Разводка провода по помещению

Как все соединить в клеммной коробке рассказано в видео.

на 3 точки

Для регулировки выключателем из трех мест, к двум выключателям добавляем перекрестный (крестовой) переключатель. От ранее описанных отличается он наличием двух входов и двух выходов. Переключает он сразу пару контактов. Схему подключения, смотрите на рисунке. Если разобрались с тем, что было выше, понять эту не составит труда. проходной выключатель схема подключения

1. Ноль (и заземление, если есть) заводится сразу на лампу.
2. Фаза подключается ко входу одного из проходных выключателей (с тремя входами).
3. Вход второго подается на свободный провод лампы.
4. Два выхода одного трех контактного устройства заводятся на вход перекрестного переключателя (с четырьмя входами).
5. Два выхода второго трех контактного устройства заводятся на вторую пару контактов переключателя с четырьмя входами.

Та же схема, но уже в другом ракурсе — куда подключать провода на корпусах.

Куда подключать провода

А вот примерно так разводить по помещению.

Если необходима схема на четыре, пять и боле точек, то отличие только в количестве перекрестных переключателей (на четыре входа/выхода). Выключателей (с тремя входами/выходами) всегда два — в начале и в конце цепи. Все остальные — перекрестные переключатели.

Подключения проходных выключателей на 5 точек

Если убрать один «перекрестник», получается схема управления из четырех точек. Добавите еще — будет уже схема на 6 точек управления. проходной выключатель схема подключения

Посмотрите еще это видео.

Схема подключение проходного выключателя двух клавишного

Для управления с нескольких мест двумя или более лампами (или группой ламп) необходимо использовать двух клавишные проходные выключатели. У двух клавишного выключателя шесть контактов. Найти общие провода можно по тому же принципу, как и в обычном устройстве этого типа, увеличится только количество проводов.

Схема включения 2-х клавишного проходного выключателя отличается большим количеством проводов: фаза подается на оба входа первого выключателя, так же как и с двух входов второго должна уходить на две лампы (или две группы ламп, если речь идет о многорожковой люстре).

Принцип подключения двухклавишных проходных выключателей

Для организации управление двумя или более источниками света из трех и более точек, придется в каждой точке ставить по два перекрестных переключателя: двухклавишных их просто нет. В этом случае одна пара контактов заводится на один перекрестник, вторая — на другой. А в дальнейшем они между собой соединяются. На двухклавишный переходной выключатель, который последний в цепи — подключают выходы обоих перекрестников.

Информация на заметку : ,

Как подключить двухклавишный проходной выключатель

В современных квартирах не очень часто, но все же используются схемы подключения двухклавишного проходного выключателя, который устанавливается в больших холлах или коридорах, а также, контролирует включение света в 2-х помещениях сразу, в зависимости от необходимости. В данной статье я расскажу о том, как самостоятельно подключить такой выключатель, сделать это быстро и просто.

1

Когда применяются двухклавишные проходные выключатели

Самый простой пример – большой холл, когда нужно включить свет в одном его конце, а пройдя, выключить его. При этом, холл используется не только для прохода, но и для приема людей (например, это прихожая). Итак, начиная монтаж выключателя, я определяю, как и где буду его использовать, затем выбираю распаячную коробку, в которой буду производить все соединения.

Хочу также сказать, что подключение двухклавишного проходного выключателя чем-то похоже на подключение одноклавишного, только контуров в цепи не один, а два. Принцип его работы, при этом, остается тем же самым. Чтобы понять принцип действия проходного выключателя, советую почитать о том, как подключить проходной выключатель.

2

Схема включения

одноклавишного, здесь 2 входных и 4 выводных контакта. В результате, вам потребуется в 2 раза больше проводов и их соединений в распаячной коробке. Для выполнения таких соединений и крайне рекомендую купить специальные клемники, чтобы не запутаться в скрутках проводов. Также предлагаю приобрести маркировочную ленту и маркер, чтобы все было понятно.

Схема подключения аналогична однокнопочному проходному выключателю с некоторыми дополнениями. Ее можно рассматривать, как две параллельные схемы включения двух одинарных проходных выключателей, которые запитывают 2 разные цепи освещения. Соответственно, я рекомендую монтировать их последовательно – сначала подключить и промаркировать одну цепь, а затем – вторую. Таким образом, монтаж двухклавишного проходного выключателя сводится к монтажу двух одноклавишных. Это очень важно понять – тогда все работы по монтажу станут действительно простыми.

3

Разводка проводов в коробку

На двухклавишном проходном выключателе 2 входа и 4 выхода. Это значит, что для него потребуется двухжильный провод для подключения к фазной линии и 4-х жильный провод для соединения выключателей между собой. Разводка проводов осуществляется очень просто.

Выключаем электричество и начинаем – каждую жилу заводим в соответствующий зажим и прижимаем винтом. Прокидываем 2 жилы в распаячную коробку от первого выключателя и соединяем их с фазной жилой линии. Получается параллельное подключение. Теперь заводим 2 жилы со второго выключателя и подключаем их к 2-м фазным проводам от лампочек: обычно они свободны, в то время как ноль уже соединен с общим нулем. Если это не так, ничего страшного. Просто маркируем провода, как хотим, выбирая ноль и фазы самостоятельно. Конечно, лучше придерживаться маркировки проводов. Ноль – синий, фаза – коричневая или красная, земля – желтая или желто-зеленая.

4

Соединение проводов между выключателями

Чтобы выключатели работали, нужно правильно их подключить между собой. Советую не торопиться и делать все максимально аккуратно. Лучше взять провод разных цветов, чтобы не запутаться или заранее промаркировать провода.

Подключаем первую клавишу выключателя 1 так, чтобы при его включенном состоянии выключатель 2 также был включен, то есть по их контуру тек электрический ток. Теперь таким же образом подключаем клавиши 2 от первого и второго выключателя.

МЕЖДУ СОБОЙ КЛАВИШНЫЕ КОНТАКТЫ НИКАК НЕ СОЕДИНЯЮТСЯ! Все соединения выполняются только при отключенном электричестве в распаячной коробке.

Не советую выполнять более одного соединения за раз, так как можно запутаться в проводах и подключать все неправильно. Подключили первую клавишу, затем подключили вторую. Все.  Таким образом, схема подключения двойного проходного выключателя будет полностью запитана.

5

Установка выключателей

В установке выключателей нет ничего сложного. Подробнее о том, как установить выключатель в квартире, вы можете прочитать в соответствующей статье. Конечно, я советую сделать все подготовительные работы, то есть засверлить коробку выключателя в стену и прикрепить ее там до этапа разводки соединений, но если этого сделать не получилось – ничего страшного. Просто следите за тем, чтобы провода под напряжением находились подальше от места проведения работ. Помните! Выключатель обесточивает только линию ПОСЛЕ своего контакта. Основная линия, которая подходит к выключателю – всегда остается под напряжением, пока вы не отключите автомат на щитке.

Теперь установка двухклавишного проходного выключателя заершена. Можно устанавливать декоративные накладки и наслаждаться прекрасным внешним видом и отличной функциональностью созданной проводки.

Автор

Проходной выключатель | Электрик

Обычные электровыключатели, которые установлены у нас дома, готовы включать и отключать освещение из одного места.
Главное различие обычного выключателя, в каком происходит обычное прерывание электронной цепи, от прибора названием проходной выключатель, будет то, что в нём встроено три контакта и переключающий механизм меж ними.

Основным их превосходством считается вероятность подключения либо выключения осветительного прибора (либо группы осветительных приборов) из двух, трёх либо более точек. Нередко в народе их ещё именуют перекидной выключатель. Или проще—дублирующий выключатель. Двухклавишный проходной выключатель имеет внутри 6 контактов, и по собственной системы представляет из себя 2 независящие между собой одноклавишный проходной выключатель. Визуально обыденный выключатель и проходной не различить, но возможно. У проходного есть в наличии особый символ знакна любой из кнопок—в обыкновенном его нету.

Область применения перекидных (дублирующих) выключателей:




1. Лестницы — на них электровыключатели инсталлируются на первом и втором этаже. На одном этаже включили свет, поднялись по лестнице и отключили. В случае если Ваш дом 3-х либо четырех этажный, то Вам предоставляется возможность пользоваться такой схемой.

2. Спальни — один выключатель устанавливается у входа в комнату, а 2-ой и 3-ий по различные стороны постели. Зашли в комнату—включили свет, захотели прилечь на отдых—отключили. Для подключения освещения из трёх мест используется такая схема, с перекрестным выключателем.

3. Коридоры — предположим Вы сначала коридора включили свет, позже прошли по коридору и на  другом конце отключили.

4. На территории личных зданий либо дач—для освещения дорожек. 

Как верно подключить проходные электровыключатели для независящего управления освещением из 2-ух мест.

Давайте подробнее рассмотрим данную схему включения, состоящую из 2-ух проходных выключателей. Для неё понадобятся 2 переключателя (они и еще называются «проходные»), любой из которых имеет по 3 контакта и 2 положения переключения. Причём, режим переключения обязан быть «перекидного характера», другими словами  — один контакт считается общим для 2-ух других. В одном положении он замкнут с одним из них, в другом же положении, конечно, с другим. Как следует, единая замкнутость всех трёх контактов полностью исключена.

Как заметно, один провод (в нашем случае это нулевой) идёт от источника электропитания в соединительную коробку и с неё уже на лампу. Другой (фазный провод), опосля коробки подсоединяется к общему контакту одного из выключателей. Два переключаемых контакта 1-го выключателя соединяются с 2-мя контактами второго выключателя (через коробку). Ну и с совместного контакта второго выключателя фаза подаётся на 2-ой контакт лампы.
Относительно самого монтажа этой схемы: ставятся на собственные установочные места проходные электровыключатели, от которых выводятся трехжильные кабеля. Устанавливаются осветительные приборы, что объединятся параллельно и от которых в конечном итоге выходит двужильный кабель.
Дальше, в более пригодном месте устанавливается соединительная коробка (с учётом минимальной длины кабеля и комфортного места самого месторасположения данной коробки). В неё значит и вводится кабель от осветительных приборов, питания и самих проходных выключателей. В данной коробке делается соединение проводов между собой, как показано на схеме.

Как управлять освещением из 3-х мест

Схема включения проходного выключателя с управлением из 3-х мест мало чем выделяется от предшествующей (единый механизм работы схож). В ней добавлен ещё один проходной выключатель, который малость различается от прошлых. Как заметно из схемы, это спаренный выключатель. Другими словами, при нажатии одной кнопки, случается одновременное перекидывание 2-ух контактов электрически независящих между собой. Вприбавок, как вы должны были увидеть, с него выходит четырехжильный кабель.
Схемы включения проходных выключателей аналогичного вида неплохи тем, что сравнительно просты в своём конструктивном выполнении (не потребуется добавочных компонентов). Хотя они ограничены численностью этих мест управления.

Задачу независящего управления освещением из 2-ух мест возможно решить и еще используя особые импульсные реле и блоки для дистанционного управления освещением.

Использование контрольно-пропускных пунктов | Документы Microsoft

• 31.07.2019
• 7 минут на чтение

Эта страница полезна?

Оцените свой опыт

да Нет

Любой дополнительный отзыв?

Отзыв будет отправлен в Microsoft: при нажатии кнопки «Отправить» ваш отзыв будет использован для улучшения продуктов и услуг Microsoft.Политика конфиденциальности.

Представлять на рассмотрение

В этой статье

Одно из больших преимуществ виртуализации — возможность легко сохранять состояние виртуальной машины. В Hyper-V это делается с помощью контрольных точек виртуальных машин. Вы можете создать контрольную точку виртуальной машины перед внесением изменений в конфигурацию программного обеспечения, применением обновления программного обеспечения или установкой нового программного обеспечения.Если изменение системы должно было вызвать проблему, виртуальную машину можно вернуть в то состояние, в котором она была, когда была взята контрольная точка.

Windows 10 Hyper-V включает два типа контрольных точек:

• Стандартные контрольные точки : создает моментальный снимок виртуальной машины и состояния памяти виртуальной машины на момент запуска контрольной точки. Моментальный снимок не является полной резервной копией и может вызвать проблемы с согласованностью данных в системах, которые реплицируют данные между различными узлами, такими как Active Directory.До Windows 10. Hyper-V предлагал только стандартные контрольные точки (ранее называвшиеся снимками).

• Рабочие контрольные точки : использует службу теневого копирования тома или замораживание файловой системы на виртуальной машине Linux для создания согласованной с данными резервной копии виртуальной машины. Снимок состояния памяти виртуальной машины не создается.

Рабочие контрольные точки выбраны по умолчанию, однако это можно изменить с помощью диспетчера Hyper-V или PowerShell.

Примечание: Модуль Hyper-V PowerShell имеет несколько псевдонимов, поэтому контрольную точку и моментальный снимок можно использовать как взаимозаменяемые.
В этом документе используется контрольная точка, однако имейте в виду, что вы можете видеть аналогичные команды, использующие термин моментальный снимок.

Изменение типа КПП

Использование диспетчера Hyper-V

1. Откройте диспетчер Hyper-V.
2. Щелкните правой кнопкой мыши виртуальную машину и выберите настройки .
3. В разделе «Управление» выберите Контрольные точки .
4. Выберите желаемый тип контрольной точки.

Использование PowerShell

Следующие команды можно запустить, чтобы изменить контрольную точку с помощью PowerShell.

Установить на стандартную контрольную точку:

  Set-VM -Name  -CheckpointType Standard
  

Установите на производственную контрольную точку, если производственная контрольная точка не работает, создается стандартная контрольная точка:

  Set-VM -Name  -CheckpointType Production
  

Установите на производственную контрольную точку, если производственная контрольная точка не работает, стандартная контрольная точка не создается.

  Set-VM -Name  -CheckpointType ProductionOnly
  

Создание контрольных точек

Создает контрольную точку типа, настроенного для виртуальной машины. См. Раздел «Настройка типа контрольной точки» ранее в этом документе для получения инструкций по изменению этого типа.

Использование диспетчера Hyper-V

Для создания КПП:

1. В диспетчере Hyper-V выберите виртуальную машину.
2. Щелкните правой кнопкой мыши имя виртуальной машины и выберите Контрольная точка .
3. Когда процесс будет завершен, контрольная точка появится под Контрольные точки в Hyper-V Manager .

Использование PowerShell

Создайте контрольную точку с помощью команды CheckPoint-VM .

  Контрольная точка-VM-Имя 
  

Когда процесс контрольной точки завершится, просмотрите список контрольных точек для виртуальной машины, используя команду Get-VMCheckpoint .

  Get-VMCheckpoint -VMName 
  

Применение контрольно-пропускных пунктов

Если вы хотите вернуть вашу виртуальную машину к предыдущему моменту времени, вы можете применить существующую контрольную точку.

Использование диспетчера Hyper-V

1. В Hyper-V Manager в разделе Виртуальные машины выберите виртуальную машину.
2. В разделе «Контрольные точки» щелкните правой кнопкой мыши контрольную точку, которую хотите использовать, и выберите Применить .
3. Появится диалоговое окно со следующими параметрами:

• Создать контрольную точку и применить : Создает новую контрольную точку виртуальной машины перед применением предыдущей контрольной точки.
• Применить : Применяется только выбранная вами контрольная точка. Вы не можете отменить это действие.
• Отмена : закрывает диалоговое окно без каких-либо действий.

Выберите опцию «Применить», чтобы создать контрольную точку.

Использование PowerShell

5. Чтобы просмотреть список контрольных точек для виртуальной машины, используйте команду Get-VMCheckpoint .

     Get-VMCheckpoint -VMName 
     

6. Чтобы применить контрольную точку, используйте команду Restore-VMCheckpoint .

     Restore-VMCheckpoint -Name <имя контрольной точки> -VMName  -Confirm: $ false
     

Переименование контрольных точек

Многие контрольные точки создаются в определенной точке. Присвоение им идентифицируемого имени упрощает запоминание деталей о состоянии системы при создании контрольной точки.

По умолчанию имя контрольной точки — это имя виртуальной машины в сочетании с датой и временем, когда контрольная точка была взята.Это стандартный формат:

  имя_ виртуальной_машины (ММ / ДД / ГГГ -чч: мм: сс AM \ PM)
  

Имена могут содержать не более 100 символов, и имя не может быть пустым.

Использование диспетчера Hyper-V

1. В Hyper-V Manager выберите виртуальную машину.
2. Щелкните контрольную точку правой кнопкой мыши и выберите Переименовать .
3. Введите новое имя контрольной точки. Оно должно быть меньше 100 символов, и поле не может быть пустым.
4. По завершении нажмите ENTER .

Использование PowerShell

  Rename-VMCheckpoint -VMName <имя виртуальной машины> -Name <имя контрольной точки> -NewName <имя новой контрольной точки>
  

Удаление контрольных точек

Удаление контрольных точек может помочь освободить место на вашем хосте Hyper-V.

За кулисами контрольные точки хранятся в виде файлов .avhdx в том же месте, что и файлы .vhdx для виртуальной машины.Когда вы удаляете контрольную точку, Hyper-V объединяет файлы .avhdx и .vhdx за вас. После завершения файл .avhdx контрольной точки будет удален из файловой системы.

Не следует удалять файлы .avhdx напрямую.

Использование диспетчера Hyper-V

Чтобы полностью удалить контрольную точку:

1. В Hyper-V Manager выберите виртуальную машину.
2. В разделе Контрольные точки щелкните правой кнопкой мыши контрольную точку, которую вы хотите удалить, и нажмите Удалить.Вы также можете удалить контрольную точку и все последующие контрольные точки. Для этого щелкните правой кнопкой мыши самую раннюю контрольную точку, которую вы хотите удалить, а затем щелкните Удалить контрольную точку Поддерево .
3. Вас могут попросить подтвердить, что вы хотите удалить контрольную точку. Убедитесь, что это правильная контрольная точка, а затем нажмите Удалить .

Использование PowerShell

  Remove-VMCheckpoint -VMName <имя виртуальной машины> -Name <имя контрольной точки>
  

Экспорт контрольных точек

Export объединяет контрольную точку как виртуальную машину, поэтому контрольную точку можно переместить в новое место.После импорта контрольная точка восстанавливается как виртуальная машина. Экспортированные контрольные точки можно использовать для резервного копирования.

Использование PowerShell

  Export-VMCheckpoint -VMName <имя виртуальной машины> -Name <имя контрольной точки> -Path <путь для экспорта>
  

Включение или отключение контрольных точек

1. В Hyper-V Manager щелкните правой кнопкой мыши имя виртуальной машины и выберите Параметры .
2. В разделе Management выберите Checkpoints .
3. Чтобы разрешить удаление контрольных точек с этой виртуальной машины, убедитесь, что выбран параметр «Включить контрольные точки» — это поведение по умолчанию.
   Чтобы отключить контрольные точки, снимите флажок Включить контрольные точки .
4. Щелкните Применить , чтобы применить изменения. Если вы закончили, нажмите ОК , чтобы закрыть диалоговое окно.

Настроить расположение контрольной точки

Если на виртуальной машине нет контрольных точек, вы можете изменить место хранения конфигурации контрольной точки и сохраненных файлов состояния.

1. В Hyper-V Manager щелкните правой кнопкой мыши имя виртуальной машины и выберите Параметры .
2. В разделе Management выберите Checkpoints или Checkpoint File Location .
3. В Расположение файла контрольной точки введите путь к папке, в которой вы хотите сохранить файлы.
4. Щелкните Применить , чтобы применить изменения. Если вы закончили, нажмите ОК , чтобы закрыть диалоговое окно.

Расположение по умолчанию для хранения файлов конфигурации контрольной точки: % systemroot% \ ProgramData \ Microsoft \ Windows \ Hyper-V \ Snapshots .

Демонстрация контрольной точки

В этом упражнении рассматривается создание и применение стандартной контрольной точки по сравнению с производственной контрольной точкой. В этом примере вы просто измените виртуальную машину и понаблюдаете за ее поведением.

Стандартный КПП

1. Войдите в свою виртуальную машину и создайте текстовый файл на рабочем столе.
2. Откройте файл в Блокноте и введите текст «Это стандартная контрольная точка». Не сохраняйте файл и не закрывайте Блокнот .
3. Поменять КПП на стандартную — инструкция здесь.
4. Создайте новую контрольную точку.

Применение стандартной контрольной точки с помощью диспетчера Hyper-V

Теперь, когда контрольная точка существует, внесите изменения в виртуальную машину, а затем примените контрольную точку, чтобы вернуть виртуальную машину обратно в сохраненное состояние.

1. Закройте текстовый файл, если он все еще открыт, и удалите его с рабочего стола виртуальной машины.
2. Откройте диспетчер Hyper-V, щелкните стандартную контрольную точку правой кнопкой мыши и выберите «Применить».
3. Выберите «Применить» в окне уведомления «Применить контрольную точку».

После применения контрольной точки обратите внимание, что присутствует не только текстовый файл, но и система находится в том же состоянии, в котором она была при создании контрольной точки. В этом случае Блокнот открыт и текстовый файл загружен.

Производственный КПП

Теперь рассмотрим производственные контрольно-пропускные пункты. Этот процесс почти идентичен работе со стандартной контрольной точкой, но будет иметь несколько другие результаты. Перед началом убедитесь, что у вас есть виртуальная машина и вы изменили тип контрольной точки на Рабочие контрольные точки.

Измените виртуальную машину и создайте производственную контрольную точку

1. Войдите в виртуальную машину и создайте новый текстовый файл.Если вы выполнили предыдущее упражнение, вы можете использовать существующий текстовый файл.
2. Введите «Это производственная контрольная точка.» В текстовый файл, сохраните файл, но не закрывайте Блокнот .
3. Откройте диспетчер Hyper-V, щелкните виртуальную машину правой кнопкой мыши и выберите Checkpoint .
4. Щелкните OK в окне создания производственной контрольной точки.

Примените производственную контрольную точку с помощью диспетчера Hyper-V

Теперь, когда существует контрольная точка, внесите изменения в систему, а затем примените контрольную точку, чтобы вернуть виртуальную машину обратно в сохраненное состояние.

1. Закройте текстовый файл, если он все еще открыт, и удалите его с рабочего стола виртуальной машины.
2. Откройте диспетчер Hyper-V, щелкните правой кнопкой мыши рабочую контрольную точку и выберите Применить .
3. Выберите Применить в окне уведомления «Применить контрольную точку».

После применения производственной контрольной точки было замечено, что виртуальная машина находится в выключенном состоянии.

1. Запустите виртуальную машину и войдите в нее.
2. Обратите внимание, что текстовый файл был восстановлен.Но в отличие от стандартной КПП, Блокнот не открывается.

Ингибиторы КПП | Виды иммунотерапии

Ингибиторы Checkpoint — это разновидность иммунотерапии. Они используются для лечения таких видов рака, как меланома кожи и рак легких.

Эти препараты блокируют различные белки контрольных точек. Вы также можете услышать, что они названы в честь этих белков контрольной точки — например, ингибиторов CTLA-4, ингибиторов PD-1 и ингибиторов PD-L1.

Примеры ингибиторов контрольных точек включают пембролизумаб (Кейтруда), ипилимумаб (Ервой), ниволумаб (Опдиво) и атезолизумаб (Тецентрик).

Что такое ингибиторы контрольных точек?

Ингибиторы контрольных точек — это разновидность иммунотерапии. Они блокируют белки, которые не позволяют иммунной системе атаковать раковые клетки.

Противораковые препараты не всегда легко поддаются определенному типу лечения. Это связано с тем, что некоторые препараты действуют более чем одним способом и принадлежат к более чем одной группе.

Ингибиторы Checkpoint также описываются как тип моноклональных антител или целевого лечения.

Как работают ингибиторы КПП?

Наша иммунная система защищает нас от болезней, убивая бактерии и вирусы.Один из основных типов иммунных клеток, которые это делают, называется Т-лимфоцитами.

Т-клетки содержат белки, которые включают иммунный ответ, и другие белки, которые его отключают. Их называют белками контрольных точек.

Некоторые белки контрольных точек помогают Т-клеткам становиться активными, например, при наличии инфекции. Но если Т-клетки действуют слишком долго или реагируют на то, чего не должны, они могут начать разрушать здоровые клетки и ткани. Таким образом, другие контрольные точки помогают Т-клеткам отключиться.

Некоторые раковые клетки производят большое количество белков. Они могут отключить Т-клетки, когда они действительно должны атаковать раковые клетки. Итак, раковые клетки нажимают кнопку остановки иммунной системы. И Т-клетки больше не могут распознавать и убивать раковые клетки.

Лекарства, блокирующие белки контрольных точек, называются ингибиторами контрольных точек. Они не дают белкам раковых клеток нажимать кнопку остановки. Это снова включает иммунную систему, и Т-клетки могут находить и атаковать раковые клетки.

Наша иммунная система защищает нас от болезней, убивая бактерии и вирусы.

Он также помогает бороться с раком.

Т-лимфоциты — это один из типов иммунных клеток, которые это делают.

Т-клетки содержат белки, которые включают иммунную систему, когда ей необходимо бороться с инфекцией….

, и другие белки, которые отключают иммунную систему, когда она больше не нужна.Это так называемые контрольно-пропускные пункты.

Раковые клетки могут обмануть иммунную систему, отключив Т-клетки….

мешает им распознавать и атаковать раковые клетки.

Препараты, называемые ингибиторами контрольных точек, снова включают Т-клетки ….

, чтобы они могли распознавать и атаковать раковые клетки.

Для получения дополнительной информации об ингибиторах контрольно-пропускных пунктов щелкните здесь.

Типы

Эти препараты блокируют различные белки контрольных точек, в том числе:

• CTLA-4 (белок 4, связанный с цитотоксическими Т-лимфоцитами)
• PD-1 (белок 1 запрограммированной гибели клеток)
• PD-L1 (лиганд 1 запрограммированной гибели клеток)

CTLA-4 и PD-1 обнаружены на Т-клетки.PD-L1 находятся на раковых клетках.

ПД-1

К ингибиторам КПП, блокирующим ПД-1, относятся:

• ниволумаб (Опдиво)
• пембролизумаб (Кейтруда)

Ниволумаб и пембролизумаб предназначены для лечения некоторых людей с:

• меланома рак кожи
• лимфома Ходжкина
• немелкоклеточный рак легкого

Ниволумаб также используется для лечения некоторых видов рака почек и рака головы и шеи. А пембролизумаб применяют при раке мочевыводящих путей.

Мочевыводящие пути включают:

• центр почки (почечная лоханка)
• трубки, по которым моча поступает из почек в мочевой пузырь (мочеточники)
• мочевой пузырь
• трубка, отводящая мочу из мочевого пузыря и из тела (уретра)

CTLA- 4

Ипилимумаб (Ервой) — препарат-ингибитор контрольной точки, который блокирует CTLA-4. Это лечение запущенной меланомы и почечно-клеточного рака.

PD-L1

К ингибиторам контрольных точек, которые блокируют PD-L1, относятся:

• атезолизумаб
• авелумаб
• дурвалумаб

Атезолизумаб — средство для лечения:

• рак легкого
• некоторые виды рака печени
• некоторые виды рака груди
• рак мочевыводящих путей (уротелиальный рак)

Мочевыводящие пути включают:

• центр почки (почечная лоханка)
• пробирки, по которым моча поступает из почек в мочевой пузырь (мочеточники)
• мочевой пузырь
• трубка для отвода мочи из мочевого пузыря и из тела (уретры)

Авелумаб — это средство для лечения типа рака кожи, называемого карциномой клеток Меркеля (MCC), который распространился на другие части тела.Это также лечение некоторых видов рака мочевыводящих путей (уротелиальный рак).

Дурвалумаб — это средство для лечения немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ).

Когда у вас могут быть эти лекарства

Спросите своего врача, подходят ли вам эти препараты. Возможность этого лечения зависит от вашего типа рака. Это также может зависеть от:

• стадия вашего рака
• , проходили ли вы уже какое-либо лечение

Чтобы узнать, можно ли вам принимать пембролизумаб при немелкоклеточном раке легкого, вам необходимо пройти тестирование на раковые клетки.Чтобы получить этот ингибитор PD-1 для рака легких, вам необходимо иметь большое количество белка PD-L1 на раковых клетках. Это называется PL-L1-положительным раком.

Это испытание распространяется не на все ингибиторы контрольных точек. Ваш врач или медсестра-специалист скажут вам, относится ли это к вам.

Вам могут предложить ингибиторы контрольных точек в рамках клинического исследования. Или вы можете спросить своего врача, есть ли какие-либо исследования, в которых вы могли бы принять участие.

Как вы проходите лечение

Обычно эти лекарства вводятся вам в виде капель в кровоток.

Побочные эффекты

Эти препараты укрепляют все иммунные клетки, а не только те, которые нацелены на рак. Таким образом, сверхактивные Т-клетки могут вызывать возможные побочные эффекты. Сюда могут входить:

• усталость (утомляемость)
• чувство или тошнота
• сухость, зуд кожи, кожная сыпь
• потеря аппетита
• диарея
• одышка и сухой кашель, вызванные воспалением легких

Эти препараты также могут нарушают нормальную работу печени, почек и желез, вырабатывающих гормоны (например, щитовидной железы).Чтобы это проверить, вам нужно регулярно сдавать анализы крови.

Некоторые из этих побочных эффектов могут быть серьезными. Ваша медицинская бригада обсудит возможные побочные эффекты, чтобы вы знали, на что обращать внимание. Сообщите своему врачу или медсестре, если у вас есть какие-либо побочные эффекты, чтобы они могли их вылечить как можно скорее.

Побочные эффекты, такие как диарея, могут быть серьезными. И у вас также могут быть более серьезные побочные эффекты, если вы одновременно принимаете ипилимумаб и ниволумаб. Вам могут назначить эти 2 препарата, если у вас запущенная меланома или почечно-клеточный рак.

Обязательно сообщите врачу, если у вас диарея.

пунктов пропуска | LittleBigPlanet Wiki | Фэндом

Все четыре типа контрольных точек в LittleBigPlanet

Контрольные точки — это области, с которых игрок начинает на уровне после потери жизни. Количество оставшихся жизней обозначено светящимся кольцом по краю. За исключением контрольных точек с бесконечным временем жизни, когда контрольная точка используется для возрождения, часть кольца тускнеет, когда она используется для возрождения.Жизни делятся между всеми игроками. После использования всех перезапусков, кроме одного, кольцо загорится красным, и будет звучать раздражающий предупреждающий сигнал, пока не будет активирована другая контрольная точка или все игроки не будут убиты. Контрольно-пропускные пункты можно приклеить к поверхности, прикрепить к транспортным средствам или оставить незакрепленными.

В многопользовательских играх игроки возрождаются только в том случае, если на экране отображается последняя активированная контрольная точка. Иногда проще заставить одного игрока пройти через препятствие и активировать следующую контрольную точку, чтобы другие игроки могли умереть и возродиться, не преодолевая препятствие самостоятельно.Также возможно вернуться к предыдущей контрольной точке, если на текущей контрольной точке закончились жизни.

Количество жизней, которые имеет стандартная контрольная точка при прохождении, определяется уравнением (p + 2) — d = l, где p — общее количество игроков, d — количество игроков, которые мертвы, когда контрольная точка пройдена (возрождение мертвых игроков из контрольной точки при ее прохождении стоит его жизней), и l — это количество жизней. За исключением входов, присоединяющиеся игроки вносят вклад в d .В контрольной точке двойной жизни количество жизней равно 2 (p + 2) — d = l.

Когда контрольная точка неактивна, она «разблокирована» и меняет счетчик своих жизней в зависимости от общего количества игроков. Однако, когда он активен или был пройден в течение своего жизненного цикла, он «блокируется» и не изменяет счетчик жизней, если игроки присоединяются или уходят (хотя присоединяющиеся игроки действительно считаются мертвыми для контрольной точки). Игроки могут воспользоваться этим, войдя в гостевой профиль (или более), чтобы «удерживать» контрольную точку, чтобы у нее было больше жизней.Это означает, что с 3 дополнительными контроллерами для гостевых учетных записей одна контрольная точка может содержать до 6 жизней, а контрольные точки двойной жизни могут содержать до 12.

Типы пунктов пропуска

Есть четыре типа контрольных точек для уровня. Все они находятся в сумке с инструментами в режиме создания.

• Подъезд — специальный КПП; здесь вы начинаете уровень. В остальном он работает как обычный контрольно-пропускной пункт.
• Контрольно-пропускных пунктов — это стандартный контрольно-пропускной пункт.Он дает три дополнительных жизни при игре в одиночку и мигает красным, когда дополнительных жизней нет.
• контрольных точек двойной жизни — у этой контрольной точки есть два кольца, которые дают в общей сложности шесть дополнительных жизней при игре в одиночку или вдвое больше обычного количества для нескольких игроков. Полезно для сложных задач и перед боями с боссами.
• Контрольная точка бесконечных жизней — белое кольцо активации никогда не истощается. Первоначально он был выпущен в загружаемом Creator Pack 1 и автоматически поставляется с играми, начиная с LittleBigPlanet PSP.
Табло
• — Табло — это контрольная точка другого типа, которая также выступает в качестве конечной точки уровня. Как и другие контрольные точки, если на уровне нет контрольных точек и есть только одно табло, табло действует как единственная контрольная точка на уровне и не может быть удалена обычным образом.

В режиме создания вы можете добавить любой из четырех типов контрольных точек, хотя для каждого уровня будет использоваться только первый вход (или, если входов нет, то первая другая контрольная точка).

Тип	Описание	м =	индивидуальных возрождений *				Возрождение полной группы **
			1	2	3	4	2	3	4
Вход	Начальная точка уровня. На дверях есть эмблема Сэкбоя.	1	3	4	5	6		1 к 2 ***	1 к 2 ***
КПП	Базовый КПП.	1	3	4	5	6	2	1 к 2 ***	1 к 2 ***
Контрольно-пропускной пункт Double-Life	: Содержит вдвое больше возрождений, чем стандартная контрольная точка. Часто используется перед более сложными сегментами или боями с боссами и используется для каждой ограниченной контрольной точки на основных уровнях сюжета LBP2 и LBP3. Имеет два узких кольца вместо одного толстого, а также уникальный джингл активации.	2	6	8	10	12	4	3 р 1 ***	3
Контрольно-пропускной пункт с бесконечным сроком службы	Содержит неограниченное количество возрождений для игроков.На дверях есть символ бесконечности (∞).	∞	∞	∞	∞	∞	∞	∞	∞
Табло	Встроенный контрольно-пропускной пункт возрождает мертвых или умерших игроков.	∞	∞	∞	∞	∞	∞	∞	∞
Ссылка уровня	После использования действует как последняя активированная контрольная точка.

* Где m зависит от типа контрольной точки, p — это количество игроков, играющих, когда контрольная точка была пройдена, а l — общее количество предоставленных жизней.

** Где l — количество жизней, а p — количество игроков, игравших, когда контрольная точка была пройдена.

*** Только это количество игроков может возродиться при последнем выпуске.

Интересные факты

• В LittleBigPlanet (PSP) все контрольно-пропускные пункты и входы бесконечны.
• Контрольно-пропускной пункт можно уменьшить / увеличить. Если вы захватите контрольную точку как объект и испускаете ее в большем / меньшем размере, вы можете затем захватить излучаемую, большую / меньшую контрольную точку и использовать ее на своем уровне.
• Если вы уничтожите единственный вход в игре и переключитесь в режим игры, игра сообщит вам, что вы потеряли все свои жизни, и вам будет предоставлена ​​возможность вернуться в свою капсулу или переиграть уровень.Если вы решите переиграть уровень, вы вернетесь и найдете тот же баннер. Точно так же, если активированная в данный момент контрольная точка будет уничтожена, игра будет действовать так, как будто контрольная точка не имеет жизней.
• Исходный вход не может быть удален до установки другой контрольной точки, но наличие более одной контрольной точки позволяет вам удалить все, кроме одной, которую вы все равно можете уничтожить вручную, используя тяжелый предмет.
• В LittleBigPlanet Karting все точки появления (особенно арены и кинематографические) имеют стиль, аналогичный входу.

Контрольно-пропускные пункты обучения | TensorFlow Core

Фраза «Сохранение модели TensorFlow» обычно означает одно из двух:

1. Контрольно-пропускные пункты, ИЛИ
2. SavedModel.

Контрольные точки фиксируют точное значение всех параметров ( tf.Variable objects), используемых моделью. Контрольные точки не содержат описания вычислений, определенных моделью, и поэтому обычно полезны только тогда, когда доступен исходный код, который будет использовать сохраненные значения параметров.

Формат SavedModel, с другой стороны, включает сериализованное описание вычислений, определенных моделью, в дополнение к значениям параметров (контрольная точка). Модели в этом формате не зависят от исходного кода, создавшего модель. Таким образом, они подходят для развертывания с помощью TensorFlow Serving, TensorFlow Lite, TensorFlow.js или программ на других языках программирования (C, C ++, Java, Go, Rust, C # и т. Д. API TensorFlow).

В этом руководстве рассматриваются API-интерфейсы для записи и чтения контрольных точек.

Настройка

  импортировать тензорный поток как tf
  

  класс Net (тф.керас.Модель):
  "" "Простая линейная модель." ""

  def __init __ (сам):
    super (Net, self) .__ init __ ()
    self.l1 = tf.keras.layers.Dense (5)

  вызов def (self, x):
    вернуть self.l1 (x)
  

  net = Net ()
  

Сохранение с

тф.керас обучение API

См. Руководство tf.keras по сохранению и восстановление.

тф.keras.Model.save_weights сохраняет контрольную точку TensorFlow.

  net.save_weights ('easy_checkpoint')
  

Написание контрольных точек

Постоянное состояние модели TensorFlow хранится в объектах tf.Variable . Они могут быть созданы напрямую, но часто создаются с помощью высокоуровневых API, таких как tf.keras.layers или tf.keras.Model .

Самый простой способ управлять переменными — это прикрепить их к объектам Python и затем ссылаться на эти объекты.

Подклассы tf.train.Checkpoint , tf.keras.layers.Layer и tf.keras.Model автоматически отслеживают переменные, назначенные их атрибутам. В следующем примере строится простая линейная модель, а затем записываются контрольные точки, которые содержат значения для всех переменных модели.

Вы можете легко сохранить контрольную точку модели с помощью Model.save_weights .

Ручная установка контрольных точек

Настройка

Чтобы помочь продемонстрировать все возможности tf.train.Checkpoint , определите набор данных игрушки и шаг оптимизации:

  def toy_dataset ():
  input = tf.range (10.) [:, None]
  метки = входы * 5. + tf.range (5.) [Нет,:]
  вернуть tf.data.Dataset.from_tensor_slices (
    dict (x = входы, y = метки)). repeat (). batch (2)
  

  def train_step (net, пример, оптимизатор):
  "" "Обучает` net` на `example` с помощью` optimizer`. "" "
  с tf.GradientTape () в качестве ленты:
    output = net (пример ['x'])
    loss = tf.reduce_mean (tf.abs (вывод - пример ['y']))
  переменные = нетто.trainable_variables
  градиенты = лента.градиент (потери, переменные)
  optimizer.apply_gradients (zip (градиенты, переменные))
  обратные потери
  

Создание объектов контрольной точки

Используйте объект tf.train.Checkpoint , чтобы вручную создать контрольную точку, где объекты, которые вы хотите проверить, устанавливаются как атрибуты объекта.

A tf.train.CheckpointManager также может быть полезен для управления несколькими контрольными точками.

  opt = tf.keras.optimizers.Adam (0,1)
набор данных = toy_dataset ()
iterator = iter (набор данных)
ckpt = tf.train.Checkpoint (step = tf.Variable (1), optimizer = opt, net = net, iterator = iterator)
manager = tf.train.CheckpointManager (ckpt, './tf_ckpts', max_to_keep = 3)
  

Поезд и КПП модель

Следующий цикл обучения создает экземпляр модели и оптимизатора, а затем собирает их в объект tf.train.Checkpoint . Он вызывает шаг обучения в цикле для каждого пакета данных и периодически записывает контрольные точки на диск.

  def train_and_checkpoint (сеть, менеджер):
  ckpt.restore (manager.latest_checkpoint)
  если manager.latest_checkpoint:
    print ("Восстановлено из {}". формат (manager.latest_checkpoint))
  еще:
    print («Инициализация с нуля.»)

  для _ в диапазоне (50):
    пример = следующий (итератор)
    loss = train_step (net, example, opt)
    ckpt.step.assign_add (1)
    если int (ckpt.step)% 10 == 0:
      save_path = manager.save ()
      print ("Сохраненная контрольная точка для шага {}: {}". format (int (ckpt.step), save_path))
      print ("потеря {: 1.2f} ". Формат (loss.numpy ()))
  

  train_and_checkpoint (сеть, менеджер)
  

Инициализация с нуля.
Сохраненная контрольная точка для шага 10 & двоеточие; ./tf_ckpts/ckpt-1
убыток 30,37
Сохраненная контрольная точка для шага 20 & двоеточие; ./tf_ckpts/ckpt-2
убыток 23,79
Сохраненная контрольная точка для шага 30 и двоеточие; ./tf_ckpts/ckpt-3
убыток 17,23
Сохраненная контрольная точка для шага 40 и двоеточие; ./tf_ckpts/ckpt-4
убыток 10,72
Сохраненная контрольная точка для шага 50 и двоеточие; ./tf_ckpts/ckpt-5
убыток 4,44
 

Восстановить и продолжить обучение

После первого цикла обучения вы можете сдать новую модель и нового менеджера, но продолжить обучение с того места, где вы остановились:

  opt = tf.keras.optimizers.Adam (0,1)
net = Net ()
набор данных = toy_dataset ()
iterator = iter (набор данных)
ckpt = tf.train.Checkpoint (step = tf.Variable (1), optimizer = opt, net = net, iterator = iterator)
manager = tf.train.CheckpointManager (ckpt, './tf_ckpts', max_to_keep = 3)

train_and_checkpoint (сеть, менеджер)
  

Восстановлено с ./tf_ckpts/ckpt-5
Сохраненная контрольная точка для шага 60 и двоеточие; ./tf_ckpts/ckpt-6
убыток 1,33
Сохраненная контрольная точка для шага 70 и двоеточие; ./tf_ckpts/ckpt-7
убыток 1.02
Сохраненная контрольная точка для шага 80 и двоеточие; ./ tf_ckpts / ckpt-8
убыток 0,68
Сохраненная контрольная точка для шага 90 и двоеточие; ./tf_ckpts/ckpt-9
убыток 0,34
Сохраненная контрольная точка для шага 100 и двоеточие; ./tf_ckpts/ckpt-10
убыток 0,16
 

Объект tf.train.CheckpointManager удаляет старые контрольные точки. Выше он настроен на сохранение только трех последних контрольных точек.

  print (manager.checkpoints) # Список трех оставшихся контрольных точек
  

['./tf_ckpts/ckpt-8', './tf_ckpts/ckpt-9', './tf_ckpts/ckpt-10']
 

Эти дорожки, e.грамм. './tf_ckpts/ckpt-10' , не являются файлами на диске. Вместо этого они представляют собой префиксы для файла индекса , и одного или нескольких файлов данных, которые содержат значения переменных. Эти префиксы сгруппированы в один файл контрольной точки ( './tf_ckpts/checkpoint' ), где CheckpointManager сохраняет свое состояние.

  лс ./tf_ckpts 
 

контрольная точка ckpt-8.data-00000-of-00001 ckpt-9.index
ckpt-10.data-00000-из-00001 ckpt-8.показатель
ckpt-10.index ckpt-9.data-00000-из-00001
 

Механика погрузки

TensorFlow сопоставляет переменные со значениями контрольных точек, просматривая ориентированный граф с именованными ребрами, начиная с загружаемого объекта. Имена ребер обычно берутся из имен атрибутов в объектах, например "l1" в self.l1 = tf.keras.layers.Dense (5) . tf.train.Checkpoint использует свои имена аргументов ключевого слова, как в "шаге" в tf.поезд. Контрольная точка (шаг = ...) .

График зависимостей из приведенного выше примера выглядит так:

Оптимизатор отображается красным цветом, обычные переменные — синим, а переменные слота оптимизатора — оранжевым. Другие узлы, например, представляющие tf.train.Checkpoint , отображаются черным цветом.

Переменные слота являются частью состояния оптимизатора, но создаются для определенной переменной. Например, края м и выше соответствуют импульсу, который оптимизатор Adam отслеживает для каждой переменной.Переменные слота сохраняются в контрольной точке только в том случае, если и переменная, и оптимизатор будут сохранены, то есть пунктирные края.

Вызов восстановления для объекта tf.train.Checkpoint ставит в очередь запрошенные восстановления, восстанавливая значения переменных, как только будет найден соответствующий путь от объекта Checkpoint . Например, вы можете загрузить только смещение из модели, которую вы определили выше, реконструировав один путь к ней через сеть и слой.

  to_restore = tf.Переменная (tf.zeros ([5]))
print (to_restore.numpy ()) # Все нули
fake_layer = tf.train.Checkpoint (bias = to_restore)
fake_net = tf.train.Checkpoint (l1 = fake_layer)
new_root = tf.train.Checkpoint (net = fake_net)
status = new_root.restore (tf.train.latest_checkpoint ('./ tf_ckpts /'))
print (to_restore.numpy ()) # Получает восстановленное значение.
  

[0. 0. 0. 0. 0.]
[2,96 3,8070676 3,252836 4,277522 3,8073184]
 

Граф зависимостей для этих новых объектов — это гораздо меньший подграф большей контрольной точки, которую вы написали выше.Он включает только смещение и счетчик сохранения, которые tf.train.Checkpoint использует для нумерации контрольных точек.

восстановление возвращает объект состояния, который имеет необязательные утверждения. Все объекты, созданные в новой контрольной точке , были восстановлены, поэтому статус status.assert_existing_objects_matched проходит.

  status.assert_existing_objects_matched ()
  

В контрольной точке есть много объектов, которые не совпадают, включая ядро ​​уровня и переменные оптимизатора. status.assert_consumed проходит, только если контрольная точка и программа точно совпадают, и вызовет здесь исключение.

Отсроченные реставрации

Объекты слоя в TensorFlow могут отложить создание переменных до их первого вызова, когда доступны входные формы. Например, форма ядра слоя Dense зависит как от входных, так и выходных форм слоя, поэтому выходная форма, требуемая в качестве аргумента конструктора, не является достаточной информацией для создания переменной самостоятельно.Поскольку вызов Layer также считывает значение переменной, восстановление должно происходить между созданием переменной и ее первым использованием.

Для поддержки этой идиомы tf.train.Checkpoint восстанавливает очереди, для которых еще нет соответствующей переменной.

  delayed_restore = tf.Variable (tf.zeros ([1, 5]))
print (delayed_restore.numpy ()) # Не восстанавливается; все еще нули
fake_layer.kernel = delayed_restore
print (delayed_restore.numpy ()) # Восстановлено
  

[[0.0. 0. 0. 0.]]
[[4.5344105 4.5929823 4.7816424 4.758177 5.007635]]
 

Проверка контрольно-пропускных пунктов вручную

tf.train.load_checkpoint возвращает CheckpointReader , который предоставляет доступ более низкого уровня к содержимому контрольной точки. Он содержит сопоставления ключа каждой переменной с формой и dtype для каждой переменной в контрольной точке. Ключ переменной — это путь к объекту, как на графиках, показанных выше.

Примечание: Для контрольной точки нет структуры более высокого уровня.Он знает только пути и значения для переменных и не имеет понятия о моделях , , уровнях или о том, как они связаны.

  считыватель = tf.train.load_checkpoint ('./ tf_ckpts /')
shape_from_key = reader.get_variable_to_shape_map ()
dtype_from_key = reader.get_variable_to_dtype_map ()

отсортировано (shape_from_key.keys ())
  

['_CHECKPOINTABLE_OBJECT_GRAPH',
 'итератор / .ATTRIBUTES / ITERATOR_STATE',
 'net / l1 / bias / .ATTRIBUTES / VARIABLE_VALUE',
 'net / l1 / bias / .OPTIMIZER_SLOT / optimizer / m /.АТРИБУТЫ / ПЕРЕМЕННАЯ_ЗНАЧЕНИЕ ',
 'net / l1 / bias / .OPTIMIZER_SLOT / optimizer / v / .ATTRIBUTES / VARIABLE_VALUE',
 'net / l1 / kernel / .ATTRIBUTES / VARIABLE_VALUE',
 'net / l1 / kernel / .OPTIMIZER_SLOT / optimizer / m / .ATTRIBUTES / VARIABLE_VALUE',
 'net / l1 / kernel / .OPTIMIZER_SLOT / optimizer / v / .ATTRIBUTES / VARIABLE_VALUE',
 'optimizer / beta_1 / .ATTRIBUTES / VARIABLE_VALUE',
 'optimizer / beta_2 / .ATTRIBUTES / VARIABLE_VALUE',
 'optimizer / decay / .ATTRIBUTES / VARIABLE_VALUE',
 'optimizer / iter / .ATTRIBUTES / VARIABLE_VALUE',
 Оптимизатор / скорость обучения /.АТРИБУТЫ / ПЕРЕМЕННАЯ_ЗНАЧЕНИЕ ',
 'save_counter / .ATTRIBUTES / VARIABLE_VALUE',
 'step / .ATTRIBUTES / VARIABLE_VALUE']
 

Итак, если вас интересует значение net.l1.kernel , вы можете получить значение с помощью следующего кода:

  ключ = 'net / l1 / kernel / .ATTRIBUTES / VARIABLE_VALUE'

print ("Форма:", shape_from_key [ключ])
print ("Dtype:", dtype_from_key [ключ]. имя)
  

Форма и двоеточие; [1, 5]
Dtype и двоеточие; float32
 

Он также предоставляет метод get_tensor , позволяющий проверять значение переменной:

  считыватель.get_tensor (ключ)
  

массив ([[4.5344105, 4.5929823, 4.7816424, 4.758177, 5.007635]],
      dtype = float32)
 

Сопровождение объекта

Контрольные точки

сохраняют и восстанавливают значения объектов tf.Variable путем «отслеживания» любой переменной или отслеживаемого объекта, установленного в одном из его атрибутов. При выполнении сохранения переменные рекурсивно собираются из всех доступных отслеживаемых объектов.

То же, что и при прямом назначении атрибутов, например, self.l1 = tf.keras.layers.Dense (5) , назначение списков и словарей атрибутам будет отслеживать их содержимое.

  save = tf.train.Checkpoint ()
save.listed = [tf.Variable (1.)]
save.listed.append (tf.Variable (2.))
save.mapped = {'один': save.listed [0]}
save.mapped ['два'] = save.listed [1]
save_path = save.save ('./ tf_list_example')

restore = tf.train.Checkpoint ()
v2 = tf. переменная (0.)
assert 0. == v2.numpy () # Еще не восстановлен
restore.mapped = {'два': v2}
restore.restore (путь_сохранения)
утверждать 2.== v2.numpy ()
  

Вы можете заметить объекты-оболочки для списков и словарей. Эти оболочки являются версиями базовых структур данных с возможностью проверки. Как и при загрузке на основе атрибутов, эти оболочки восстанавливают значение переменной, как только она добавляется в контейнер.

  restore.listed = []
print (restore.listed) # ListWrapper ([])
v1 = tf. переменная (0.)
restore.listed.append (v1) # Восстанавливает v1 из restore () в предыдущей ячейке
утверждать 1. == v1.numpy ()
  

ListWrapper ([])
 

Отслеживаемые объекты включают тс.train.Checkpoint , tf.Module и его подклассы (например, keras.layers.Layer и keras.Model ) и распознанные контейнеры Python:

• dict (и collections.OrderedDict )
• список
• кортеж (и коллекций. Namedtuple , типизация .NamedTuple )

Другие типы контейнеров не поддерживаются , в том числе:

• коллекций.defaultdict
• комплект

Все остальные объекты Python игнорируются , в том числе:

Сводка

Объекты TensorFlow предоставляют простой автоматический механизм для сохранения и восстановления значений переменных, которые они используют.

Как изменить время начала КПП?

Привет, Сандип,

Я бы хотел изменить расписание второй контрольной точки, потому что я думаю, что это наиболее полезно для работы в разные моменты.

Обратите внимание на вывод команды sched.sh —wide, что GC, Checkpoints и hfs не отображаются. Уверен, что эти задачи выполняются регулярно. Я видел это на странице Enterprise Manager.

admin @: _{/ :} / >>: sched.sh —wide

24-часовой формат 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 ART

0 1 2 3 4 5 6 7 8 ‘9 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 1 2 3

2012/09/07………… рррррррр ……………………………….. …………………….. ssssssssssss

2012/09/07 ……………. ………………………………………….. …………………. SSSSSSSS

2012/09/08 sssssssssss.rrrrrrr …………….. …………………………………….. ssssssss ….. …

2012/09/08 SSSSSSSSSSSSSSSSS ………………………………… ………………………………….

09.09.2012 … ….. г … г ………………………………………………. ……………………….

2012/09/10 …….. д … р .. ……………………….. ssssssssssssssssssss ……………. ssssssssssssssss

2012 г. / 09/11 sssssssssss.rrrrrrrrrrrrrr ……………………………. eeee …….. …….. ssssssssssssssss

2011/09/11 …….. d ………… RR ………… ………………………………………….. ………..

2012/09/12 ссссссссс … рррррр …………………………………………………….. ssssssssssssssss

2012 / 09/12 …….. д ……………………………….. ………………………………….. SSSSSSSS

2012/09/13 sssssssss … ррррррр ………………………………….. сс …. ………….. ssssssssssssssss

13.09.2012 SSSSSSSSSSSSSSSSS ……………………… ………………………………………….. ..

13.09.2012 …….. д ………………………….. ……………………………………………….

2012/09 / 14 ссссссссс … рррррр …………………………………….. …………………………….

2012/09/14 …….. d ………………………………………….. ……………………………….

s = snapup, h = hfs, c = CP , g = GC, r = Repl, d = ReplDest, e = restore

Прописные буквы / обратное означает сбой. v1.6

Спасибо и привет.

Контрольная точка G2 — молекулярный коммутатор на основе узлов

FEBS Open Bio.2017 Apr; 7 (4): 439–455.

, ¹ , ¹ , ¹ , ^{2 , 3 , 4} , ^{5 , 6 , 7} и ¹

Mark C. de Gooijer

¹ Отдел фармакологии / Клиника рака у мышей, Нидерландский институт рака, Амстердам, Нидерланды

Arnout van den Top

¹ Отдел фармакологии / Клиника рака мышей, Нидерланды Институт рака, Амстердам, Нидерланды

Ирена Бокай

¹ Отделение фармакологии / Клиника рака мышей, Нидерландский институт рака, Амстердам, Нидерланды

Jos H.Beijnen

² Кафедра фармации и фармакологии, Нидерландский институт рака / больница Слотерваарт, Амстердам, Нидерланды

³ Отделение лекарственной токсикологии, Фармацевтический факультет Утрехтского университета, Нидерланды

⁴ Отделение Биомедицинский анализ, факультет естественных наук, Утрехтский университет, Нидерланды

Thomas Würdinger

⁵ Исследовательская группа нейро-онкологии, отделения нейрохирургии и детской онкологии / гематологии, Онкологический центр Амстердама, Медицинский центр Университета VU, Нидерланды

⁶ Отделение молекулярной нейрогенетики, отделения неврологии и радиологии, Массачусетская больница общего профиля, Бостон, Массачусетс, США

⁷ Программа неврологии, Гарвардская медицинская школа, Бостон, Массачусетс, США

Олаф ван Теллинген

¹ Отделение Фармакология / Клиника рака мышей, Нидерландский институт рака, Амстердам, Нидерланды

¹ Отдел фармакологии / Клиника рака мышей, Нидерландский институт рака, Амстердам, Нидерланды

² Департамент фармации и фармакологии, Нидерландский институт рака / больница Слотерваарт, Амстердам, Нидерланды

³ Отделение лекарственной токсикологии, фармацевтический факультет, Утрехтский университет, Нидерланды

⁴ Отделение биомедицинского анализа, Научный факультет, Утрехтский университет, Нидерланды

⁵ Исследовательская группа по нейроонкологии, Отделения нейрохирургии и Детская онкология / гематология, Онкологический центр Амстердама, Медицинский центр Университета VU, Нидерланды

⁶ Отделение молекулярной нейрогенетики, отделения неврологии и радиологии, Массачусетская больница общего профиля, Бостон, Массачусетс, США

⁷ Программа неврологии, Harvard Medical School, Бостон, Массачусетс, США

Соответствующий авт. или. ^* Переписка
О. ван Теллинген, Отдел фармакологии / Клиника рака мышей, Нидерландский институт рака, кабинет AKL C1.005, Plesmanlaan 121, 1066CX Amsterdam, Нидерланды
Факс: +31 20512 2799
Тел .: +31 20 512 2792
E-mail: [email protected],

Поступила 21.11.2016; Пересмотрено 9 января 2017 г .; Принято 18 января 2017 г.

Copyright © 2017 Авторы. Опубликовано FEBS Press и John Wiley & Sons Ltd. Это статья в открытом доступе в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии правильного цитирования оригинальной работы.Эта статья цитировалась в других статьях в PMC.

Дополнительные материалы

Рис. S1. Полный обзор сети КПП G2.

GUID: 96CF0872-F3C5-482E-A6D9-36E9D37908DD

Видео S1. Контрольная точка G2 — молекулярный коммутатор на основе узлов.

GUID: 47026E24-B515-4DA1-8AC2-602FA48C48FE

GUID: 36D63106-7E1D-4F4E-89C1-AC393D017412

Заявление о доступности данных

Заявление о доступности данных цикл имеет первостепенное значение для обеспечения целостности генома на протяжении всей жизни.Контрольные точки клеточного цикла присутствуют в каждой фазе клеточного цикла и предотвращают развитие клеточного цикла при нарушении целостности генома. Контрольная точка G2 представляет собой сложную сигнальную сеть, которая регулирует переход G2 к митозу (M). Мы предлагаем здесь основанную на узлах модель регуляции контрольных точек G2, в которой действие центрального узла CDK1 – cyclin B1 определяется согласованными, но противоположными действиями узлов Wee1 и белка контроля клеточного деления 25C (CDC25C). Фосфорилирование Wee1 и CDC25C в определенных сайтах определяет их субклеточную локализацию, подталкивая их либо к активности внутри ядра, либо к цитоплазме и последующей убиквитин-опосредованной протеасомной деградации.В свою очередь, этот субклеточный баланс узлов Wee1 и CDC25C управляется действием узлов PLK1 и CHK1 через то, что мы назвали «ядерными и цитоплазматическими состояниями принятия решения» Wee1 и CDC25C. Предлагаемая модель на основе узлов обеспечивает понятную структуру сложных взаимодействий, которые управляют решением отложить или продолжить прогрессирование G2 / M. Модель также может помочь в прогнозировании эффектов агентов, нацеленных на эти узлы контрольных точек G2.

Ключевые слова: CDC25C, клеточный цикл, CHK1, контрольная точка G2, PLK1, Wee1

Сокращения

β-TrCP

белок, содержащий повторение β-трансдуцина

APC / C

анафазо-промотирующий комплекс или циклосомы

ATM

киназа, мутированная при атаксии, телеангиэктазии

ATR

ATM и киназа, связанная с Rad3

AURKA

киназа Aurora A

CAK

деление киназы 914CD 914C 914C 914C 914C1445 914C914C914C914 активирующий белок 914A CDC25C

белок контроля клеточного деления 25C

CDK1

циклин-зависимая киназа 1

CDS

состояние решения цитоплазмы

CHK1

контрольная точка киназа 1

CK214 914-киназа 914-киназа 914-киназа 914-28 CK214-914 914 914 914 914 914 914 914 киназа F214-X6 914 914 914 914 914 914 коробка только белок 6

Hsp90α

белок теплового шока 90α

KD

киназный домен

91 426 MYT1

фактор транскрипции миелина 1

NDS

ядерное состояние решения

NES

ядерный экспортный сигнал

PLK1

поло-подобная киназа 1

PP1

протеин фосфатаза 914A

протеин фосфатаза 914A

914A

протеин фосфатаза 914A

RSK

рибосомная киназа S6

SCF

Белок Skp1-Cul1-Fbox

WIP1

p53-индуцированная фосфатаза дикого типа

Каждая фаза эукариотического клеточного цикла четко регулируется и регулируется 1.Контроль клеточных контрольных точек имеет решающее значение для минимизации накопления повреждений ДНК и обеспечения целостности генома во время прогрессирования клеточного цикла 2. Таким образом, неудивительно, что дерегуляция контрольных точек и связанное с этим повреждение ДНК были причастны ко многим заболеваниям, включая рак и нейродегенеративные расстройства 3, 4.

Исследования проведенное в течение последних двух десятилетий, подтверждает, что ядерный цитоплазматический цикл важных белков контрольной точки G2, таких как циклин-зависимая киназа 1 (CDK1), циклин B1, киназа Wee1 (Wee1) и белок, контролирующий деление клеток 25C (CDC25C), является ключевым. механизм регулирования КПП G2 5, 6, 7, 8.Было установлено детальное понимание различных типов белковых взаимодействий, участвующих в контроле клеточных контрольных точек и ответе на повреждение ДНК (обзор в 9). Однако подробный пространственно-временной обзор динамики клеточных контрольных точек еще не опубликован. Здесь мы сосредоточимся на контрольной точке G2 человека как на модельной контрольной точке, использующей множество белковых взаимодействий и модификаций для регулирования цикла ядерных цитоплазматических белков. Мы идентифицируем различные посттрансляционно модифицированные состояния каждого белка контрольной точки G2, претерпевающего ядерный цитоплазматический цикл.Конкурирующие факторы определяют их состояние и тем самым субклеточную локализацию и, следовательно, активность белка. Исход всех этих соревнований определит статус контрольно-пропускного пункта G2 в любой момент времени. Поэтому мы предлагаем называть эти состояния ядерным решающим состоянием (NDS) и цитоплазматическим решающим состоянием (CDS) белка. Мы очень подробно опишем контрольную точку G2 как биомолекулярный переключатель на основе узлов, подчеркнув важность различных белковых взаимодействий и подчеркнув субклеточную локализацию белков как ключевой регуляторный фактор во время регуляции контрольных точек.

Узловая основа контрольных точек

Контрольные точки G1 и G2, хотя и различаются участием специфических белков контрольных точек, по сути являются системами на основе узлов, вращающимися вокруг стержневого узла CDK, который контролирует прогрессию клеточного цикла (рис.). Центральный узел CDK2 регулирует переход к фазе S при переходе G1 / S, в то время как CDK1 (также известный как белок 2 контроля клеточного деления, CDC2) включает центральный узел контрольной точки контрольной точки G2 и отвечает за вход в митоз 4.Центральный узел CDK1 напрямую регулируется первичными регуляторными узлами Wee1 и CDC25C, которые, соответственно, фосфорилируют и дефосфорилируют CDK1 10. В ядре Wee1 фосфорилирует CDK1 на Tyr15, инактивируя киназу и тем самым вызывая остановку G2, что приводит к клеточному циклу. ингибирование прогрессии 11, 12. Напротив, фосфатаза CDC25C отражает функцию Wee1 путем дефосфорилирования инактивирующего фосфорилирования CDK1 на Tyr15, реактивации CDK1 в ядре и содействия вхождению в митоз 13,14.

Узловая основа КПП G2. Действие центрального узла CDK1-cyclin B1 (чистый прямоугольник) определяется согласованной, но противоположной активностью первичных регуляторных узлов Wee1 и CDC25C (пунктирные прямоугольники). В свою очередь, вторичные регуляторные узлы PLK1 и CHK1 (прямоугольники с координатной сеткой) направляют действие узлов Wee1 и CDC25C путем фосфорилирования в определенных сайтах, которые определяют их субклеточную локализацию, либо подталкивая их к накоплению и активности ядер или цитоплазматической локализации с последующим убиквитином. опосредованная протеасомная деградация.

В свою очередь, основные регуляторные узлы Wee1 и CDC25C регулируются тремя регулирующими узлами. Во-первых, центральный узел CDK1 сам регулирует эти узлы. Активный CDK1 может фосфорилировать как Wee1, так и CDC25C, что приводит к исключению Wee1 из ядра и стимулированию активности фосфатазы CDC25C 14, 15. Посредством этих двух активностей CDK1 усиливает дальнейшее образование активного CDK1 через оба своих регуляторных узла. Результатом этого механизма является поистине гениальный молекулярный переключатель, при котором активный CDK1 при достижении определенного порогового уровня запускает эффект снежного кома, достигающий кульминации в прогрессии G2 / M необратимым образом для компонентов механизма клеточных контрольных точек.Очевидно, этот механизм требует тщательной регуляции баланса активации CDK1.

Во-вторых, первичные регуляторные узлы Wee1 и CDC25C регулируются двумя вторичными регуляторными узлами. Узлы polo-like kinase 1 (PLK1) и checkpoint kinase 1 (CHK1) определяют баланс клеточной локализации узлов Wee1 и CDC25C. PLK1 прокладывает путь для деградации Wee1 путем фосфорилирования его остатка Ser53 16. Сходным образом транслокация CDC25C в ядро ​​стимулируется фосфорилированием Ser198 с помощью PLK1 17.Взятые вместе, PLK1 способствует прогрессированию G2 / M посредством воздействия на субклеточную локализацию обоих узлов регуляторных контрольных точек CDK1. Напротив, активность CHK1 прямо противодействует активности PLK1. CHK1 способствует ядерной локализации Wee1 посредством фосфорилирования на Ser642 и подготавливает CDC25C к цитоплазматической транслокации посредством фосфорилирования на Ser216, тем самым усиливая арест G2 через оба первичных регуляторных узла. Ниже мы более подробно обсудим различные узлы и их пространственно-временную роль в контрольной точке G2, начиная со вторичных регуляторных узлов, за которыми следуют первичные регуляторные узлы и заканчивая центральным узлом CDK1 (для полного обзора всех узлов и их пространственно-временного взаимодействия. см. рис.S1 и видео S1).

Узел PLK1

В результате различных событий репликации, даже при отсутствии генотоксического стресса, здоровые эукариотические клетки приобретают базальные уровни повреждений ДНК во время S-фазы, которые не могут быть устранены до поздней фазы G2 18, 19, 20, 21. При успешной репарации каждого повреждения ДНК передача сигналов через PLK1 увеличивается, что в конечном итоге приводит к восстановлению контрольной точки и последующему прогрессированию G2 / M 22, 23. hBora связывается с PLK1, вызывая конформационные изменения между доменом связывания белка и доменом киназы ( KD) PLK1, который подвергает сайт Thr210 PLK1 фосфорилированию с помощью активной киназы Aurora A (AURKA) 24.Активированный PLK1 может затем фосфорилировать CDC25C на Ser198 17, способствуя транслокации CDC25C из цитоплазмы в ядро, и Wee1 на Ser53 16, прививая Wee1 для опосредованной убиквитином протеасомной деградации (рис.). Передача сигналов через вторичный регуляторный узел PLK1, следовательно, активно управляет клетками через переход G2 / M, влияя на внутриклеточное распределение обоих регуляторных узлов CDK1.

Узел ПЛК1. После успешного завершения репарации ДНК PLK1 активируется киназой Aurora A (AURKA) в сотрудничестве с hBora посредством фосфорилирования его остатка Threonine-210.После активации PLK1 может способствовать прогрессированию G2 / M путем управления накоплением в ядре и целевой активности CDK1 CDC25C и передачи сигналов Wee1 для опосредованной убиквитином протеасомной деградации.

PLK1 был описан как несущий сигнал ядерной транслокации, который позволяет жестко регулировать его субклеточную локализацию во время клеточного цикла 25. Уже в 1994 году Golsteyn et al . 26 показали, что PLK1 диффузно локализуется по всей клетке во время интерфазы. Подробно описано, что PLK1 участвует в контрольной точке сборки веретена во время M фазы, подтверждая важность активного PLK1 на кинетохоре во время ранних митозов 27,28,29.Более того, недавнее исследование продемонстрировало, что, несмотря на цитоплазматическую активацию, активность PLK1 впервые обнаруживается в ядре в ранней фазе G2 30. Однако, основываясь на современной литературе, все еще остается предположение, является ли ядерная или цитоплазматическая PLK1 главным образом ответственным за роль PLK1 в контрольно-пропускной пункт G2 позже в фазе. Здесь мы предлагаем модель, в которой цитоплазматический — а не ядерный — PLK1 является основным участником его регуляторной функции в контрольной точке G2. Эффекты PLK1 на накопление в ядрах CDC25C 17 и Wee1 31 — посредством обеспечения сигнала ядерной транслокации, опосредованного фосфорилированием, или ядерной стабилизации CDC25C и Wee1 — могут быть объяснены как цитоплазматической, так и ядерной PLK1.Однако открытие, что фактор транскрипции миелина 1 (MYT1) — киназа, нацеливающая на CDK1 и более подробно описанная в разделе ‘The CDK1 node’, описанная ниже — нацелен на PLK1, нельзя приписать ядерной роли PLK1 в контрольной точке G2 32. MYT1 представляет собой ассоциированную с мембраной Wee1-подобную киназу, которая локализуется в эндоплазматическом ретикулуме и системе Гольджи 33, 34, и поэтому нацеливание этой киназы с помощью PLK1 должно происходить в цитоплазме. Кроме того, цитоплазматическая активность PLK1 также необходима для примирования комплекса Cyclin B1-CDK1 для ядерной локализации путем фосфорилирования остатков серина на Cyclin B1 (см.также рис.) 35.

Узел CDK1. Цикл ядерной цитоплазмы регулирует активность CDK1. CDK1-Cyclin B1 цитоплазматически активируется комплексом CDK7-Cyclin H и впоследствии примирован к ядерной транслокации с помощью PLK1. В ядре NDS CDK1 может быть деактивирован с помощью Wee1-опосредованного фосфорилирования, процесса, которому противодействует CDC25C-опосредованное дефосфорилирование. После инактивации, опосредованной Wee1, комплекс CDK1-Cyclin B1 примируется для цитоплазматической транслокации, скорее всего, посредством дефосфорилирования Cyclin B1, где он достигает своей CDS.Здесь нацеливание с помощью MYT1 дополнительно инактивирует CDK1, в то время как активность фосфатазы делает возможным повторный вход в ядро.

Узел CHK1

Обнаружение повреждения ДНК во время фазы S и G2, вызывает задержку контрольной точки G2, что позволяет правильно восстановить ДНК и предотвратить митотическую катастрофу 1, 36. Сигнал повреждения ДНК передается на контрольную точку G2 через ataxia telangiectasia-mutated kinase (ATM), ATM и Rad3-related kinase (ATR) и CHK1 (рис.). ATM обычно активируется двухцепочечными разрывами ДНК и в первую очередь участвует в аресте контрольной точки G2 37.ATR в основном участвует в остановке контрольной точки G1 и активируется при образовании одноцепочечного разрыва ДНК 38, 39, но также участвует в репарации двухцепочечных разрывов в качестве нижестоящей мишени ATM 40. После передачи сигналов роста через путь митоген-активируемой протеинкиназы , p90 рибосомная киназа S6 (RSK) фосфорилирует CHK1 по остатку Ser280, способствуя его ядерной локализации 41. В ядре как ATM 42, 43, так и ATR 44 могут фосфорилировать свою нижележащую мишень CHK1 по аминокислотным остаткам Ser317 и Ser345, индуцируя CHK1 аутофосфорилирование на Ser296 45, 46 и позволяет CHK1 выполнять свою роль в индукции ареста контрольных точек G2 47.Напротив, Ser40-активированная p53-индуцированная фосфатаза дикого типа (WIP1) может предотвращать аутофосфорилирование CHK1 путем дефосфорилирования остатка 48 Ser345, процесс, который может саморегулироваться петлей обратной связи, подобной той, которая предлагается для CHK2 49, 50. Аутофосфорилированная форма CHK1 лучше всего обозначить как CHK1 NDS, поскольку за него конкурируют 14-3-3 γ и протеинфосфатаза 2A (PP2A). Фосфорилирование Ser296 способствует ядерной активности и может быть стабилизировано путем ассоциации с 14-3-3 γ 51. Напротив, проявление активности CHK1 потребляет фосфорилированный остаток.Мы предполагаем, что фосфорилированный остаток Ser296 CHK1 потребляется, тем самым вызывая диссоциацию 14-3-3 γ и снова позволяя CHK1 аутофосфорилировать или быть нацеленным на WIP1.

Узел CHK1. CHK1 перемещается в ядро ​​за счет фосфорилирования p90 RSK. В ядре CHK1 активируется после повреждения ДНК либо непосредственно с помощью киназы, мутировавшей телеангиэктазию ataxia (ATM), либо через ее нижележащую мишень ATM и Rad3-родственную киназу (ATR). Ингибирующая активность CHK1 в отношении прогрессирования G2 / M является тройной: через активацию и ядерную стабилизацию Wee1, через деактивацию CDC25C путем прямого фосфорилирования и через стимуляцию цитоплазматической транслокации CDC25C через активацию PP2A / B56δ.В свою очередь, PP2A / B56γ3 может дезактивировать CHK1 путем дефосфорилирования, после чего он примируется для ядерного экспорта с помощью CDK1. В цитоплазме CHK1 либо нацелен на протеасомную деградацию с помощью SCF ^FBX6 , либо перемещается в ядро ​​путем дефосфорилирования.

CHK1 контролирует оба регуляторных узла CDK1, управляя балансом субклеточной локализации Wee1, а также CDC25C. CHK1 фосфорилирует Wee1 по Ser642, предотвращая его нацеливание на внеядерную транслокацию и активируя его CDK1-направленную киназную активность 52,53.Напротив, CHK1 фосфорилирует остаток Ser216 CDC25C, передавая ему сигнал для экстраядерной транслокации и предотвращая активацию его фосфатазной активности с помощью CDK1 54. Более того, CHK1 также облегчает вторую стадию передачи сигнала внеядерной транслокации CDC25C через свое влияние на PP2A. PP2A — это тримерная фосфатаза с двойной специфичностью, которая всегда состоит из структурной (A), каталитической (C) и регуляторной субъединицы (B) 55. Поскольку разнообразие изоформ A и C ограничено, но существует ряд очень разнообразных изоформ B. с разными субклеточными локализациями, распознавание субстратом комплекса PP2A обычно определяется регуляторной изоформой B, ассоциированной с димером AC (PP2AD) 56.С одной стороны, CHK1 может фосфорилировать ядерную регуляторную субъединицу PP2A B56δ по остатку Ser32, способствуя ассоциации комплекса 57 PP2AD / B56δ. Впоследствии комплекс PP2AD / B56δ может дефосфорилировать CDC25C на Thr130 (который фосфорилируется CDK2, что рассматривается далее. в «Узле CDC25C» ниже), дополнительно способствуя цитоплазматической транслокации CDC25C. Интересно, что недавнее исследование предполагает, что киназа Greatwall способствует ядерной активности CDK1 после восстановления повреждений ДНК посредством ингибирования комплекса PP2A, в частности, способствуя дефосфорилированию CDK1Tyr15 в ядре 58.Поскольку известно, что Greatwall ингибирует PP2A, мы предполагаем, что Greatwall и CHK1 потенциально могут иметь антагонистические эффекты на активность комплекса PP2A в контексте повреждения ДНК. С другой стороны, существует петля отрицательной обратной связи между CHK1 и PP2A, где CHK1 может способствовать ассоциации ядерной регуляторной субъединицы B с димером PP2A 59. Затем тример PP2AD / B может дефосфорилировать NDS CHK1, делая его неактивным и ставя под угрозу G2 арест 60. Хотя специфическая регуляторная субъединица PP2A, ответственная за дефосфорилирование CHK1, все еще неизвестна, PP2AD / B56γ3, как было описано, дефосфорилирует киназу контрольной точки 2 (CHK2) 61.Поскольку CHK1 и CHK2 имеют много общих мишеней ниже по течению, охватывают аналогичные KD и оба ингибируются AZD7762, локализованная в ядре субъединица B56γ3 является вероятным кандидатом на проявление аффинности как к CHK1, так и к CHK2 39, 62, 63. Таким образом, PP2AD / B56δ делает возможным цитоплазматический транслокация CDC25C и активирует остановку G2, тогда как PP2AD / B56γ3 может предотвращать транслокацию CDC25C в цитоплазму и препятствовать остановке G2. Важно, что противоположные функции этих двух разных комплексов PP2A ниже CHK1 могут помочь объяснить недавнее наблюдение, что ингибирование каталитической субъединицы PP2A с помощью okadaic acid приводит к ослаблению остановки G2 при одновременном увеличении уровней фосфорилированного CHK1 64.

После дефосфорилирования PP2A, CHK1 может быть мишенью комплекса CDK1-Cyclin B1, усиливая ядерную активность CDK1. Было показано, что это взаимодействие способствует опосредованной Crm-1 (экспортин-1) транслокации CHK1 в цитоплазму путем фосфорилирования остатков Ser286 и Ser301 65. Интересно, что реципрокное цитоплазматическое взаимодействие также описано для CHK1 в регуляции Cyclin B1-CDK1. локализация в центросомах, тем самым предотвращая преждевременный митоз 66. В цитоплазме CHK1 ^{S268 / S301 / S345} конкурирует с убиквитинлигазой E3 Skp1-Cul1-Fbox F-box только протеином 6 (SCF ^FBX6 ) на одном руку и фосфатазы, с другой стороны, обозначив эту форму как CDS.FBX6 нацелен на CHK1 для убиквитин-опосредованной протеасомной деградации за счет распознавания фосфодегроном остатка 67 Ser345, тогда как активность фосфатазы д. Запускать CHK1 для повторного входа в ядро. Идентичность этих фосфатаз еще не установлена, но главными кандидатами являются PP2A, WIP1 и протеинфосфатаза 1 (PP1).

Узел Wee1

Киназа Wee1 является первичным негативным регулятором узла CDK1 посредством фосфорилирования активного CDK1 по остатку Tyr15 (Рис.) 68, 69.Было показано, что Wee1 по-разному локализуется на протяжении всего клеточного цикла 70. После своего синтеза в цитоплазме Wee1 может перемещаться в ядро ​​с помощью фосфорилированного белка-шаперона, белка теплового шока 90α (Hsp90α) 71, 72. Более того, образование комплекса с Hsp90α стабилизирует цитоплазматический Wee1, предотвращая его деградацию 73. Интересно, что Wee1 облегчает свою собственную ядерную транслокацию путем фосфорилирования остатка Tyr38 Hsp90α 74.

Узел Wee1. Wee1 подвергается ядерному цитоплазматическому циклу, который важен для определения его ингибирующего действия на прохождение G2 / M через узел CDK1.Wee1 перемещается в ядро ​​с помощью белка теплового шока 90α (Hsp90α), где он достигает своего NDS. Фосфорилирование Wee1 NDS с помощью CHK1 способствует CDK1-направленной активности Wee1, тогда как фосфорилирование с помощью CDK1 способствует перемещению обратно в цитоплазму. В цитоплазме Wee1 достигает своей CDS, которая либо примирована к убиквитин-опосредованной протеасомной деградации за счет фосфорилирования с помощью комплекса PLK1-CK2, либо подготавливается для повторного входа в ядро ​​за счет дефосфорилирования с помощью CDC14A.

После переноса в ядро ​​Wee1 должен высвобождаться из Hsp90α для выполнения своей нисходящей функции, которая происходит по механизму, который еще не выяснен, но может включать дефосфорилирование Hsp90α любой тирозинфосфатазой.Эту несвязанную форму Wee1 лучше всего обозначить как Wee1 NDS, поскольку две киназы конкурируют за этот нефосфорилированный Wee1. С одной стороны, CHK1 нацелен на остаток Ser642 Wee1, способствуя решению Wee1 в отношении фосфорилирования CDK1 53. С другой стороны, активный комплекс Cyclin B1-CDK1 нацелен на остаток Ser123, который благоприятствует судьбе решения Wee1 в отношении экстрануклеарной транслокации 15

Фосфорилирование остатка Ser642 с помощью CHK1 создает сайт связывания для чашевидного семейства стабилизации фосфорилирования из 14-3-3 белков, которое укрывает фосфорилированный остаток и стабилизирует фосфорилированный Wee1 ^S642 53.Эта конфигурация Wee1 является активной формой, которая может фосфорилировать CDK1 на Tyr15, поддерживая комплекс циклин B1-CDK в неактивном состоянии и предотвращая прогрессирование G2 / M. Как недавно было описано у дрожжей, образование комплекса Cks, возможно, опосредует это нацеливание на CDK1 с помощью Wee1, облегчая ассоциацию белков 75. Поскольку активный Wee1 несет только один фосфорилированный остаток, мы предполагаем, что Wee1-опосредованное фосфорилирование Tyr15 CDK1 происходит за счет фосфорилированного Ser642. остаток вызывает высвобождение 14-3-3, тем самым возвращая Wee1 в Wee1 NDS.Напротив, фосфорилирование NDS Wee1 с помощью CDK1 генерирует сигнал для цитоплазматической транслокации Wee1, который также действует как фосфодегрон после завершения транслокации Wee1 16, 76. Хотя механизм, с помощью которого осуществляется транслокация, неясен, можно предположить, что вовлечение белков теплового шока, поскольку эти важные клеточные белки-шапероны также, как было показано, транспортируют Wee1 в ядро.

Полученный цитоплазматический фосфорилированный Wee1 ^S123 может быть обозначен как Wee1 CDS, поскольку, опять же, два белка конкурируют за эту форму.С одной стороны, белок 14A, контролирующий деление клеток (CDC14A), дефосфорилирует Ser123, отменяя действие CDK1, предотвращая деградацию Wee1 и завершая цикл Wee1, снова обеспечивая образование комплекса с Hsp90α 77. С другой стороны, активный фосфорилированный PLK1 ^Y210 в комплексе с фосфорилированной казеинкиназой 2 (CK2) конкурирует с CDC14A за CDS Wee1. Фосфорилирование остатка Ser53 с помощью PLK1 и остатка Ser121 с помощью CK2 создает два дополнительных фосфодегрона 31, 78, 79.В конечном счете, три фосфодегрона, генерируемые CDK1, CK2 и PLK1, яростно способствуют стыковке белка, содержащего повторы убиквитинлигазы E3 Skp1-Cul1-Fbox β-трансдуцина (SCF ^β-TrCP ), подготавливая Wee1 для опосредованной протеасомами деградации 16 Эта деградация наиболее вероятно происходит в цитоплазме, поскольку исходный фосфодегрон, который CDK1 генерирует на Wee1, также действует как сигнал цитоплазматической локализации.

Узел CDC25C

В клетках человека были идентифицированы три изоформы CDC25, которые могут частично не только компенсировать роль друг друга при нарушении механизма клеточного цикла, но также выполнять различные функции на протяжении всего цикла в физиологических условиях 80, 81 , 82.В то время как CDC25A и CDC25B провоцируют активацию Cyclin B1-CDK1, CDC25C отвечает за стимуляцию и поддержание полномасштабной активации Cyclin B1-CDK1, которая в конечном итоге определяет прохождение контрольной точки G2 13. Именно эта роль делает CDC25C важным узлом в регулировании решение КПП G2. Узел CDC25C отражает многие особенности узла Wee1, включая ядерный цитоплазматический цикл, присутствие NDS и CDS, а также важную регуляторную роль протеасомной деградации (рис.). Мы предполагаем, что ядерная транслокация CDC25C, в конечном итоге способствующая прогрессированию G2 / M, находится под контролем цитоплазматической CDK2, CDK, ответственной за переходы G1 / S и S / G2 в комплексе с циклином E и циклином A, соответственно 4. Несколько результаты подтверждают эту гипотезу. Во-первых, в результате успешного завершения фазы S клеточные уровни циклина A будут увеличиваться во время фазы G2, что указывает на то, что высокие уровни циклина A-CDK2 коррелируют с началом митоза 7. Во-вторых, было продемонстрировано, что комплексы циклина A-CDK2 быстро перемещается между цитоплазмой и ядром, делая возможным нацеливание в цитоплазму CDC25C с помощью CDK2 8.В-третьих, активный CDK2 может фосфорилировать CDC25C по остатку Thr130, передавая сигнал CDC25C для ядерной транслокации и инициируя переход G2 / M 83, 84. В свою очередь, это фосфорилирование, как было показано, вызывает высвобождение 14-3-3, который защищает фосфорилированные Остаток Ser216 CDC25C в CDC CDC25C, позволяющий слабую ассоциацию с PP1 — серин / треонинфосфатазой — и последующее дефосфорилирование Ser216. Поскольку 14-3-3-связанный CDC25C быстро перемещается в цитоплазму, мы предполагаем, что такая роль CDK2 может поэтому быть локализована только в цитоплазме 85.

Узел CDC25C. Узел CDC25C характеризуется циклическим циклом ядерной цитоплазмы, который регулирует его влияние на продвижение G2 / M. После успешного завершения фазы S и G2 CDK2 запускает CDC25C для ядерной транслокации, которая впоследствии обеспечивается PP1 и комплексом PLK1-CK2. Когда он достигает NDS, нацеливание с помощью активированного CDK1 стимулирует активность CDC25C в отношении комплекса CDK1-Cyclin B1, в то время как CHK1 управляет цитоплазматической транслокацией как напрямую, так и через PP2A / B56δ.Вернувшись в цитоплазму, в CDS, CDC25C может быть либо примирован для повторного входа в ядро ​​с помощью CDK2, либо нацелен на убиквитин-опосредованную протеасомную деградацию.

PP1 остается связанным с CDC25C во время его ядерной транслокации, облегчая его собственное ядерное перемещение 86. Дефосфорилирование Ser216 делает возможным двойное фосфорилирование CDC25C с помощью комплекса, состоящего из PLK1 и CK2. Активированный PLK1 может фосфорилировать CDC25C по Ser198. Поскольку этот остаток расположен в сигнале ядерного экспорта (NES), PLK1 тем самым в конечном итоге способствует удержанию ядра, предотвращая последующее исключение ядра 17.Более того, активный CK2 фосфорилирует остаток Thr236 CDC25C, создавая сигнал ядерной локализации и опосредуя связывание комплекса импортин-α / β, который впоследствии перемещает CDC25C к ядру 87.

Ядерный тройной фосфорилированный CDC25C ^{T130 / S198 / T236} , который слабо связан с PP1, может быть обозначен как NDS CDC25C, поскольку и CDK1, и CHK1 конкурируют за фосфорилирование, чтобы определить его судьбу. Способствуя вступлению в митоз, CDK1 может фосфорилировать остаток Ser214 как часть петли положительной обратной связи, позволяя CDC25C выполнять свою функцию фосфатазы на CDK1 14, 88.Более того, фосфорилирование Ser214 усиливает ассоциацию с PP1, дополнительно стабилизируя активную форму CDC25C 86. Активирующее дефосфорилирование его целевой CDK1, скорее всего, потребляет фосфорилированный остаток Ser214 CDC25C, поскольку не было описано фосфатазы для нацеливания на этот остаток и дефосфорилирования какого-либо других остатков приведет к быстрой транслокации в цитоплазму. Потребление остатка Ser214 CDC25C снова ослабляет ассоциацию с PP1 и эффективно возвращает CDC25C в NDS CDC25C.

В противоположность действию CDK1, CHK1 может фосфорилировать NDS CDC25C по остатку Ser216, способствуя исключению ядра и вызывая диссоциацию PP1 54, 86. Более того, активный CHK1 вызывает образование активного комплекса PP2AD / B56δ и последующее дефосфорилирование Thr130 остаток CDC25C 57. Впоследствии связывание 14-3-3 стабилизирует фосфорилированный остаток Ser216 и способствует удалению фосфорилированного остатка Ser198 посредством индукции конформационного изменения 54. Поскольку это приводит к тому, что сигнал исключения ядра снова становится нефосфорилированным, 14-3- 3 связывание индуцирует цитоплазматическую транслокацию CDC25C 85,89.Цитоплазматически локализованный, связанный 14-3-3 фосфорилированный CDC25C может быть обозначен как CDS CDC25C, поскольку CDK2 конкурирует за это состояние с аппаратом клеточной деградации, чтобы снова инициировать ядерную транслокацию CDC25C.

Расположенный в цитоплазме фосфорилированный CDC25C ^S216 распознается компонентами путей деградации, способствуя остановке G2 и задействовав фосфорилированный остаток S216 как фосфодегрон 90. В отличие от Wee1, точные игроки, участвующие в деградации CDC25C, все еще неясны.Однако несколько наблюдений свидетельствуют в пользу того, что CDC25C и Wee1 следуют идентичным путям деградации. Во-первых, эксперименты с арсенитом подтвердили, что убиквитин-опосредованная протеасомная деградация ответственна за деградацию CDC25C 91. Во-вторых, CDC25A, гомолог CDC25C, который преимущественно активен в переходе G1 / S, как сообщается, убиквитинируется E3-лигазой. SCF ^β-TrCP 92, хотя роль комплекса, способствующего анафазе, или циклосомы (APC / C) также описана 93.

Узел CDK1

Хотя CDK1 может образовывать комплекс с др. Циклинами раньше в клеточном цикле, комплекс Cyclin B1-CDK1 отвечает за запуск митотического начала. Комплекс циклин B1-CDK1 локализуется в цитоплазме во время интерфазы, но быстро перемещается в ядро, чтобы вызвать переход G2 / M во время профазы 7, 94. CDK1 активируется в цитоплазме с помощью циклин-активирующей киназы (САК) посредством фосфорилирования его Thr161-части. (Рис.), До его ядерной транслокации 13, 95.CAK представляет собой киназный комплекс, состоящий из CDK7 и Cyclin H, и регулируется петлей положительной обратной связи через Cyclin B1-CDK1 96, 97. Этот комплекс активирует CAK путем фосфорилирования остатков Ser164 и Thr170 CDK7, усиливая его собственную активацию 98, 99. Активированный комплекс Cyclin B1-CDK1 распознается PLK1, который, как первоначально предполагалось, сигнализирует комплексу для импорта-β-опосредованного ядерного захвата посредством фосфорилирования остатков Ser133 и Ser147 циклина B1 8, 100, 101. Позже это предполагалось. что фосфорилирование комплекса с помощью PLK1 предотвращает последующее исключение из ядра, поскольку оба остатка расположены внутри Cyclin B1 NES 8, 35, 102, хотя нацеливание на остаток Ser133 с помощью PLK1 остается спорным 103.Образование комплекса PLK1 с CK2 может предложить объяснение для разрешения этого противоречия, поскольку остаток Ser133 Cyclin B может быть нацелен на CK2, тогда как Ser147 Cyclin B нацелен на PLK1. Во-первых, поскольку PLK1-опосредованная регуляция субклеточной локализации CDC25C (рис.) И Wee1 (рис.) Осуществляется в комплексе с CK2, аналогичный механизм PLK1 в сочетании с CK2, вероятно, также будет задействован в цитоплазматическом к-ядерному транспорту Cyclin B1-CDK1.Более того, образование двух фосфорилированных остатков на циклине B1 увеличивает вероятность участия двух киназ. Совсем недавно важная работа предоставила важную новую информацию о противоречиях, связанных с ролью PLK1 и, возможно, CK2, в содействии ядерной локализации циклина B1-CDK1, путем демонстрации того, что ядерный циклин B1-CDK1 сам по себе способствует увеличению проникновения в ядро ​​цитоплазматического циклина. B1-CDK1, хотя точный механизм, с помощью которого это происходит, еще не выяснен 104.Интересно, что наблюдение, что фосфорилированный циклин B1 позволяет комплексу циклин B1-CDK1 стабильно связываться с митотическим хроматином, может предполагать, что фосфорилирование циклина B1 с помощью PLK1 и, возможно, CK2 важно для поддержания фракции ядерного циклина B1-CDK1 105.

В ядре активный Cyclin B1-CDK1 может быть обозначен как NDS циклина B1-CDK1, поскольку Wee1 конкурирует за это состояние с активностью, способствующей митозу, CDK1. Более того, активный комплекс Cyclin B1-CDK1 напрямую противодействует эффектам CHK1 в ядре, конкурируя за NDS Wee1 и CDC25C и примируя CHK1 для ядерного экспорта (рис.). Wee1 фосфорилирует NDS циклина B1-CDK1 по остатку Tyr15 CDK1, модификации, которой противодействует дефосфорилирование с помощью CDC25C. Фосфорилирование Tyr15 инактивирует CDK1 и сигнализирует ему об опосредованном Crm-1 (экспортин-1) исключении ядра 8, 106, 107. До сих пор механизм, ответственный за цитоплазматическую транслокацию, не идентифицирован, но требуется дефосфорилирование NES циклина B1. указывает на обильные ядерные фосфатазы, такие как PP2A и PP1, как на вероятных кандидатов, ответственных за этот процесс 108.

В цитоплазме MYT1 конкурирует с еще не идентифицированной фосфатазой за фосфорилированный CDS Cyclin B1-CDK1 ^Y15 . MYT1 дополнительно объединяет инактивацию CDK1 путем фосфорилирования остатка Thr14 CDK1, секвестрируя его из ядерного цитоплазматического цикла 109. Такая цитоплазматическая роль MYT1 объясняет наблюдение, что это не является существенным для остановки клеточного цикла в нормальных условиях с низкими уровнями ДНК. повреждение, но MYT1 действительно усиливает блокировку контрольных точек G2, индуцированную Wee1, благодаря своим эффектам на CDK1 после обширного повреждения ДНК 110.

Действительно, было показано, что избыточная продукция MYT1 секвестрирует CDK1 в цитоплазме, предотвращая ядерный импорт 109. Может ли фосфорилированный остаток Thr14 действовать как фосфодегрон, пока не ясно, но наблюдение, что уровни CDK1 не изменяются после сверхэкспрессии MYT1, предполагает против роли MYT1 в опосредованной убиквитином протеасомной деградации CDK1. Скорее, Cyclin B1-CDK1 регулирует деградацию Cyclin B1 в поздних митозах посредством фосфорилирования APC / C 108, 111, 112.В качестве альтернативы, секвестрированный циклин B1-CDK1 ^{T14 / Y15} может быть повторно введен в ядерный цитоплазматический цикл и впоследствии дополнительно дефосфорилирован еще не идентифицированной фосфатазой, что делает возможной реактивацию CDK1 с помощью CAK 113. Способность CDC14 совместно дефосфорилировать CDK1 при выходе из митоза. с его цитоплазматической локализацией во время фазы G2 делает его потенциальным кандидатом для этого действия, хотя и PP1, и PP2A также оказались вероятными кандидатами на дефосфорилирование CDK1 77,108.

Значение модели на основе узлов

Модель на основе узлов контрольной точки G2 представляет собой строго контролируемый биомолекулярный переключатель. Узлы Wee1 и CDC25C представляют собой два рычага шкалы, на которые узлы CHK1 и PLK1 (изображенные как веса и гидравлические рычаги) влияют, чтобы перейти в активную или неактивную форму CDK1 (рис.). Даже в нормальных условиях роста клетки всегда будут останавливаться по прибытии в контрольную точку G2 из-за высокой активности CHK1 в результате стресса репликации.Этот арест позволяет восстановить ДНК. При успешном восстановлении каждого повреждения ДНК уровни PLK1 будут повышаться, постоянно приводя к большему балансу на шкале. Когда активность PLK1 превышает активность CHK1, баланс смещается в сторону прогрессирования G2 / M, и петли обратной связи между CDK1 и CDC25C, Wee1 и CHK1 гарантируют, что баланс не может быть восстановлен и по существу становится необратимым биомолекулярным переключателем. В соответствии с этим, недавняя работа продемонстрировала, что восстановление контрольных точек G2 зависит от порога активности PLK1 и может происходить в присутствии ряда сигналов остаточного повреждения ДНК, приводя к гетерогенности в точности воспроизведения контрольных точек 23.

Функциональные последствия баланса контрольной точки G2. Контрольную точку G2 можно рассматривать как шкалу, где обе ветви представлены первичными регуляторными узлами Wee1 и CDC25C, которые поворачиваются вокруг центрального узла CDK1 и наклоняются в сторону либо активного, либо неактивного CDK1. Плечи весов, в свою очередь, уравновешиваются вторичными регулирующими узлами CHK1 и PLK1, которые действуют как грузы или гидравлические насосы. После завершения фаз S и G2 высокая активность узла CHK1 склоняет чашу весов в пользу неактивного CDK1.С увеличением репарации ДНК активность узла CHK1 постепенно снижается, в то время как активность узла PLK1 комплементарно увеличивается. Этот сдвиг сначала выравнивает баланс и, в конечном итоге, склоняет контрольную точку G2 в пользу активности CDK1 и прогрессии G2 / M.

Хотя еще не все детали контрольной точки G2 были решены, модель контрольной точки G2, предложенная здесь, уже предлагает поддержку в объяснении некоторых из до сих пор плохо изученных наблюдений в исследованиях с использованием ингибиторов, влияющих на контрольную точку.Взаимодействие между различными узлами контрольной точки G2 в основном определяется влиянием на состояния принятия решения Wee1, CDC25C и CDK1 (рис.). Следовательно, ингибирование ключевых белков, влияющих на определенные состояния принятия решения, может приводить к внутриклеточному накоплению или, альтернативно, к изменениям уровня деградации мишени.

Функциональный результат состояний принятия решения, задействованных в контрольной точке G2. NDS и CDS можно рассматривать как конформации белка, на которые нацелены конкурирующие факторы, определяющие функциональное влияние узла на контрольную точку G2.Конкурирующие факторы можно рассматривать как магниты, которые тянут с разной силой, тем самым направляя белок к определенной конформации. Далее изображены (A) Wee1 CDS, (B) Wee1 NDS, (C) CDC25C CDS, (D) CDC25C NDS, (E) CHK1 CDS, (F) CHK1 NDS, (G) CDK1 CDS и (H) CDK1 NDS.

Напр., Как сообщалось, ингибирование CHK1 д. Приводить к усилению экспорта из ядра в цитоплазму и последующей деградации Wee1, поскольку его конкуренция с CDK1 нарушена. С другой стороны, однако, ингибирование KD Wee1 небольшой молекулой не влияет на состояния принятия решения и, следовательно, не изменяет клеточные уровни Wee1 114.Эффект ингибирования CHK1 на CDC25C будет прямо противоположным. Поскольку CHK1 обычно влияет на NDS CDC25C посредством передачи сигналов для экспорта из ядра в цитоплазму, ингибирование CHK1 с использованием малых молекул будет приводить к накоплению CDC25C в ядре и, таким образом, к увеличению клеточных уровней в результате снижения деградации. Об этом сообщалось для его гомолога CDC25A и, таким образом, могло быть также верно для CDC25C 62, 115, 116. Более того, предполагаемый ядерный цитоплазматический цикл CHK1 подразумевает, что ингибирование локализованного в ядре CHK1 приводит к накоплению в ядре и, следовательно, предотвращению деградации CHK1, таким образом, приводя к увеличению клеточных уровней CHK1, как было обнаружено 117.Ингибирование PLK1 может привести к накоплению CDC25C в цитоплазме, поскольку ядерное поглощение CDC25C ингибируется, когда он недоступен для деградации, как было продемонстрировано с использованием антисмысловых мРНК 118. В качестве последнего примера, ингибирование PLK1 также может приводить к увеличению уровней белка Wee1 после деградации Wee1 ослабляется на CDS Wee1. В совокупности предлагаемая модель позволяет точно прогнозировать эффекты вмешательства в контрольную точку G2, что делает ее высокоинформативным инструментом для разработки методов лечения, направленных на вмешательство в контрольную точку G2.

Выводы и направления на будущее

Хотя последние два десятилетия сформировали основу биомолекулярной сети контрольно-пропускного пункта G2, остается много интересных вопросов. Несколько этапов сети G2 еще предстоит выяснить во всех деталях, среди которых фактор, ответственный за активность цитоплазматической фосфатазы в отношении циклина B1-CDK1, прайминговый сигнал циклина B1-CDK1 для экстраядерного транспорта, E3-лигаза, ответственная за деградацию CDC25C, и специфическая регуляторная субъединица PP2A, определяющая распознавание субстрата CHK1.Более того, цитоплазматическая активация комплекса Cyclin B1-CDK1 имеет интересные последствия для регуляторного эффекта CDK1 на узлы Wee1 и CDC25C, хотя степень, в которой этот подразумеваемый способ действий действительно влияет на узловой баланс контрольной точки G2, еще не выяснен. определяется. С одной стороны, цитоплазматически активный CDK1 может уже активировать CDC25C для нацеленной на CDK1 активности до проникновения в ядро, возможно, предотвращая ядерное фосфорилирование с помощью CHK1 и тем самым ослабляя контроль CHK1 на NDS CDC25C.С другой стороны, он может напрямую противодействовать эффекту фосфатазы CDC14A на цитоплазматический Wee1, способствуя повторному проникновению Wee1 в NDS Wee1 путем его фосфорилирования и последующего содействия деградации Wee1. Вместе это дало бы возможность CDK1 одновременно способствовать прогрессированию G2 / M в ядре и цитоплазме, увеличивая силу молекулярного переключателя G2.

Хотя это выходит за рамки этого обзора, интересно отметить, что многие отчеты предполагают роль нескольких игроков контрольных точек G2 или их гомологов в регулировании контрольных точек G1 или intra-S.Среди них Cyclin A, CDK2, CDC25A, CAK, PP2A, PP1, CHK1 / 2, PLK2 / 3 и Wee1 39, 119, 120, 121, 122, 123, 124. Таким образом, это множество сходств с контрольной точкой G2 предполагает что контрольная точка G1 состоит из аналогичной узловой системы с ядерным цитоплазматическим циклом, состояниями принятия решений и важными этапами деградации. Поэтому возникают интересные вопросы о сходствах и различиях между контрольными точками G1 и G2 и их последствиях для воздействия вмешательства контрольной точки G2 на контрольную точку G1.

Таким образом, контрольная точка G2 — это гениальный молекулярный переключатель на основе узлов, результат которого определяется взаимодействием узлов PLK1, CHK1, Wee1, CDC25C и CDK1, на которые влияют сигналы повреждения и репарации ДНК. Вместе эта система позволяет клетке запутанно передавать информацию о состоянии ДНК в механизм клеточного цикла, что делает ее ключевым процессом в поддержании целостности клетки.

Вклад авторов

MG, AT и IB провели поиск в литературе; MG, AT, IB и OT разработали модель; Рукопись написали MG, OT, JB и TW.

Доступность данных

Дополнительная информация

Рис. S1. Полный обзор сети КПП G2.

Видео S1. Контрольная точка G2 — молекулярный коммутатор на основе узлов.

Благодарности

Авторы благодарят MHW Crommentuijn за ценную техническую помощь с дополнительным видео S1.

Ссылки

1. Элледж SJ (1996) Контрольные точки клеточного цикла: предотвращение кризиса идентичности.Наука 274, 1664–1672. [PubMed] [Google Scholar] 2. Medema RH и Macurek L (2012) Контроль контрольных точек и рак. Онкоген 31, 2601–2613. [PubMed] [Google Scholar] 4. Malumbres M и Barbacid M (2009) Клеточный цикл, CDK и рак: меняющаяся парадигма. Нат Рев Рак 9, 153–166. [PubMed] [Google Scholar] 5. Стюарт М. (2007) Молекулярный механизм цикла импорта ядерного белка. Нат Рев Мол Cell Biol 8, 195–208. [PubMed] [Google Scholar] 6. Deibler RW и Kirschner MW (2010) Количественное восстановление митотической активации CDK1 в экстрактах соматических клеток.Mol Cell 37, 753–767. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 7. Pines J и Hunter T (1991) Человеческие циклины A и B1 по-разному расположены в клетке и подвергаются ядерному транспорту, зависящему от клеточного цикла. J Cell Biol 115, 1–17. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 8. Jackman M, Kubota Y, den Elzen N, Hagting A и Pines J (2002) Комплексы циклина A и циклина E-Cdk перемещаются между ядром и цитоплазмой. Клетка Mol Biol 13, 1030–1045. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 9.Reinhardt HC и Yaffe MB (2013) Phospho-Ser / Thr-связывающие домены: навигация по клеточному циклу и ответ на повреждение ДНК. Нат Рев Мол Cell Biol 14, 563–580. [PubMed] [Google Scholar] 10. De Witt Hamer PC, Mir SE, Noske D, Van Noorden CJ и Wurdinger T (2011) Нацеливание на киназу WEE1 в сочетании с терапией рака, повреждающей ДНК, катализирует митотическую катастрофу. Clin Cancer Res 17, 4200–4207. [PubMed] [Google Scholar] 11. Heald R, McLoughlin M и McKeon F (1993) Human wee1 поддерживает митотическое время, защищая ядро ​​от цитоплазматически активированной киназы Cdc2.Клетка 74, 463–474. [PubMed] [Google Scholar] 12. Ватанабе Н., Брум М. и Хантер Т. (1995) Регулирование тирозин-15-киназы WEE1Hu CDK человека во время клеточного цикла. EMBO J 14, 1878–1891. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 13. Boutros R, Lobjois V и Ducommun B (2007) Фосфатазы CDC25 в раковых клетках: ключевые игроки? Хорошие цели? Нат Рев Рак 7, 495–507. [PubMed] [Google Scholar] 14. Булавин Д.В., Хигашимото Ю., Демиденко З.Н., Мик С., Грейвс П., Филлипс С., Чжао Х., Муди С.А., Аппелла Е, Пивница ‐ Вормс Х. et al. (2003) Двойное фосфорилирование контролирует фосфатазы Cdc25 и митотический вход.Nat Cell Biol 5, 545–551. [PubMed] [Google Scholar] 15. Harvey SL, Charlet A, Haas W, Gygi SP и Kellogg DR (2005) Cdk1-зависимая регуляция митотического ингибитора Wee1. Клетка 122, 407–420. [PubMed] [Google Scholar] 16. Watanabe N, Arai H, Iwasaki J, Shiina M, Ogata K, Hunter T и Osada H (2005) Фосфорилирование циклин-зависимой киназы (CDK) дестабилизирует соматический Wee1 множеством путей. Proc Natl Acad Sci USA 102, 11663–11668. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 17. Toyoshima ‐ Morimoto F, Taniguchi E and Nishida E (2002) Plk1 способствует ядерной транслокации человеческого Cdc25C во время профазы.EMBO Rep 3, 341–348. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 18. Debatisse M, El Achkar E и Dutrillaux B (2006) Общие хрупкие сайты, вложенные на стыках ранней и поздней репликации хромосомных полос: цис-действующие компоненты контрольной точки G2 / M? Клеточный цикл 5, 578–581. [PubMed] [Google Scholar] 19. Sorensen CS и Syljuasen RG (2012) Защита целостности генома: киназы контрольных точек ATR, CHK1 и WEE1 сдерживают активность CDK во время нормальной репликации ДНК. Нуклеиновые кислоты Res 40, 477–486.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 20. Helmrich A, Ballarino M, Nudler E and Tora L (2013) Встречи с транскрипцией и репликацией, последствия и геномная нестабильность. Нат Структ Мол Биол 20, 412–418. [PubMed] [Google Scholar] 21. Bermejo R, Lai MS и Foiani M (2012) Предотвращение репликационного стресса для поддержания стабильности генома: разрешение конфликтов между репликацией и транскрипцией. Mol Cell 45, 710–718. [PubMed] [Google Scholar] 22. Macurek L, Lindqvist A, Lim D, Lampson MA, Klompmaker R, Freire R, Clouin C, Taylor SS, Yaffe MB и Medema RH (2008) Polo-like kinase-1 активируется полярным сиянием A, чтобы способствовать восстановлению контрольных точек.Природа 455, 119–123. [PubMed] [Google Scholar] 23. Лян Х., Эспозито А., Де С., Бер С., Коллин П., Сурана У. и Венкитараман А.Р. (2014) Гомеостатический контроль поло-подобной киназы-1 порождает негенетическую гетерогенность в точности и синхронизации контрольных точек G2. Nat Commun 5, 4048. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 24. Seki A, Coppinger JA, Jang CY, Yates JR и Fang G (2008) Bora и киназа Aurora a совместно активируют киназу Plk1 и контролируют митотический вход. Наука 320, 1655–1658. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 25.Lee MS, Huang YH, Huang SP, Lin RI, Wu SF и Li C (2009) Идентификация сигнала ядерной локализации в домене поло-бокса Plk1. Биохим Биофиз Акта 1793, 1571–1578. [PubMed] [Google Scholar] 26. Golsteyn RM, Schultz SJ, Bartek J, Ziemiecki A, Ried T. и Nigg EA (1994) Анализ клеточного цикла и хромосомная локализация человеческого Plk1, предполагаемого гомолога митотических киназ Drosophila polo и Saccharomyces cerevisiae5 . J Cell Sci 107 (Pt 6), 1509–1517.[PubMed] [Google Scholar] 27. Foley EA and Kapoor TM (2013) Прикрепление микротрубочек и передача сигналов контрольной точки сборки веретена на кинетохоре. Нат Рев Мол Cell Biol 14, 25–37. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 28. Lens SM, Voest EE и Medema RH (2010) Общие и отдельные функции поло-подобных киназ и полярных киназ при раке. Нат Рев Рак 10, 825–841. [PubMed] [Google Scholar] 29. Beck J, Maerki S, Posch M, Metzger T, Persaud A, Scheel H, Hofmann K, Rotin D, Pedrioli P, Swedlow JR et al. (2013) Зависящая от убиквитилирования локализация PLK1 в митозе.Nat Cell Biol 15, 430–439. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 30. Bruinsma W, Aprelia M, Kool J, Macurek L, Lindqvist A и Medema RH (2015) Пространственное разделение фосфорилирования и активности Plk1. Фронт Онкол 5, 132. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 31. Watanabe N, Arai H, Nishihara Y, Taniguchi M, Watanabe N, Hunter T and Osada H (2004) киназы M-фазы индуцируют фосфозависимое убиквитинирование соматического Wee1 с помощью SCFbeta-TrCP. Proc Natl Acad Sci USA 101, 4419–4424. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 32.Nakajima H, Toyoshima-Morimoto F, Taniguchi E and Nishida E (2003) Идентификация консенсусного мотива для фосфорилирования Plk (Polo-like kinase) показывает Myt1 как субстрат Plk1. J Biol Chem 278, 25277–25280. [PubMed] [Google Scholar] 33. Liu F, Stanton JJ, Wu Z и Piwnica-Worms H (1997) Киназа Myt1 человека предпочтительно фосфорилирует Cdc2 по треонину 14 и локализуется в эндоплазматическом ретикулуме и комплексе Гольджи. Mol Cell Biol 17, 571–583. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 34.Villeneuve J, Scarpa M, Ortega-Bellido M и Malhotra V (2013) MEK1 инактивирует Myt1, чтобы регулировать фрагментацию мембраны Гольджи и митотический вход в клетки млекопитающих. EMBO J 32, 72–85. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 35. Toyoshima ‐ Morimoto F, Taniguchi E, Shinya N, Iwamatsu A and Nishida E (2001) Поло-подобная киназа 1 фосфорилирует циклин B1 и направляет его в ядро ​​во время профазы. Природа 410, 215–220. [PubMed] [Google Scholar] 36. Витале I, Галлуцци Л., Кастедо М. и Кремер Г. (2011) Митотическая катастрофа: механизм предотвращения геномной нестабильности.Нат Рев Мол Cell Biol 12, 385–392. [PubMed] [Google Scholar] 37. Shiloh Y и Ziv Y (2013) Протеинкиназа ATM: регулирование клеточного ответа на генотоксический стресс и многое другое. Нат Рев Мол Cell Biol 14, 197–210. [PubMed] [Google Scholar] 38. Abraham RT (2001) Передача сигналов контрольной точки клеточного цикла через киназы ATM и ATR. Genes Dev 15, 2177–2196. [PubMed] [Google Scholar] 39. Бартек Дж. И Лукас Дж. (2003) Киназы Chk1 и Chk2 в контроле контрольных точек и раке. Раковая клетка 3, 421–429. [PubMed] [Google Scholar] 40.Jazayeri A, Falck J, Lukas C, Bartek J, Smith GC, Lukas J and Jackson SP (2006) ATM- и зависимая от клеточного цикла регуляция ATR в ответ на двухцепочечные разрывы ДНК. Nat Cell Biol 8, 37–45. [PubMed] [Google Scholar] 41. Li P, Goto H, Kasahara K, Matsuyama M, Wang Z, Yatabe Y, Kiyono T and Inagaki M (2012) P90 RSK размещает Chk1 в ядре для мониторинга целостности генома во время пролиферации клеток. Клетка Mol Biol 23, 1582–1592. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 42. Гатеи М., Слоупер К., Соренсен С., Сильюасен Р., Фальк Дж., Хобсон К., Сэвидж К., Лукас Дж., Чжоу ББ, Бартек Дж. et al. (2003) Мутировавшая при атаксии телеангиэктазии (ATM) и NBS1-зависимое фосфорилирование Chk1 на Ser-317 в ответ на ионизирующее излучение.J Biol Chem 278, 14806–14811. [PubMed] [Google Scholar] 43. Sorensen CS, Syljuasen RG, Falck J, Schroeder T, Ronnstrand L, Khanna KK, Zhou BB, Bartek J и Lukas J (2003) Chk1 регулирует контрольную точку S-фазы, сочетая физиологический оборот и индуцированный ионизирующим излучением ускоренный протеолиз Cdc25A. Раковая клетка 3, 247–258. [PubMed] [Google Scholar] 44. Zhao H и Piwnica-Worms H (2001) пути контрольных точек, опосредованные ATR, регулируют фосфорилирование и активацию Chk1 человека. Mol Cell Biol 21, 4129–4139.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 45. Walworth NC и Bernards R (1996) рад-зависимый ответ кодируемой chk1 протеинкиназы в контрольной точке повреждения ДНК. Наука 271, 353–356. [PubMed] [Google Scholar] 46. Clarke CA и Clarke PR (2005) ДНК-зависимое фосфорилирование Chk1 и Claspin в бесклеточной системе человека. Biochem J 388, 705–712. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 47. Goto H, Izawa I, Li P и Inagaki M (2012) Новое регулирование киназы контрольной точки 1: является ли киназа контрольной точки 1 хорошим кандидатом для противораковой терапии? Рак Науки 103, 1195–1200.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 48. Lu X, Nannenga B и Donehower LA (2005) PPM1D дефосфорилирует Chk1 и p53 и отменяет контрольные точки клеточного цикла. Genes Dev 19, 1162–1174. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 49. Шалтиэль И.А., Креннинг Л., Брюинсма В. и Медема Р.Х. (2015) То же самое, только разные — контрольные точки повреждения ДНК и их изменение на протяжении всего клеточного цикла. J Cell Sci 128, 607–620. [PubMed] [Google Scholar] 50. Carlessi L, Buscemi G, Fontanella E and Delia D (2010) Механизм обратной связи с протеинфосфатазой регулирует базальное фосфорилирование киназы Chk2 в отсутствие повреждения ДНК.Биохим Биофиз Акта 1803, 1213–1223. [PubMed] [Google Scholar] 51. Kasahara K, Goto H, Enomoto M, Tomono Y, Kiyono T and Inagaki M (2010) 14-3-3-гамма опосредует протеолиз Cdc25A, чтобы блокировать преждевременный митотический вход после повреждения ДНК. EMBO J 29, 2802–2812. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 54. Peng CY, Graves PR, Thoma RS, Wu Z, Shaw AS и Piwnica ‐ Worms H (1997) Контроль контрольных точек митоза и G2: регуляция связывания белка 14-3-3 путем фосфорилирования Cdc25C на серин-216. Наука 277, 1501–1505.[PubMed] [Google Scholar] 55. Mumby M (2007) PP2A: открытие противоопухолевого супрессора. Клетка 130, 21–24. [PubMed] [Google Scholar] 56. Janssens V и Goris J (2001) Протеиновая фосфатаза 2A: строго регулируемое семейство серин / треониновых фосфатаз, участвующих в росте клеток и передаче сигналов. Biochem J 353, 417–439. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 57. Марголис С.С., Перри Дж. А., Форестер К. М., Натт Л.К., Гуо Й., Жардим М.Дж., Томениус М.Дж., Фрил С.Д., Дарбанди Р., Ан Дж. Х. et al. (2006) Роль фосфатазы PP2A / B56delta в регуляции высвобождения 14-3-3 из Cdc25 для контроля митоза.Клетка 127, 759–773. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 58. Wong PY, Ma HT, Lee H-J и Poon RYC (2016) MASTL (Greatwall) регулирует ответы на повреждения ДНК, координируя митотический вход после восстановления контрольной точки и активации APC / C. Научный представитель 6, 22230. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 59. Leung-Pineda V, Ryan CE и Piwnica-Worms H (2006) Фосфорилирование Chk1 с помощью ATR антагонизируется цепью Chk1-регулируемой протеинфосфатазы 2A. Mol Cell Biol 26, 7529–7538. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 60.Palii SS, Cui Y, Innes CL и Paules RS (2013) Анализ клеточных ответов на облучение посредством целенаправленных нарушений цепи ATM-CHK1-PP2A. Клеточный цикл 12, 1105–1118. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 61. Dozier C, Bonyadi M, Baricault L, Tonasso L и Darbon JM (2004) Регулирование фосфорилирования Chk2 посредством взаимодействия с протеинфосфатазой 2A через ее регуляторную субъединицу B ’. Биологическая ячейка 96, 509–517. [PubMed] [Google Scholar] 62. Заблудофф С.Д., Дэн К., Грондин М.Р., Шихи А.М., Эшвелл С., Калеб Б.Л., Грин С., Хэй Х.Р., Хорн К.Л., Джанетка Дж.В. et al. (2008) AZD7762, новый ингибитор киназы контрольных точек, приводит к отмене контрольных точек и усиливает терапию, направленную на ДНК.Мол Рак Тер 7, 2955–2966. [PubMed] [Google Scholar] 63. Janssens V, Longin S и Goris J (2008) Сборка холофермента PP2A: в cauda venenum (жало в хвосте). Тенденции Biochem Sci 33, 113–121. [PubMed] [Google Scholar] 64. Yan Y, Cao PT, Greer PM, Nagengast ES, Kolb RH, Mumby MC и Cowan KH (2010) Протеиновая фосфатаза 2A играет важную роль в активации ответа контрольной точки G2 / M, индуцированного гамма-облучением. Онкоген 29, 4317–4329. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 65. Эномото М., Гото Х., Томоно Й., Касахара К., Цудзимура К., Кийоно Т. и Инагаки М. (2009) Новая петля положительной обратной связи между Cdk1 и Chk1 в ядре во время перехода G2 / M.J Biol Chem 284, 34223–34230. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 66. Kramer A, Mailand N, Lukas C, Syljuasen RG, Wilkinson CJ, Nigg EA, Bartek J и Lukas J (2004) Chk1, ассоциированный с центросомами, предотвращает преждевременную активацию киназы cyclin-B-Cdk1. Nat Cell Biol 6, 884–891. [PubMed] [Google Scholar] 67. Zhang YW, Brognard J, Coughlin C, You Z, Dolled-Filhart M, Aslanian A, Manning G, Abraham RT и Hunter T (2009). Белок F-бокса Fbx6 регулирует стабильность Chk1 и клеточную чувствительность к стрессу репликации.Mol Cell 35, 442–453. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 68. Mir SE, De Witt Hamer PC, Krawczyk PM, Balaj L, Claes A, Niers JM, Van Tilborg AA, Zwinderman AH, Geerts D, Kaspers GJ et al. (2010) Анализ экспрессии киназы in silico идентифицирует WEE1 как привратник против митотической катастрофы в глиобластоме. Раковая клетка 18, 244–257. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 69. O’Connell MJ, Raleigh JM, Verkade HM и Nurse P (1997) Chk1 — это киназа wee1 в контрольной точке повреждения ДНК G2, ингибирующая cdc2 путем фосфорилирования Y15.EMBO J 16, 545–554. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 70. Baldin V и Ducommun B (1995) Субклеточная локализация киназы Wee1 человека регулируется во время клеточного цикла. J Cell Sci 108, 2425–2432. [PubMed] [Google Scholar] 71. Trepel J, Mollapour M, Giaccone G и Neckers L (2010) Нацеленность на динамический комплекс HSP90 при раке. Нат Рев Рак 10, 537–549. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 72. Моллапур М., Цуцуми С., Доннелли А.С., Биби К., Токита М.Дж., Ли М.Дж., Ли С., Морра Джи, Бурбулия Д., Скроггинс Б.Т. et al. (2010) Swe1Wee1-зависимое фосфорилирование тирозина Hsp90 регулирует отдельные аспекты функции шаперона.Mol Cell 37, 333–343. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 73. Goes FS и Martin J (2001) шаперонные комплексы Hsp90 необходимы для активности и стабильности дрожжевых протеинкиназ Mik1, Wee1 и Swe1. Eur J Biochem 268, 2281–2289. [PubMed] [Google Scholar] 75. McGrath DA, Balog ER, Koivomagi M, Lucena R, Mai MV, Hirschi A, Kellogg DR, Loog M и Rubin SM (2013) Cks придает специфичность зависимым от фосфорилирования сигнальным путям CDK. Нат Структ Мол Биол 20, 1407–1414. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 76.Olsen BB, Kreutzer JN, Watanabe N, Holm T and Guerra B (2010) Картирование сайтов взаимодействия между киназой Wee1 и регуляторной бета-субъединицей протеинкиназы CK2. Int J Oncol 36, 1175–1182. [PubMed] [Google Scholar] 77. Ovejero S, Ayala P, Bueno A и Sacristan MP (2012) Cdc14A человека регулирует стабильность Wee1, противодействуя CDK-опосредованному фосфорилированию. Клетка Mol Biol 23, 4515–4525. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 78. Yde CW, Olsen BB, Meek D, Watanabe N и Guerra B (2008) Регуляторная бета-субъединица протеинкиназы CK2 регулирует развитие клеточного цикла в начале митоза.Онкоген 27, 4986–4997. [PubMed] [Google Scholar] 79. Litchfield DW (2003) Протеинкиназа CK2: структура, регуляция и роль в клеточных решениях о жизни и смерти. Biochem J 369, 1–15. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 80. Lindqvist A, Källström H, Lundgren A, Barsoum E and Rosenthal CK (2005) Cdc25B кооперируется с Cdc25A для индукции митоза, но играет уникальную роль в активации циклина B1-Cdk1 в центросоме. J Cell Biol 171, 35–45. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 81. Ling MT, Lee G, Origanti S, White LS, Sun J, Stappenbeck TS и Piwnica ‐ Worms H (2011) Вклад фосфатаз CDC25 в пролиферацию кишечных эпителиальных стволовых клеток и клеток-предшественников.PLoS One 6, е15561. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 82. Боллен М., Герлих Д.В. и Лесаж Б. (2009) Митотические фосфатазы: от входных ограждений до выходных направляющих. Тенденции Cell Biol 19, 531–541. [PubMed] [Google Scholar] 83. Guadagno TM и Newport JW (1996) Cdk2 kinase необходима для вступления в митоз в качестве позитивного регулятора активности Cdc2-cyclin B киназы. Клетка 84, 73–82. [PubMed] [Google Scholar] 84. Margolis SS, Walsh S, Weiser DC, Yoshida M, Shenolikar S и Kornbluth S (2003) Контроль PP1 перехода в M-фазу осуществляется посредством 14-3-3-регулируемого дефосфорилирования Cdc25.EMBO J 22, 5734–5745. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 85. Graves PR, Lovly CM, Uy GL и Piwnica-Worms H (2001) Локализация человеческого Cdc25C регулируется как ядерным экспортом, так и связыванием с белками 14-3-3. Онкоген 20, 1839–1851. [PubMed] [Google Scholar] 86. Margolis SS, Perry JA, Weitzel DH, Freel CD, Yoshida M, Haystead TA и Kornbluth S (2006) Роль PP1 в Cdc2 / Cyclin B-обеспечиваемой активации положительной обратной связи Cdc25. Клетка Mol Biol 17, 1779–1789. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 87.Schwindling SL, Noll A, Montenarh M и Gotz C (2004) Мутация сайта фосфорилирования CK2 в cdc25C нарушает связывание импортина альфа / бета и приводит к задержке в цитоплазме. Онкоген 23, 4155–4165. [PubMed] [Google Scholar] 88. Trunnell NB, Poon AC, Kim SY и Ferrell JE Jr (2011) Сверхчувствительность в регуляции Cdc25C с помощью Cdk1. Mol Cell 41, 263–274. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 89. Zeng Y and Piwnica-Worms H (1999) Повреждения ДНК и контрольные точки репликации у делящихся дрожжей требуют исключения из ядра фосфатазы Cdc25 посредством связывания 14-3-3.Mol Cell Biol 19, 7410–7419. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 90. Thanasoula M, Escandell JM, Suwaki N и Tarsounas M (2012) Активация контрольной точки ATM / ATR подавляет регуляцию CDC25C для предотвращения митотического входа с незакрытыми теломерами. EMBO J 31, 3398–3410. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 91. Chen F, Zhang Z, Bower J, Lu Y, Leonard SS, Ding M, Castranova V, Piwnica-Worms H and Shi X (2002) Арсенит-индуцированная деградация Cdc25C происходит через KEN-box и убиквитин-протеасомный путь.Proc Natl Acad Sci USA 99, 1990–1995. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 92. Busino L, Donzelli M, Chiesa M, Guardavaccaro D, Ganoth D, Dorrello NV, Hershko A, Pagano M и Draetta GF (2003) Деградация Cdc25A бета-TrCP во время S-фазы и в ответ на повреждение ДНК. Природа 426, 87–91. [PubMed] [Google Scholar] 93. Донзелли М., Скватрито М., Ганот Д., Хершко А., Пагано М. и Драетта Г.Ф. (2002) Двойной режим деградации фосфатазы Cdc25 A. EMBO J 21, 4875–4884. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 94.Bailly E, Pines J, Hunter T и Bornens M (1992) Цитоплазматическое накопление циклина B1 в клетках человека: ассоциация с устойчивым к детергентам компартментом и с центросомой. J Cell Sci 101 (Pt 3), 529–545. [PubMed] [Google Scholar] 95. Takizawa CG и Morgan DO (2000) Контроль митоза путем изменения субклеточного расположения циклин-B1-Cdk1 и Cdc25C. Curr Opin Cell Biol 12, 658–665. [PubMed] [Google Scholar] 96. Shapiro GI (2006) Циклинзависимые киназные пути как мишени для лечения рака.Дж Клин Онкол 24, 1770–1783. [PubMed] [Google Scholar] 97. Larochelle S, Merrick KA, Terret ME, Wohlbold L, Barboza NM, Zhang C, Shokat KM, Jallepalli PV и Fisher RP (2007) Требования к Cdk7 в сборке Cdk1 / cyclin B и активации Cdk2, выявленные химической генетикой у человека клетки. Mol Cell 25, 839–850. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 98. Garrett S, Barton WA, Knights R, Jin P, Morgan DO и Fisher RP (2001) Взаимная активация циклин-зависимыми киназами 2 и 7 направляется детерминантами субстратной специфичности вне Т-петли.Mol Cell Biol 21, 88–99. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 99. Fisher RP, Jin P, Chamberlin HM и Morgan DO (1995). Альтернативные механизмы сборки CAK требуют фактора сборки или активирующей киназы. Клетка 83, 47–57. [PubMed] [Google Scholar] 100. Takizawa CG, Weis K и Morgan DO (1999) Ran-независимый ядерный импорт циклина B1-Cdc2 с помощью importin beta. Proc Natl Acad Sci USA 96, 7938–7943. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 101. Moore JD, Yang J, Truant R и Kornbluth S (1999) Ядерный импорт комплексов Cdk / циклин: идентификация различных механизмов импорта Cdk2 / циклин E и Cdc2 / циклин B1.J Cell Biol 144, 213–224. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 102. Крамер А., Лукас Дж. И Бартек Дж. (2004) Проверка центросомы. Клеточный цикл 3, 1390–1393. [PubMed] [Google Scholar] 103. Jackman M, Lindon C, Nigg EA and Pines J (2003) Активный циклин B1-Cdk1 сначала появляется на центросомах в профазе. Nat Cell Biol 5, 143–148. [PubMed] [Google Scholar] 104. Gavet O and Pines J (2010) Активация циклина B1-Cdk1 синхронизирует события в ядре и цитоплазме при митозе. J Cell Biol 189, 247–259.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 106. Ян Дж., Бардес Е.С., Мур Дж. Д., Бреннан Дж., Пауэрс М.А. и Корнблут С. (1998) Контроль локализации циклина B1 посредством регулируемого связывания ядерного фактора экспорта CRM1. Genes Dev 12, 2131–2143. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 107. Hagting A, Karlsson C, Clute P, Jackman M и Pines J (1998) Локализация MPF контролируется ядерным экспортом. EMBO J 17, 4127–4138. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 108. Wurzenberger C и Gerlich DW (2011) Фосфатазы: обеспечение безопасного прохождения через митотический выход.Нат Рев Мол Cell Biol 12, 469–482. [PubMed] [Google Scholar] 109. Liu F, Rothblum-Oviatt C, Ryan CE и Piwnica-Worms H (1999) Избыточное производство киназы Myt1 человека вызывает задержку клеточного цикла G2, препятствуя внутриклеточному перемещению комплексов Cdc2-циклин B1. Mol Cell Biol 19, 5113–5123. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 110. Chow JP и Poon RY (2013) Киназа MYT1, ингибирующая CDK1, в восстановлении контрольных точек повреждений ДНК. Онкоген 32, 4778–4788. [PubMed] [Google Scholar] 111. Pines J (2011) Кубизм и клеточный цикл: многоликость APC / C.Нат Рев Мол Cell Biol 12, 427–438. [PubMed] [Google Scholar] 113. Coulonval K, Kooken H и Roger PP (2011) Сочетание фосфорилирования T161 и T14 защищает циклин B-CDK1 от преждевременной активации. Клетка Mol Biol 22, 3971–3985. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 114. Aarts M, Sharpe R, Garcia-Murillas I, Gevensleben H, Hurd MS, Shumway SD, Toniatti C, Ashworth A и Turner NC (2012) Принудительный митотический вход клеток S-фазы в качестве терапевтической стратегии, индуцированной ингибированием WEE1. Рак Discov 2, 524–539.[PubMed] [Google Scholar] 115. Landau HJ, McNeely SC, Nair JS, Comenzo RL, Asai T., Friedman H, Jhanwar SC, Nimer SD and Schwartz GK (2012) Ингибитор киназы контрольной точки AZD7762 потенцирует индуцированный химиотерапией апоптоз p53-мутировавших клеток множественной миеломы. Мол Рак Тер 11, 1781–1788. [PubMed] [Google Scholar] 116. Yang H, Yoon SJ, Jin J, Choi SH, Seol HJ, Lee JI, Nam DH и Yoo HY (2011) Ингибирование киназы контрольной точки 1 повышает чувствительность метастазов рака легких к лучевой терапии. Biochem Biophys Res Commun 406, 53–58.[PubMed] [Google Scholar] 117. Морган М.А., Парселл Л.А., Чжао Л., Парселс Д.Д., Дэвис М.А., Хассан М.С., Арумугараджа С., Хиландер-Ганс Л., Морозини Д., Симеоне Д.М. et al. (2010) Механизм радиосенсибилизации с помощью ингибитора Chk1 / 2 AZD7762 включает отмену контрольной точки G2 и ингибирование гомологичной рекомбинационной репарации ДНК. Рак Res 70, 4972–4981. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 118. Schmidt M, Hofmann HP, Sanders K, Sczakiel G, Beckers TL и Gekeler V (2006) Молекулярные изменения после подавления мРНК Polo-подобной киназы 1 по сравнению с фармакологическим ингибированием в раковых клетках.Мол Рак Тер 5, 809–817. [PubMed] [Google Scholar] 119. Lee MH и Yang HY (2003) Регуляторы G1-циклин-зависимых киназ и рака. Раковые метастазы Rev 22, 435–449. [PubMed] [Google Scholar] 120. Майер Д.Л., Эль-Бахасси М. и Стембрук П.Дж. (2005) Схема Plk3 ‐ Cdc25. Онкоген 24, 299–305. [PubMed] [Google Scholar] 121. McCourt P, Gallo-Ebert C, Gonghong Y, Jiang Y и Nickels JT Jr (2013) PP2A (Cdc55) регулирует стабильность циклина G1. Клеточный цикл 12, 1201–1210. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 122.Ceulemans H и Bollen M (2004) Функциональное разнообразие протеинфосфатазы-1, клеточный экономайзер и кнопка сброса. Physiol Rev 84, 1–39. [PubMed] [Google Scholar] 123. Zitouni S, Nabais C, Jana SC, Guerrero A и Bettencourt ‐ Dias M (2014) Поло-подобные киназы: структурные вариации приводят к множеству функций. Нат Рев Мол Cell Biol 15, 433–452. [PubMed] [Google Scholar] 124. Hughes BT, Sidorova J, Swanger J, Monnat RJ Jr и Clurman BE (2013) Существенная роль ингибирующего фосфорилирования Cdk2 во время репликационного стресса, выявленного мутацией нокина Cdk2 человека.Proc Natl Acad Sci USA 110, 8954–8959. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

Блокада контрольной точки ускоряет новый переход от NKT-управляемого TNFα-ответа к IFN-γ-ответу, управляемому Т-клетками, в микроокружении опухоли

Введение

Иммунный ответ против развивающегося Опухоль сложна и динамична, в ней участвует множество типов иммунных клеток, которые развиваются с течением времени.1–3 Стимулирование этого эндогенного ответа является основной целью многих иммунотерапевтических методов, включая блокаду контрольных точек (CB), которая приводит к заметным и устойчивым ответам в подмножестве пациентов по многим показаниям.4 5 Первое поколение агентов CB сосредоточено на прерывании осей PD-1 / PD-L1 или PD-L2 или на блокировании CTLA-4. Многие из этих агентов в настоящее время одобрены Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA), представляют собой передовые методы лечения и значительно улучшили клинические результаты при некоторых злокачественных новообразованиях. Сюда входят метастатическая меланома, 6–7 лимфома Ходжкина, 8 и карцинома из клеток Меркеля, 9 и другие10 для монотерапии ниволумабом или пембролизумабом и метастатическая меланома11–12 для монотерапии ипилумумабом или тремелимумабом.Комбинированное лечение как анти-CTLA-4, так и анти-PD-1 CB еще более эффективно, улучшая общие показатели ответа и выживаемость при метастатической меланоме.6 Несмотря на этот оглушительный успех, наше понимание того, какие иммунные группы реагируют на CB и когда они ответить, отстает от того, как мы используем эти спасательные средства. Многие эффекторные лимфоциты активируют рецепторы контрольных точек после связанных с активацией очередей и, таким образом, чувствительны к подавлению с помощью лигандов контрольных точек.13-19 Для PD-1 это усиление регуляции происходит в ответ на включение TCR, общих цитокинов гамма-цепи или через ассоциированные с активацией факторы транскрипции. FOXO1 и NFAT, 20–23, тогда как CTLA-4, постоянно присутствующий во внутриклеточных пулах, перемещается на поверхность клетки после взаимодействия с TCR посредством нескольких сложных механизмов.24

Несмотря на широкий спектр популяций эффекторных или цитотоксических лимфоцитов, способных экспрессировать PD-1 или CTLA-4, экспансия истощенных Т-клеток CD8 ⁺ путем обработки анти-PD-1 и индукция T _H 1 CD4 ⁺ Т-клетки при лечении анти-CTLA-4 были недавно идентифицированы как основные популяции CB-отвечающих лимфоцитов, инфильтрирующих мышиные и человеческие солидные опухоли.25 Эта работа, будучи новаторской, была сосредоточена на полностью сформировавшихся опухолях человека или больших, конечных точках, мышиных опухоли и не сообщали об ответе CB на раннем росте опухоли.Тем не менее, существует прецедент того, что ответ CB может возникать в различных наборах инфильтрирующих опухоль лимфоцитов (TIL) по мере развития опухоли.26 Это, вероятно, сопровождается фенотипическими изменениями, связанными с широко принятой в настоящее время моделью иммуноредактирования.27 28 Кроме того, макияж Популяции нетрадиционных Т-клеток, таких как γδT-клетки и естественные Т-клетки-киллеры (NKT), наряду с врожденными эффекторными клетками, такими как естественные клетки-киллеры (NK), изменяются в процессе роста опухоли.26 Важно отметить, что эти популяции также восприимчивы к CB сходен с обычными αβT-клетками, 29–31, но то, как ответ CB изменяется с течением времени, в этих популяциях недостаточно изучен.

Здесь мы стремимся расширить наше понимание CB-ответа среди эффекторного TIL, сравнивая CB-отвечающие популяции как в ранние, так и в поздние временные точки подкожной мышиной карциномы толстой кишки MC38. Этот анализ проводился с использованием высокопараметрического анализа проточной цитометрии, направленного на субфенотипирование лимфоцитов с известной цитотоксической или эффекторной способностью, таких как Т-клетки, γδT-клетки, NK-клетки и NKT-клетки, а также маркеры эффекторного ответа. Наши результаты подтверждают предыдущие выводы о том, что экспансия конкретных подмножеств CD4 ⁺ хелперных Т-клеток (T _H ) и цитотоксических Т-клеток CD8 ⁺ (T _C ) являются одними из основных CB-реагирующих элементов в целом. хорошо сформировавшиеся опухоли, а также идентифицируют глубокий переход от NKT-ответа, управляемого TNFα, на ранней стадии роста опухоли на ответ, управляемый IFN-γ, в более позднем росте опухоли, который ускоряется CB.Эти результаты показывают, что эффекты ХБ очень динамичны и зависят от времени, что является важной концепцией, которую следует учитывать, поскольку использование ХБ расширяется в клинике и рассматривается как более раннее вмешательство в лечение рака.

Методы

Мыши

Самок мышей C57BL / 6 (возраст 6-8 недель) и мышей NOD.Cg- Prkdc ^scid Il2rg ^tm1Wjl / SzJ (NSG) были получены из лаборатории Джексона (Бар-Харбор). , Штат Мэн, США). Мышей содержали в клетках с фильтром и стерилизованной пищей и водой, а подстилку из початков кукурузных початков в автоклаве меняли не реже одного раза в неделю в Исследовательском центре на животных H.Онкологический центр Ли Моффитта. Мышей гуманно умерщвляли путем ингаляции CO ₂ с последующим смещением шейки матки в соответствии с рекомендациями Американской ветеринарной медицинской ассоциации. Мышей наблюдали ежедневно и гуманно умерщвляли, если одиночная опухоль превышала 200 мм в диаметре или у мышей проявлялись признаки, относящиеся к метастатическому раку. Были приложены все усилия, чтобы минимизировать страдания. Эти исследования проводились в строгом соответствии с рекомендациями Руководства по уходу и использованию лабораторных животных Национального института здоровья.

Клеточные линии и лентивирусные трансдукции

Клетки колоректального рака мыши MC38 содержались и поддерживались посредством серийных пассажей в полной среде (CM) в увлажненной камере при 37 ° C и 5% CO ₂ . CM состояла из среды RPMI (Gibco) с добавлением 10% инактивированной нагреванием фетальной бычьей сыворотки (FBS), 0,1 мМ заменимых аминокислот, 1 мМ пирувата натрия, 2 мМ свежего L-глутамина, 100 мг / мл стрептомицина, 100 Ед. / мл пенициллина, 50 мг / мл гентамицина, 0,5 мг / мл фунгизона (все от Life Technologies, Роквилл, Мэриленд, США) и 0.05 мМ β-меркаптоэтанол (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США). Пустой вектор (EV) и сверхэкспрессия CD1d (CD1d ^{по сравнению с} ). Клетки MC38 поддерживали в CM с 0,5 мкг / мл пуромицина. Для создания этих производных линий лентивирусные частицы для мышиного CD1d (Myc-DDK-tagged; NM_007639) или контрольные частицы (pLenti-C-Myc-DDK-P2A-Puro) были получены от OriGene Technologies Inc (Роквилл, Мэриленд, США) и используется для трансдукции в соответствии с инструкциями производителя.

⁵¹ Анализ цитотоксичности с высвобождением хрома

1 × 10 ⁶ клеток-мишеней метили 100 мкКи ⁵¹ Cr в течение 2 часов при 37 ° C.Меченые клетки дважды промывали RPMI, ресуспендировали в CM и высевали в 96-луночные круглодонные планшеты в трех экземплярах при 1 × 10 913 · 10 6 клеток / мл. Эффекторные клетки (TIL) добавляли при соотношении эффектор-мишень 20-1, 10-1, 5-1, 2,5-1, 1,25: 1, 0,625: 1 и 0,3125: 1 и инкубировали при 37 ° C в течение 5 часов. . Выпущенный ⁵¹ Cr измеряли в супернатантах с использованием Trilux (PerkinElmer). Обработка 5% Тритоном X измеряла максимальное уничтожение, а только клетки-мишени измеряли спонтанное высвобождение ⁵¹ Cr.Трижды усредняли и рассчитывали процент лизиса:% цитотоксичности = ((среднее из трех повторностей теста ⁵¹ условия высвобождения Cr) — (среднее спонтанного высвобождения ⁵¹ Cr)) / ((среднее максимальное высвобождение ⁵¹ Cr) ) — (среднее значение спонтанного выброса ⁵¹ Cr)) × 100. Данные цитотоксичности являются репрезентативными по крайней мере для трех анализов.

Рост опухоли MC38 in vivo и лечение CB

Клетки MC38 промывали и восстанавливали в стерильном PBS из расчета 1 × 10 ⁶ клеток / мл.1 × 10 ⁵ (100 мкл) клеток MC38 (или производных) вводили подкожно в верхнюю часть спины мышей C57BL / 6 или NSG. Для лечения CB мышей C57BL / 6 рандомизировали перед внутрибрюшинной инъекцией 300 мкг поликлонального IgG крысы (клон, LTF-2, BioXcell), анти-PD-1 (клон, RMP1-14, BioXcell) и / или анти- CTLA-4 (клон, 9h20, BioXcell). Мышей лечили на 3, 6 и 9 дни после инокуляции MC38. Мышей гуманно умерщвляли через 11 или 21 день после инъекции опухолевых клеток. Размер опухоли измеряли штангенциркулем и регистрировали каждые 2 или 3 дня.Объем опухоли рассчитывали по следующей формуле: объем = высота × короткий диаметр × длинный диаметр × π / 6.

Диссоциация опухоли и выделение TIL

Опухоли, иссеченные посмертно, были ферментативно диссоциированы в сбалансированном солевом растворе Хэнкса, содержащем 1 мг / мл коллагеназы, 0,1 мг / мл ДНКазы I и 2,5 единицы / мл гиалуронидазы (все от Sigma) и полный EDTA- Коктейльные таблетки свободных ингибиторов протеазы (Sigma) в пробирках для нежных MACS C, помещенных в диссоциатор MACS Dissociator (Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Германия).Полученные суспензии единичных клеток пропускали последовательно через сетчатые фильтры для клеток 100 мкм, 70 мкм, а затем 40 мкм перед промывкой PBS. Затем любые остаточные эритроциты лизировали буфером для лизиса ACK (Gibco) в течение 5 мин. Затем клетки CD90.2 ⁺ выделяли в соответствии с инструкциями производителя, используя CD90.2 MicroBeads с системой AutoMACS (Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Германия).

Иммунофлуоресцентное окрашивание и получение данных проточной цитометрии.

Неспецифическое окрашивание блокировали в течение 30 мин при 4 ° C с помощью 300 мкл 2% FBS в PBS на 1.0 × 10 ⁶ ячеек. Затем клетки метили фиксируемым Live / Dead Blue (Invitrogen) после тщательной промывки PBS. Окрашивание клеточной поверхности осуществляли 30-минутной инкубацией при 4 ° C с антителами, указанными в онлайн-дополнительной таблице 1. Затем клетки промывали PBS, а затем фиксировали и повышали проницаемость, используя раствор BD Cytofix / Cytoperm (BD Biosciences, Сан-Диего, Калифорния. , США) согласно инструкциям производителя. Внутриклеточное окрашивание проводили путем добавления внутриклеточных антител в онлайн-дополнительную таблицу 1 в течение 30 минут при 4 ° C.Затем клетки промывали и ресуспендировали в PBS, содержащем 2% бычьего сывороточного альбумина (BSA), для сбора на BD FACSymphony A5, имеющем индивидуальную конфигурацию для Онкологического центра Х. Ли Моффитта. Контрольные образцы включали одноцветные контрольные образцы, неокрашенные образцы и контроли флуоресценции минус один (FMO). Матрицы побочных эффектов были рассчитаны после сбора с использованием программного обеспечения FlowJo V.10.5 (Becton, Dickinson and Company; Ashland, Oregon, USA).

Анализ t-SNE и иерархическая кластеризация популяций TIL

Все.fcs-файлы были объединены, и была применена схема стробирования, изображенная на дополнительном онлайн-рисунке 3. Результирующие события затем экспортировались в новый файл .fcs, чтобы уменьшить размер файла и время вычислений за счет исключения данных, связанных с закрытыми событиями. Параметры, указанные в интерактивной дополнительной таблице 1, были выбраны для кластерного анализа со следующими настройками переменных: итераций = 1000; недоумение = 60; тета = 0,5; eta = 200. После получения параметров t-SNE были созданы ворота популяции TIL, как описано в основном тексте, с использованием данных FMO из дополнительных рисунков 2 и 4 в качестве руководства.Затем данные о процентном положительном результате и медианной интенсивности флуоресценции (MFI) для всех параметров кластеризации (онлайн-дополнительная таблица 1) были экспортированы в контексте идентификации исходного образца и популяции. Анализ на основе шлюза, t-SNE и функции экспорта выполнялись с использованием программного обеспечения FlowJo V.10.5 (Becton, Dickinson and Company). Для иерархической кластеризации определенных популяций TIL каждая популяция была экспортирована как совокупные данные, а MFI каждого параметра был нормализован до процентиля в пределах диапазона анализа.Затем каждая популяция была сгруппирована для облегчения идентификации с использованием метода корреляции один минус Кендалла с полной связью. Это было выполнено только для популяций (строк), а не для параметров кластеризации. Иерархическая кластеризация выполнялась с использованием программного обеспечения Morpheus (Broad Institute; https://software.broadinstitute.org/morpheus). После получения популяций данные были разделены обратно на исходные образцы, чтобы в них можно было впоследствии проанализировать частоту популяций и маркеры эффекторной функции.

Статистика

Данные представлены как среднее ± стандартная ошибка. Статистическая значимость сравнений между группами непараметрических переменных, таких как частота популяции, определялась тестами Манна-Уитни, тогда как статистическая значимость сравнений между группами параметрических переменных, такими как MFI, определялась непарным t-критерием. Для анализов цитотоксичности ⁵¹ CR-высвобождения и объема опухоли сначала определяли площадь под кривой для каждого теста / мыши, а затем использовали тесты Манна-Уитни для оценки статистической значимости сравнений между группами.Различия со связанным значением p <0,05 считались значимыми. Все статистические анализы были выполнены с использованием программного обеспечения GraphPad Prism Software V.6.01 для Windows (GraphPad Software, La Jolla, California, USA).

Результаты

Идентификация популяций TIL MC38 с эффекторной активностью

Чтобы идентифицировать популяции TIL, отвечающие на CB, мы ферментативно переваривали опухоли MC38, резецированные через 11 и 21 день после подкожной инокуляции у мышей, получавших внутрибрюшинно анти-PD-1, анти-CTLA -4, комбинация (анти-PD-1 и анти-CTLA-4) или контрольные антитела изотипа, которые значительно снижали рост опухоли в соответствии с предыдущими исследованиями25 32 (онлайн-дополнительный рисунок 1).Затем дайджесты окрашивали панелью иммунофлуоресцентных антител, предназначенных для дифференциации популяций основных эффекторных лимфоцитов вместе с тремя маркерами эффекторной функции, внутриклеточным IFN-γ, внутриклеточным TNFα и CD107a на поверхности клеток (дополнительная таблица 1 онлайн). Проточная цитометрия использовалась для определения интенсивности флуоресценции, а контрольные значения флуоресценции минус один использовались для оценки фонового сигнала и размещения направляющих ворот (онлайн-дополнительный рисунок 2). Чтобы сосредоточиться на эффекторном TIL, агрегаты, дебрис и нежизнеспособные клетки были исключены до CD45.Клетки 1 ⁺ и клетки NK1.1 ⁺ и / или CD3ε ⁺ были включены для дальнейшего анализа (онлайн-дополнительная фигура 3). Чтобы идентифицировать популяции неконтролируемым, всесторонним образом, мы применили алгоритм t-распределенного стохастического встраивания соседей (t-SNE), 33 34 с использованием CD3ε, CD4, CD8a, CD27, CD44, CD45RA, CD62L, CD69, CD127, CTLA-4. , γδTCR, PD-1, KLRG1, LAG-3, NK1.1 и TIM-3 в качестве параметров кластеризации. Это было сделано на объединенных данных, так что все образцы способствовали кластеризации и идентификации популяций TIL.Затем мы создали серию ворот вокруг 37 различных популяций TIL, используя комбинацию полученного графика t-SNE (рисунок 1A), наложений тепловой карты параметров кластеризации (рисунок 1B) и наложений положительных событий, как определено органами управления FMO (онлайн дополнительный рисунок 4). Затем эти популяции были пронумерованы произвольно (рис. 1C, D). Чтобы помочь в идентификации, анализ иерархической кластеризации был использован post hoc для группировки населения в соответствии с их МФО. В целом, этот анализ выявил 4 популяции T _C , 6 популяций NKT, 9 популяций T _H , 11 популяций NK, 5 популяций γδ T-клеток и 1 неидентифицированную популяцию (P1 «другое»; рисунок 1E ).Методологии иерархической кластеризации сгруппировали популяции на основе их сходства по всем параметрам кластеризации. В то время как большинство популяций в каждой группе выражали архетипические маркеры, ожидаемые для их идентичности, несколько редких популяций не обладали некоторыми ожидаемыми маркерами, кластеризуясь со своими группами на основе совокупного сходства других параметров. Примеры включают P27, который сгруппировался с NKT-клетками, несмотря на низкую экспрессию CD3ε, и P8 и P34, которые сгруппировались с γδ Т-клетками, несмотря на отсутствие экспрессии γδTCR.

Рисунок 1

Анализ t-SNE эффекторных популяций TIL идентифицирует отдельные, продуцирующие IFN-γ и TNFα клетки в ранние (11 день) и поздние (21 день) моменты времени подкожного роста MC38. (A) Комбинированный график плотности псевдоцвета параметров t-SNE жизнеспособных, неагрегированных клеток CD45.2 ⁺ , CD3ε ⁺ и / или NK1.1 ⁺ для всех временных точек и условий обработки. (B) Наложение тепловой карты параметров, используемых для кластеризации t-SNE, с теплыми цветами (красный), представляющими более высокие уровни окрашивания, и холодными цветами (синий), представляющими более низкие уровни окрашивания.Шкалы средней интенсивности флуоресценции (MFI) указаны для каждого параметра. (C) Карта ворот населения, созданная с использованием части A, части B и контроля флуоресценции минус один (описанных в дополнительных рисунках 2 и 4 онлайн). (D) Наложение гейтов популяции и комбинированного графика плотности псевдоцвета параметров t-SNE. (E) Значения MFI параметров кластеризации из идентифицированных популяций TIL, используемых в анализе иерархической кластеризации. Затем были широко идентифицированы основные группы кластеризации: Т _С , цитотоксические Т-клетки; t _H , хелперные Т-клетки; γδ-подобные, γδ Т-клетки или Т-клетки, образующие кластеры с γδ Т-клетками; NK, естественные клетки-киллеры; или O, другое TIL.(F) Экспрессия эффекторных молекул CD107a (вверху), IFN-γ (в середине) и TNFα (внизу) среди каждой идентифицированной популяции TIL. Степень фонового сигнала для каждой эффекторной молекулы обозначена красной пунктирной линией FMO, как определено онлайн-дополнительным рисунком 2. Тепловая карта MFI эффекторной молекулы отображается под названиями популяций. (G) Наложение тепловой карты экспрессии эффекторной молекулы для CD107a (слева), IFN-γ (в центре) и TNFα (справа) по параметрам t-SNE с включенными воротами популяций.Шкалы MFI отмечены для каждого параметра: теплые цвета (красный) представляют более высокие уровни окрашивания, а холодные цвета (синий) — более низкие уровни окрашивания. FMO, флуоресценция-минус-один; t-SNE, t-распределенное стохастическое вложение соседей; TIL, лимфоцит, инфильтрирующий опухоль.

После дифференциации популяций TIL мы оценили экспрессию CD107a на клеточной поверхности, внутриклеточного IFN-γ и внутриклеточного TNFα как индикаторов эффекторной активности. В этом анализе CD107a на клеточной поверхности был в значительной степени ограничен популяциями NK и NKT, что позволяет предположить, что большой процент этих клеток активно дегранулирует в опухолях MC38.Продукция IFN-γ, которая стала стандартом для активации Т-клеток и активности NK, была распределена по большинству популяций TIL MC38 из всех групп с низкими частотами и с умеренными частотами для T _H популяций P20, P31 и P32, Популяции TC P3 и P4, популяции NK P12, P17, P18, P23 и P28 и популяции NKT P5, P6, P16, P26 и P27. Продукция TNFα была устойчивой среди NKT-популяций P5, NK-популяций P7, P12, P18 и P23 и была умеренной среди NKT-популяций P6, P25, P26 и P27, NK-популяций P17 и P28, а также TC-популяций P2 и P15 (рисунок 1F, G).После анализа tSNE данные были разделены так, чтобы можно было анализировать частоты и экспрессию эффекторных маркеров в каждой популяции в каждый момент времени и для каждой группы лечения.

CB изменяет временную динамику среди популяций TIL MC38

Состав субпопуляций TIL резко изменился между ранними (11 день) и поздними (21 день) моментами времени роста опухоли MC38, при этом большинство популяций ассоциировались исключительно с одной временной точкой или другой . Во многих случаях ранние и поздние популяции выглядели аналогичными, группируясь по-разному в зависимости от незначительных различий MFI (дополнительные рисунки 5 и 6 в Интернете).Лечение CB увеличивало или сокращало определенные субпопуляции в каждой временной точке, но не оказывало значительного изменения ассоциации какой-либо популяции с любой временной точкой (рисунок 2A). Был проведен всесторонний анализ для сравнения частот каждой популяции в каждый момент времени и каждого лечения, который включает значения p для значительно изменившихся популяций (онлайн-дополнительная таблица 2), а влияние CB на основные популяции выделено на рисунке 2B. В этом исследовании большинство T _C было представлено двумя популяциями TIL: P3 (представляющим CD69 ⁺ CD44 ⁺ T _C ) и P4 (T _C без CD44 и CD69).P3 был ограничен временной точкой 21 дня, составляя 29% ± 0,23% TIL, и был значительно снижен вдвое после анти-CTLA-4 или комбинации CB. P4, хотя и менее распространен, чем P3, однозначно присутствует в обоих временных точках. CB оказал дивергентное влияние на P4, значительно увеличивая частоту с 2 ± 0,52% до более 4% при комбинированном лечении на 11 день, в то время как частота значительно снижалась с 1,9 ± 0,08% до менее 1% при комбинированном лечении на 21 день.

Рисунок 2

Изменения в частотах популяции TIL после лечения ингибиторами контрольных точек в ранний (11 день) и поздний (21 день) моменты времени.(A) Графики контурной плотности t-SNE для объединенных образцов TIL от контрольных (обработанных изотипом) мышей или мышей, получавших анти-PD-1, анти-CTLA-4 или комбинированное лечение (анти-PD-1 и анти-CTLA- 4) на 11-й и 21-й день подкожного роста опухоли MC38. (B) Частоты популяции TIL от отдельных мышей, демонстрирующих заметные изменения с CB (* p≤0,05 лечение по сравнению с изотипическим контролем; ** p≤0.01 лечение по сравнению с изотипическим контролем; ˆp≤0.05 изотипический контроль на 21 день по сравнению с изотипическим контролем 11). (C) Частоты популяции TIL от отдельных мышей в зависимости от объема опухоли во время резекции, демонстрируя значительную корреляцию.Линии наилучшего соответствия линейной регрессии отображаются со значениями R ² и p. Синие графики показывают данные с временных точек 11-го дня, а красные графики обозначают данные, взятые с временных точек 21-го дня. ЦБ, блокировка КПП; t-SNE, t-распределенное стохастическое вложение соседей; TIL, лимфоцит, инфильтрирующий опухоль.

Удивительно, но в TIL в начале роста опухоли преобладали не NK, T _H или T _C , а скорее NKT, при этом популяция P5 составляла почти половину всего TIL на 11-й день у контрольных мышей, обработанных изотипом (46 % ± 3.7%). Эта популяция была ограничена временной точкой 11-го дня и была значительно сокращена при использовании комбинации CB до 11% ± 3,9%. P5 отличается от другой менее распространенной популяции P6 NKT на 11 день более высокой экспрессией CD44 и более низкой экспрессией CD62L, предполагая, что эта популяция может представлять фенотип эффекторной памяти (EM). NKT были гораздо менее распространены позже в росте MC38, при этом P26 представлял самую большую популяцию NKT на 21 день при 14% ± 1,5% TIL. Подобно P5, P26 отличался от других популяций 21 NKT более высокой экспрессией CD44 и более низкой экспрессией CD62L.CB существенно не изменил частоту P26 на 21 день, хотя лечение анти-CTLA-4 привело к большей вариабельности для P26, чем другие группы лечения или контрольные мыши (фигура 2B).

Помимо резкого снижения частоты NKT во время раннего роста опухоли, CB оказал наибольшее влияние на популяции T _H . Наиболее заметными популяциями T _H были P31 и P32 на 11-й день и P35 и P36 на 21-й день. P31 оказался более активным, чем P32 в момент времени 11-го дня, на основании более высокой экспрессии CD69 и CD44.Оба показали умеренные частоты у обработанных изотипом контрольных мышей (9,2% ± 2,3% и 5,0% ± 0,9%, соответственно), но были значительно увеличены после CB. Это было особенно верно для комбинированного лечения, которое увеличило как P31, так и P32 до более чем 20% от всего TIL в момент 11-го дня. Точно так же комбинация CB увеличила как P35, так и P36 в момент времени 21 день с 2,8% ± 0,1% и 8,7% ± 0,96%, соответственно, до примерно 20% от всего TIL для каждого (рисунок 2B). P35 и P36 оказались похожими по фенотипу.Оба проявляли ЕМ-фенотип (CD44 ⁺ CD45 ^— CD27 ^— CD62L ^— ), немного отличаясь по CD69, TIM-3 и CD3ε, MFI.

Учитывая множество популяций TIL, которые изменяются в ответ на CB, мы выполнили комплексный набор анализов линейной регрессии для каждой популяции в каждый момент времени в зависимости от объема опухоли во время резекции, чтобы определить популяции, коррелирующие с ростом опухоли (онлайн-дополнительная таблица 3). В общей сложности шесть популяций в момент времени 11-й день и четыре популяции в момент времени 21-го дня продемонстрировали статистически значимые положительные корреляции с размером опухоли, предполагая, что для этих TIL могут существовать нежелательные ассоциации с ростом опухоли, в то время как три популяции в момент 11-го дня точка показала статистически значимую отрицательную корреляцию с размером опухоли, предполагая, что полезные ассоциации с ростом опухоли могут существовать для этих TIL (см. дополнительную таблицу 3 для значений p).Важно отметить, что они включали положительные корреляции основной популяции T _C P3 на 21 день и основной популяции NKT P5 на 11 день, обе из которых были значительно сокращены CB в соответствующие моменты времени, а также отрицательные корреляции основных популяций P5 на 11 день. T _C популяция P4 и основная популяция T _H P32, оба из которых были значительно увеличены CB в соответствующие моменты времени (рисунок 2C). Хотя эти корреляции не доказывают какого-либо прямого влияния на рост опухоли, они предполагают биологически значимую взаимосвязь для основных популяций NKT, T _C и T _H .

CB снижает продукцию TNFα и TIL, продуцирующий TNFα, как в ранние, так и в поздние моменты времени роста опухоли MC38.

Далее мы исследовали, как CB влияет на продукцию TNFα среди TIL. Глобальную продукцию TIL TNFα визуализировали путем наложения тепловых карт TNFα MFI на графики t-SNE объединенных образцов TIL из обеих точек времени для контрольных мышей, обработанных изотипом, или мышей, обработанных CB (фиг. 3A). Во время раннего роста опухоли MC38 производство TNFα было обусловлено популяциями NKT P5 и P6. Сравнительно небольшая продукция TNFα наблюдалась в других популяциях 11-го дня, таких как T _C популяция P4 и T _H популяция P31, или в редких популяциях, таких как NK1.1 ^низкий T _C популяция P15 или CD3ε ^— CD4 ⁺ неопределенная популяция TIL P1. Был проведен комплексный набор анализов, сравнивающих частоту продукции TNFα в каждой популяции TIL (онлайн-дополнительная таблица 4) и TNFα MFI для TNFα-продуцирующих клеток в каждой TIL-популяции (онлайн-дополнительная таблица 5). В вышеупомянутых популяциях CB значительно снижал частоту TIL, продуцирующего TNFα и / или TNFα MFI для TNFα ⁺ TIL в момент времени 11 дней (фигура 3B-F).Позже, при росте опухоли MC38, популяция NK P12 показала самую сильную продукцию TNFα, за которой следовала популяция NKT P26 в момент времени 21 день (фигура 3A). За исключением P12, продукция TNFα на 21 день была в глобальном масштабе ниже по сравнению с днем ​​11, со скромной экспрессией TNFα среди T _C популяций P3 и P4, NK-популяций P17, P20 и P27 и T _H популяции P20. Обработка анти-CTLA-4 значительно снижала TNFα MFI для TNFα ⁺ P12 TIL, а обработка анти-CTLA-4 или комбинацией CB значительно снижала TNFα ⁺ клеток в пределах P20 на 21 день (фигура 3G-H).В целом, 10 популяций TIL на 11-й день и четыре на 21-й день показали значительно меньшие проценты TNFα ⁺ TIL после CB (см. Дополнительную онлайн-таблицу 4 для значений p). Аналогичным образом, восемь популяций TIL через 11 дней и одна через 21 день показали значительно сниженный TNFα MFI среди TNFα-продуцирующих TIL после CB (см. Дополнительную онлайн-таблицу 5 для значений p). Только P12 показал небольшое увеличение частоты клеток TNFα ⁺ после лечения анти-PD-1 (94,73% ± 2,34% по сравнению с 99,4 ± 0.60%) через 11 дней и P20 (редкий CD44 ⁺ CTLA-4 ⁺ CD69 ⁺ TIM-3 ⁺ γδTCR ^низкий KLRG1 ⁺ NK1.1 ^низкий LAG-3 ^низкий CD127 ⁺ CD45RA ⁺ T _H (популяция) показал повышенный TNFα MFI среди TNFα-продуцирующих TIL через 11 дней. В подавляющем большинстве случаев CB снижает частоту TNFα ⁺ и MFI среди MC38 TIL, особенно во время раннего роста опухоли.

Рисунок 3

Изменения в продукции TNFα среди TIL-популяций после лечения ингибиторами контрольных точек в ранние (11 день) и поздние (21 день) моменты времени.(A) Графики t-SNE с наложениями на тепловую карту TNFα комбинированных образцов TIL от контрольных (обработанных изотипом) мышей или мышей, получавших анти-PD-1, анти-CTLA-4 или комбинированное лечение (анти-PD-1 и анти-CTLA-4). -CTLA-4) на 11-й и 21-й день подкожного роста опухоли MC38, причем теплые цвета (красный) представляют более высокие уровни окрашивания, а холодные цвета (синий) — более низкие уровни окрашивания. Шкала TNFα MFI представлена ​​ниже. (B – H) Анализ экспрессии TNFα для P1-дня 11 (B), P4-дня 11 (C), P5-дня 11 (D), P6-дня 11 (E), P31-дня 11 (F), P12-дня 21 (G). ), и P20 день 21 (H).Для каждого из них расположение популяции в анализе t-SNE изображено в верхнем левом углу, объединенная точечная диаграмма TNFα по сравнению с экспрессией CD45.2 в верхнем правом углу, процент клеток, экспрессирующих TNFα (внизу слева), и TNFα MFI из Показаны клетки TNFα ⁺ (внизу справа). Данные синего цвета обозначают временную точку 11-го дня, тогда как данные красного цвета обозначают временную точку 21-го дня (* p≤0,05 лечение по сравнению с изотипическим контролем; ** p≤0.01 лечение по сравнению с изотипическим контролем). MFI — средняя интенсивность флуоресценции; t-SNE, t-распределенное стохастическое вложение соседей; TIL, лимфоцит, инфильтрирующий опухоль.

CB увеличивает продукцию IFN-γ и TIL, продуцирующий IFN-γ, как в ранние, так и в поздние моменты времени роста опухоли MC38

Тепловая карта IFN-γ t-SNE Наложение графика объединенных образцов TIL выявило динамические изменения в продукции IFN-γ по мере роста опухоли MC38 и после CB (фигура 4A). Был проведен комплексный набор анализов, сравнивающих частоту продукции IFN-γ в каждой популяции TIL (онлайн-дополнительная таблица 6) и IFN-γ MFI продуцирующих IFN-γ клеток в каждой TIL-популяции (онлайн-дополнительная таблица 7).Во время раннего роста опухоли MC38 продукция IFN-γ распределялась по большинству популяций TIL от умеренных до умеренных уровней у контрольных животных, получавших изотип, с популяциями NKT P5 на 11 день (CD3ε ⁺ NK1.1 ⁺ CD44 ^{высокий} CD4 ^низкий CD62L ⁺ ), P6 (CD3ε ⁺ NK1.1 ⁺ CD44 ^— CD4 ^низкий CD62L ⁺ ) и популяция NK 11 дня P18 (CD3ε ^— NK1.1 ⁺ CD44 ^high ) среди выдающихся продуцентов IFN-γ.Более умеренная продукция IFN-γ наблюдалась в других популяциях TIL 11 дней, таких как T _H , популяции P31 (CD3ε ⁺ CD4 ⁺ CD44 ^mid CD69 ⁺ ), P32 (CD3ε ⁺ CD4 ⁺ CD44 ^низкий CD69 ^— ), P34 (CD3ε ⁺ γδTCR ^— CD4 ^низкий ; кластер с популяцией γδ Т-клеток P11), P37 (CD3ε ⁺ CD4 ⁺ CD44 ^{— ), а в день 11 T _C популяция P4 (CD3ε + CD8 + CD44 — CD69 — ).В тенденции, охватывающей многие популяции TIL, CB значительно увеличивал частоту IFN-γ + клеток или IFN-γ MFI клеток IFN-γ + . Это было особенно верно во время раннего роста опухоли MC38 в популяции P4 T _C на 11 день (фигура 4B) и на 11 день T _H в популяциях P31, P32, P34 и P37 (фигура 4C – F). На 11-й день в общей сложности в девяти субпопуляциях TIL наблюдалось значительное увеличение частоты клеток IFN-γ + (значения p см. В дополнительной таблице 6), а в трех субпопуляциях TIL наблюдалось значительное увеличение IFN-γ. MFI клеток IFN-γ + после CB (см. Дополнительную онлайн-таблицу 7 для значений p), тогда как только одна популяция показала незначительное снижение частоты IFN-γ + клеток после анти-PD-1 (P5; таблица 6).}

Рисунок 4

Изменения продукции IFN-γ среди TIL-популяций после лечения ингибиторами контрольной точки в ранние (11 день) и поздние (21 день) моменты времени. (A) Графики t-SNE с наложениями на тепловую карту IFN-γ комбинированных образцов TIL от контрольных (обработанных изотипом) мышей или мышей, получавших лечение анти-PD-1, анти-CTLA-4 или комбинированное лечение (анти-PD-1 и анти-CTLA-4) на 11-й и 21-й день подкожного роста опухоли MC38, причем теплые цвета (красный) представляют более высокие уровни окрашивания, а холодные цвета (синий) — более низкие уровни окрашивания.Шкала IFN-γ MFI приведена ниже. (B – H) Анализ экспрессии IFN-γ для P4 день 11 (B), P31 день 11 (C), P32 день 11 (D), P34 день 11 (E), P37 день 11 (F), P3 день 21 (G), и P12, день 21 (H). Для каждого из них расположение популяции в анализе t-SNE изображено в верхнем левом углу, объединенная точечная диаграмма IFN-γ в сравнении с экспрессией CD45.2 в верхнем правом углу, процент клеток, экспрессирующих IFN-γ (нижний левый), и IFN-γ MFI клеток IFN-γ ⁺ (внизу справа). Данные синего цвета обозначают временную точку 11-го дня, а данные красного цвета обозначают временную точку 21-го дня (* p≤0.05 лечение против изотипического контроля; ** p≤0,01 лечение по сравнению с изотипическим контролем). MFI — средняя интенсивность флуоресценции; t-SNE, t-распределенное стохастическое вложение соседей; TIL, лимфоцит, инфильтрирующий опухоль.

На 21 день значительная продукция IFN-γ наблюдалась среди NKT-популяции P26 (CD3ε ⁺ NK1.1 ⁺ CD44 ^mid CD4 ^— CD62L ^—) и среди NK-популяций 21-го дня P12 (CD3ε ^— NK1.1 ⁺ CD44 ^{высокий} CD45RA ^низкий ) и P17 (CD3ε ^— NK1.1 ^низкий CD44 ^{высокий} ). Однако влияние CB было более разнообразным через 21 день по сравнению с ранним ростом опухоли MC38. На 21 день T _C был представлен преимущественно P3 (CD3ε ⁺ CD8 ⁺ CD44 ^mid CD69 ⁺ ), тогда как T _H был представлен преимущественно P36 (CD3ε ⁺ CD4 ⁺ CD44 ^низкий ). В обоих случаях CB увеличивал продукцию IFN-γ в TIL, продуцирующем IFN-γ (рисунок 4G; дополнительные онлайн-таблицы 6 и 7), что позволяет предположить, что польза CB, наблюдаемая при раннем росте опухоли MC38, сохраняется в течение 21 дня.Напротив, продукция IFN-γ в некоторых менее часто встречающихся популяциях TIL была значительно снижена CB позже при росте опухоли MC38, включая T _H в популяции P20 на 21 день, популяции NKT P16 и P26 на 21 день (онлайн-дополнительная таблица 7), и для популяции NK 21-го дня P12 (рисунок 4H и дополнительная онлайн-таблица 6) и P13 (онлайн-дополнительная таблица 7).

CB вызывает небольшое изменение экспрессии CD107a среди популяций TIL MC38 TIL

В отличие от продукции TNFα и IFN-γ CB оказывает минимальное влияние на экспрессию CD107a на клеточной поверхности.Тепловая карта CD107a t-SNE, наложенная на объединенные образцы TIL, показала, что CD107a на клеточной поверхности был ограничен популяциями NKT и большинством популяций NK (рисунок 5A) и наблюдался только при низких частотах и ​​MFI среди T _C , T _H и γδT клеток. CB вызывал незначительное увеличение как экспрессии на поверхности клеток CD107a, так и MFI для основной популяции NKT P5 в момент времени 11 дня (фиг. 5B) и MFI для популяции NKT P26 21 дня (фигура 5C). Только популяции NK на 21 день P13, P16 и неидентифицированная популяция Т-клеток P1 на 11 день продемонстрировали снижение частот CD107a ⁺ клеток после CB (онлайн-дополнительная таблица 8).Наблюдалась картина умеренного увеличения MFI CD107a, наблюдаемая среди популяций TIL за 5 дней 11 и среди популяций TIL за 3 дня 21 (онлайн-дополнительная таблица 9). Однако, за исключениями, упомянутыми ранее, экспрессия CD107a на клеточной поверхности оставалась в подавляющем большинстве статична после CB и была в значительной степени повсеместной среди популяций NK и NKT (рисунок 5).

Рисунок 5

Изменения в экспрессии CD107a на клеточной поверхности среди популяций TIL после лечения ингибиторами контрольных точек в ранние (11 день) и поздние (21 день) моменты времени.(A) Графики t-SNE с наложениями на тепловую карту CD107a комбинированных образцов TIL от контрольных (обработанных изотипом) мышей или мышей, получавших лечение анти-PD-1, анти-CTLA-4 или комбинированное лечение (анти-PD-1 и анти- -CTLA-4) на 11-й и 21-й день подкожного роста опухоли MC38, причем теплые цвета (красный) представляют более высокие уровни окрашивания, а холодные цвета (синий) — более низкие уровни окрашивания. Шкала MFI CD107a указана ниже. (B – H) анализ экспрессии CD107a для P5-дня 11 (B) и P26-дня 21 (C). Для каждого из них расположение популяции в анализе t-SNE изображено в верхнем левом углу, точечный график CD107a в сравнении с CD45.2 вверху справа показан процент клеток, экспрессирующих CD107a (внизу слева) и CD107a MFI клеток CD107a ⁺ (внизу справа). Данные синего цвета обозначают временную точку 11-го дня, тогда как данные красного цвета обозначают временную точку 21-го дня (* p≤0,05 лечение по сравнению с изотипическим контролем; ** p≤0.01 лечение по сравнению с изотипическим контролем). MFI — средняя интенсивность флуоресценции; t-SNE, t-распределенное стохастическое вложение соседей; TIL, лимфоцит, инфильтрирующий опухоль.

Популяции NKT проявляют цитотоксический потенциал, но, вероятно, служат продуцентами цитокинов в опухолях MC38

NKT-клетки способны распознавать липидные антигены, представленные в контексте CD1d, причем наиболее широко охарактеризованная подгруппа экспрессирует инвариантный рецептор Т-клеток (TCR), распознающий CD1d -ограниченный альфа-галактозилцерамид (α-GalCer; iNKT).35–37 Большинство NKT-клеток в опухолях MC38 связывают нагруженный α-GalCer тетрамер CD1d (фиг. 6A), что указывает на то, что NKT MC38 в значительной степени являются iNKT. Хотя iNKT известны производством тяжелых цитокинов, они также продемонстрировали литический потенциал в различных контекстах, включая рак.38-40 Для обычных Т-клеток и NK-клеток CD107a служил надежным биомаркером цитолитической активности41-43. CD107a также коррелировал с цитотоксической дегрануляцией в NKT-клетках in vitro, 44 ​​использование CD107a в качестве суррогата цитотоксичности NKT менее изучено, и столь сильное окрашивание CD107a на поверхности клеток в популяциях MC38 NKT привело нас к исследованию их литического потенциала. против целей MC38.С этой целью мы сравнили цитотоксичность TIL, выделенного из резецированных опухолей MC38, против нетрансдуцированных клеток-мишеней MC38 (UT MC38), которые экспрессировали низкие уровни CD1d, или против клеток-мишеней MC38, сверхэкспрессирующих CD1d (CD1d ^{по сравнению с} ) (рисунок 6B). . Цитотоксичность против UT MC38 была значительно снижена за счет блокирования H-2K ^b , но не за счет блокирования CD1d (рисунок 6C), тогда как цитотоксичность против CD1d ^{по сравнению с клетками-мишенями} MC38 была значительно снижена за счет блокирования CD1d, но не до степени блокирования H -2K ^b (рисунок 6D).Подобным образом подкожный рост опухоли MC38 был значительно снижен, а общая выживаемость значительно улучшилась для клеток CD1d ^{по сравнению с клетками} MC38 по сравнению с UT MC38 или трансдуцированным EV контрольным MC38 (EV MC38) (фигура 6E, F). Эти эффекты требовали наличия неповрежденной иммунной системы, что подтверждается исследованиями роста опухоли на мышах NSG (рисунок 6G). Модифицированный MC38 показал лишь незначительные различия в отношении кинетики роста in vitro (фигура 6H). Мы также сравнили рост опухоли MC38 у мышей C57BL / 6 дикого типа (WT) и мышей, генетически лишенных CD1d (CD1d ^{— / —} ), у которых не развиваются как iNKT, так и NKT-клетки II типа.Опухоли 45 MC38 значительно выросли у мышей CD1d ^{— / —} к 14 дню постинокуляции (p = 0,0024; фигура 6I). Взятые вместе, эти исследования показывают, что хотя MC38 NKT обладают потенциалом цитолитической активности против клеток-мишеней MC38, они могут не вносить значимого вклада в общую цитотоксичность, наблюдаемую MC38 TIL против нетрансдуцированных клеток MC38. И это несмотря на явную способность инфильтрации NKT-клеток замедлять рост опухоли MC38, что, вероятно, свидетельствует об эффекторном ответе за счет секретируемых цитокинов, таких как TNFα, вместо прямой цитотоксичности против клеток MC38.

Рисунок 6.

Функциональный анализ сверхэкспрессии CD1d в опухолях MC38. (A) Обнаружение NKT-клеток, распознающих тетрамер CD1d a-GalCer среди MC38 TIL, методом проточной цитометрии. События были стробированы таким образом, чтобы исключить агрегаты, дебрис и нежизнеспособные клетки, до того, как клетки CD45.2 ⁺ были отобраны аналогично дополнительному онлайн-рисунку 3, за исключением того, что только CD3ε ⁺ NK1.1 ⁺ двойных положительных событий были отобраны для анализа. Контрольный образец FMO, в котором отсутствует тетрамер α-GalCer, изображен пунктирной черной линией, а тетрамер α-GalCer среди NKT-клеток MC38 показан красным цветом.(B) Экспрессия CD1d, измеренная с помощью проточной цитометрии на нетрансдуцированном (UT) MC38 (черный), пустом векторе (EV), контрольном MC38 (красный) или сверхэкспрессированном CD1d (CD1d ^{по сравнению с} ) MC38 (синий). Контрольные образцы FMO без окрашивания на CD1d показаны черной пунктирной линией. (C и D) TIL, выделенный из опухолей MC38, помещали в сокультуру с ⁵¹ CR-меченными UT (C) или CD1d ^{над клетками-мишенями} (D) MC38 при увеличивающемся соотношении эффектор-мишень, и определяли процент цитотоксичности. по ⁵¹ CR высвобождение через 4 часа в присутствии блокирующих антител против CD1d (серый), H-2K ^b (красный) или контрольного нерелевантного антитела IgG (пунктирный черный).Представитель трех экспериментов. (E и F) Подкожный рост опухоли MC38 (E) и общая выживаемость до конечной точки (F) мышей C57BL / 6, инокулированных в бок UT (черный пунктир), EV (серый) или CD1d ^{по сравнению с} (красный) MC38 ячеек (n = 12). (G) Подкожный рост опухоли MC38 у мышей NSG, инокулированных в бок клетками UT (черный) или CD1d ^поверх (красный) клеток MC38. (H) Кинетика роста in vitro клеток UT (черный пунктир), EV (серый) или CD1d ^на (красный) клетках MC38. (I) Рост опухоли MC38 у контрольных мышей дикого типа или у мышей CD1d ^{— / —} на 14 день после инокуляции (n = 10).* p≤0,05; ** p≤0.01; *** p≤0,001; **** p≤0,0001 для указанных сравнений. FMO, флуоресценция-минус-один; NKT, естественные Т-клетки-киллеры; TIL, лимфоцит, инфильтрирующий опухоль.

Обсуждение

Иммунное профилирование CB-чувствительного TIL выявило два контрастирующих ландшафта эффекторных лимфоцитов на 11 и 21 день роста опухоли MC38. В более ранний момент времени эффекторная функция, по-видимому, зависит от популяций сильно воспалительных NKT-клеток, продуцирующих большое количество TNFα, и составляет совокупное большинство всех TIL, тогда как значительно меньше NKT-клеток сохраняется в более поздний момент времени, что приводит к более низким уровням TNFα.Это одновременно с увеличением частоты клеток T _C и более активированных фенотипов, а также продукции IFN-γ среди популяций T _C и T _H . Важно отметить, что лечение CB, по-видимому, ускоряет это переключение, снижая TNFα во многих популяциях TIL, значительно снижая частоту NKT-клеток, одновременно увеличивая частоты T _C и T _H и продукцию IFN-γ. Это особенно верно для популяций T _H , многие из которых увеличивают частоту в 2–5 раз после CB.NK-клетки, по-видимому, менее динамичны между ранними и более поздними временными точками и, по-видимому, меньше подвержены влиянию CB. Эти результаты обеспечивают важный временной контекст переключения NKT-T-клеток, который может представлять собой ключевую веху, на которой противоопухолевый иммунный ответ поворачивается с оси, управляемой воспалением, в сторону адаптивной оси (онлайн-дополнительный рисунок 7). Таким образом, CB может иметь дополнительное преимущество в сокращении воспаления, связанного с опухолью на ранней стадии, которое широко признано признаком прогрессирования опухоли.

Объем этого анализа, хотя и был углубленным, был ограничен спектром инфильтрирующих опухоль NK, NKT и T-клеток. Недавние достижения в этой области подчеркнули важность инфильтрирующих опухоль В-клеток как регуляторов функции третичной лимфоидной структуры46–48 и антигенпредставляющих клеток в микроокружении опухоли.49 Это добавлено к множеству других иммунных клеток, влияющих на противоопухолевый иммунитет, включая макрофаги. , дендритные клетки и супрессивные популяции, такие как регуляторные Т-клетки и миелоидные супрессорные клетки.CB, как известно, снижает частоту иммуносупрессивных популяций, включая Treg.25 32 Хотя использованная здесь панель иммунного фенотипирования была ограничена отсутствием функционального маркера Treg, вполне вероятно, что популяции T _H , представляющие Treg, входят в число тех, которые продуцируют мало или отсутствует TNF-α или IFN-γ из-за склонности Treg продуцировать противовоспалительные или супрессивные цитокины, а не интерферонов типа I или провоспалительных факторов.50 Возможные популяции Treg включают P33, в которых не обнаруживается TNF-α или IFN- γ в любой момент времени или после любой обработки или контроля.Хотя это не показано на рисунке 2, P33 был значительно снижен CB (онлайн-дополнительная таблица 2). Временные исследования, такие как проведенное здесь, которое включает маркеры для подавляющих популяций и других популяций лимфоцитов, таких как B-клетки, могут предоставить дополнительный контекст или понимание в отношении переключения NKT / T-клеток, идентифицированного здесь, выявить дополнительные сдвиги иммунного ответа и расширить наше понимание того, как CB ответ может измениться со временем.

Это исследование показывает, что удивительная часть общего иммунного ответа представлена ​​NKT-клетками во время раннего роста опухоли MC38.Потенциал NKT-клеток и, в частности, iNKT-клеток, лизировать опухолевые клетки был хорошо описан, 38-40, но NKT-клетки широко не рассматриваются как основные участники клиренса опухоли, при этом некоторые субпопуляции участвуют в индуцированном опухолью иммуносупрессии из-за продуцирования растворимых супрессивных факторов или путем модуляции функции дендритных клеток.51 52 Здесь мы демонстрируем, что популяции NKT в TIL MC38 могут распознавать и лизировать клетки-мишени MC38 при сверхэкспрессии CD1d, что позволяет предположить, что родственный липидный антиген продуцируется MC38 и представлен CD1d .Однако низкие уровни CD1d, экспрессируемые на родительском MC38, недостаточны для значимой индукции цитотоксичности NKT. В некоторых случаях NKT-клетки могут быть способны лизировать клетки-мишени независимо от CD1d посредством NK-подобных механизмов, таких как взаимодействие NKG2D, 44 и, таким образом, нельзя исключать не-TCR-опосредованную цитотоксичность от вызовов MC38 NKT. Однако блокада H-2K ^b ясно демонстрирует, что большая часть цитотоксического давления от TIL MC38 исходит от обычных Т-клеток. Тем не менее, NKT-клетки MC38, по-видимому, сильно активированы и продуцируют большое количество TNFα, что повышает вероятность того, что значительная часть раннего иммунного ответа может быть опосредована воспалением, вторичным по отношению к активации NKT-ограниченного CD1d.Это подкрепляется значительным нарушением роста опухоли MC38 после сверхэкспрессии CD1d и увеличением опухолевой нагрузки у мышей, генетически лишенных CD1d. Роль TNF была названа парадоксальной 53 из-за наблюдений, что он может быть как протопухолем54, 55, так и противоопухолевым56-60, в зависимости от контекста в микросреде опухоли. Важно отметить, что TNFα, как было показано, усиливает регуляцию PD-L1 в микроокружении опухоли, 61 и, таким образом, его блокада преодолевает устойчивость к CB при меланоме.62 Хотя ранний контроль роста опухоли MC38 может выиграть от продукции TNFα, опосредованной NKT, это исследование предполагает, что согласие с этим ответом может быть предварительным условием, допустимым для обычного адаптивного иммунитета T _H и T _C , и дополняет реципрокную природу TNFα и осей иммунных контрольных точек.

Предыдущие отчеты идентифицировали истощенные популяции T _C , а также популяции ICOS ⁺ T _H в качестве основных подтипов TIL, отвечающих на CB в 21 день.25 32 Здесь мы сообщаем о значительном увеличении частота P4, популяция TIM-3 ⁺ T _C , лишенная центральных маркеров памяти. Эта популяция может быть аналогом истощенного типа T _C , описанного ранее.25 Среди TIL MC38 мы наблюдали большую гетерогенность в клетках T _H по сравнению с клетками T _C , и они включают высокоактивированный TIM-3. ⁺ ЭМ-подобная популяция P31 и менее активированные P35 и P36.Хотя возможно, что эти популяции аналогичны CB-отвечающим фолликулярно-подобным клеткам T _H , ранее описанным в опухолях MC38, необходимы 25 дополнительных данных о факторах транскрипции, чтобы провести более четкие параллели.

Из-за сильной инфильтрации иммунных клеток модель опухоли MC38 широко использовалась для изучения ответа на иммунотерапию. Тем не менее, участие NKT-клеток в этой модели не исследовалось, возможно, из-за временной природы NKT-ответа, описанного здесь.К 21 дню, моменту времени, характерному для большинства исследований MC38 in vivo, эффекторный ответ NKT снижается в пользу обычного ответа Т-клеток. Эти исследования не рассматривают участие NKT в других моделях опухолей, хотя выводы, сделанные здесь, предполагают, что другие опухоли, экспрессирующие CD1d, могут испытывать подобное переключение NKT / TNFα на T-клетку / IFN-γ. Важный вопрос, поднятый этими исследованиями, заключается в том, происходит ли аналогичное переключение в опухолях CD1d ^— . NKT-клетки — не единственные эффекторные клетки, способные продуцировать TNFα, и возможно, что популяции, аналогичные этим клеткам, могут существовать на ранних стадиях роста опухоли в других моделях.Аналогичным образом, другие клетки в микроокружении опухоли, такие как дендритные клетки, могут экспрессировать CD1d и представлять липидный антиген инфильтрирующим NKT-клеткам, тем самым вызывая противоопухолевый иммунитет.